發(fā)布時間：2021-05-08 11:21

　　研究目的:1、多柔比星作為蒽環(huán)類化療藥物是目前治療乳腺癌應(yīng)用最廣泛且療效比較好的藥物之一。而乳腺癌對化療藥物的耐藥性是限制多柔比星取得理想治療效果的主要因素,逆轉(zhuǎn)乳腺癌對多柔比星的耐藥性可能有助于提高乳腺癌治療療效。多柔比星的耐藥機(jī)制尚不十分清楚,近年的研究表明,異常表達(dá)的mi RNAs參與了多種腫瘤耐藥的形成。2、micro RNAs（mi RNAs）是一類高度保守的內(nèi)源性、非編碼、單鏈RNA分子,研究表明,其參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。我們通過檢索并下載了公共生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫中乳腺癌新輔助化療（含蒽環(huán)類藥物化療方案）病例的基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)及micro RNA數(shù)據(jù),通過生物信息學(xué)分析構(gòu)建了乳腺癌蒽環(huán)類藥物化療敏感性相關(guān)的mi RNA-m RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。并通過文獻(xiàn)復(fù)習(xí),確定mi R-520b及IGF-1R作為進(jìn)一步的研究目標(biāo)。mi R-520b的異常表達(dá)與胃癌、肝癌、膀胱癌、乳腺癌等多種腫瘤相關(guān)。在乳腺癌,mi R-520b在耐藥乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),并且在用多柔比星治療乳腺癌的敏感性上mi R-520b與胰島素樣生長因子1受體（insulin-like growth factor-1re... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：163 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
個人簡歷
英文縮略詞
摘要
ABSTRACT
前言
    文獻(xiàn)回顧
    參考文獻(xiàn)
第一部分 乳腺癌化療敏感性相關(guān)micro RNA-m RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的建立
    引言
    1.研究內(nèi)容
    2.方法
        2.1 數(shù)據(jù)的檢索及下載
        2.2 數(shù)據(jù)的預(yù)處理
        2.3 基因表達(dá)譜芯片的分析
        2.4 micro RNA表達(dá)譜芯片的分析
        2.5 mi RNA-Hub gene調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
        2.6 統(tǒng)計分析
    3.結(jié)果
        3.1 基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)集的基本信息
        3.2 DEGs的分析結(jié)果
        3.3 DEGs的功能富集分析及Pathway分析
        3.4 DEGs的PPI分析
        3.5 micro RNA數(shù)據(jù)集的基本信息
        3.6 差異micro RNA的分析
        3.7 耐藥相關(guān)mi RNA-m RNA網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建
    4.討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 mi RNA-520b的表達(dá)水平與乳腺癌細(xì)胞對多柔比星敏感性的關(guān)系
    引言
    1.主要材料與試劑
        1.1 乳腺癌組織
        1.2 細(xì)胞株
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 q PCR檢測新輔助化療前腫瘤組織標(biāo)本中mi R-520 的表達(dá)水平
        2.3 RT-PCR法檢測乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、MDA-MB-231，及其相應(yīng)的阿霉素耐藥株MCF-7/ADR、MDA-MB-231/ADR中mi R-520b的表達(dá)
        2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.5 MTT法 檢測MCF-7/ADR-NC、MDA-MB-231/ADR-NC、        MCF-7/ADR-mi R-520b mimics和MDA-MB-231/ADR-mi R-520bmimics細(xì)胞對多柔比星的敏感性的變化
        2.6 過表達(dá)mi R-520b對多柔比星處理后乳腺癌細(xì)胞增殖的影響..67
        2.7 過表達(dá)mi R-520b對多柔比星誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響..67
        2.8 western blot檢 測MCF-7/ADR-NC、MDA-MB-231/ADR-NC、        MCF-7/ADR-mi R-520b和MDA-MB-231/ADR-mi R-520b細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白caspase-3
        2.9 RT-PCR檢測凋亡相關(guān)caspase-3/7 活性及caspase-9 活性
        2.10 western blot檢測MCF-7/ADR-NC、MDA-MB-231/ADR-NC、        MCF-7/ ADR-mi R-520b和MDA-MB-231/ADR-mi R-520b細(xì) 胞中PI3K/AKT信號通路相關(guān)蛋白
        2.11 統(tǒng)計學(xué)方法
    3.結(jié)果
        3.1 mi R-520b在新輔助化療前乳腺癌患者組織標(biāo)本中的表達(dá) ..71
        3.2 mi R-520b在阿霉素耐藥株MCF-7/ADR、MDA-MB-231/ADR中的表達(dá)
        3.3 mi R-520b在 轉(zhuǎn)染mi R-520b mimics耐 藥株MCF-7/ADR、MDA-MB-231/ADR中的表達(dá)
        3.4 過表達(dá)mi R-520b后乳腺癌耐藥株對多柔比星的敏感性
        3.5 過表達(dá)mi R-520b對化療藥物多柔比星處理后乳腺癌細(xì)胞增殖的影響
        3.6 過表達(dá)mi R-520b對多柔比星誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞株凋亡的影響77
        3.7 過表達(dá)mi R-520b對 乳腺癌耐藥細(xì)胞MCF-7/ADR、MDA-MB-231/ADR凋亡相關(guān)基因的影響
        3.8 過表達(dá)mi R-520b對PI3K/AKT信號通路中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    4.小結(jié)
第三部分 mi R-520b靶向調(diào)控IGF-1R增強(qiáng)對乳腺癌耐藥細(xì)胞株敏感性機(jī)制研究
    引言
    1.主要材料與試劑
        1.1 細(xì)胞株
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2.方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 IGF-1R在乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)
        2.3 組織中表達(dá)相關(guān)性檢測
        2.4 IGF-1R對乳腺癌細(xì)胞耐藥性的影響
        2.5 rescue實(shí)驗(yàn)：IGF-1R作為mi R-520b下游靶基因直接參與對乳腺癌耐藥性的影響
        2.6 靶基因預(yù)測
        2.7 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)
        2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 IGF-1R在乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)
        3.2 組織中表達(dá)相關(guān)性檢測
        3.3 IGF-1R對乳腺癌細(xì)胞耐藥性的影響
        3.4 IGF-1R作為mi R-520b下游靶基因直接參與對乳腺癌耐藥性的影響
        3.5 靶基因預(yù)測結(jié)果
        3.6 IGF-1R是mi R-520b的直接靶基因
    4.小結(jié)
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微小RNA-21對人乳腺癌細(xì)胞株紫杉醇耐藥性的影響及其機(jī)制[J]. 趙遵蘭,蔡穎,王洋洋,夏春磊,李從新,陳素蓮,楊清玲,陳昌杰.  浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2015 (04)
[2]胰島素樣生長因子-1在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用[J]. 閻曉路,高哲,孫云.  河北醫(yī)藥. 2014(20)
[3]人工流產(chǎn)與中國女性乳腺癌關(guān)聯(lián)性的薈萃分析[J]. 郭雪君,張寅靜,梅勇.  醫(yī)學(xué)研究雜志. 2014(02)
[4]miRNA與乳腺癌發(fā)生發(fā)展和多藥耐藥的研究現(xiàn)狀[J]. 周明祎,白雪峰,魏敏杰.  中華腫瘤防治雜志. 2011(21)
[5]小分子IGF-1R抑制劑的研究進(jìn)展[J]. 徐巖,王廣樹,孫薇,楊曉虹,徐利保.  藥學(xué)學(xué)報. 2008(10)
[6]凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax、bad與乳腺癌[J]. 于冰,孫治君.  中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2007(06)
[7]武漢地區(qū)女性乳腺癌危險因素的病例對照研究[J]. 韓定芬,馬駿,周新,邱暉,方黎,黃姝.  中華流行病學(xué)雜志. 2004(03)
[8]乳腺癌危險因素綜合評價及其趨勢預(yù)測[J]. 方亞,施侶元.  中華流行病學(xué)雜志. 2003(07)

博士論文
[1]全球女性乳腺癌疾病負(fù)擔(dān)分析及其與社會經(jīng)濟(jì)水平和醫(yī)療質(zhì)量關(guān)系的初步探討[D]. 胡凱敏.浙江大學(xué) 2016
[2]MicroRNA-195調(diào)控RAF1蛋白的表達(dá)增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞對阿霉素藥物的敏感性的機(jī)制研究[D]. 楊舸.重慶醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號：3175251