發(fā)布時(shí)間：2021-05-08 04:26

　　角膜位于眼組織的最外層,易受到損傷。我國(guó)為工業(yè)農(nóng)業(yè)大國(guó),出現(xiàn)角膜損傷的現(xiàn)象也較為常見(jiàn)。角膜病已成為我國(guó)第二大致盲性眼病。目前,我國(guó)有超過(guò)500萬(wàn)因各種角膜病致盲的患者。視力下降乃至失明不但嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量,更給家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。雖然其中大多數(shù)人可以通過(guò)角膜移植手術(shù)重見(jiàn)光明,但是移植材料短缺是一個(gè)世界難題。由于捐贈(zèng)角膜供體的匱乏,國(guó)內(nèi)每年僅能完成不到1萬(wàn)例的角膜移植手術(shù)。角膜病正逐漸成為不可逆致盲的主要原因。由于膠原是角膜基質(zhì)的主要成分,因此在眾多的天然高分子中,膠原用做角膜再生修復(fù)材料有著不可比擬的優(yōu)勢(shì)。但膠原基材料存在著力學(xué)強(qiáng)度不足、不耐受縫合等問(wèn)題,限制了其廣泛應(yīng)用。同時(shí),角膜移植術(shù)后恢復(fù)過(guò)程中,易導(dǎo)致角膜基質(zhì)瘢痕性愈合,形成白斑影響視功能重建。此外,以往大多數(shù)研究集中于膠原基材料的制備與改性,如賦予材料更好的強(qiáng)度和抗菌性能等,對(duì)膠原自身在角膜組織修復(fù)中的作用研究較少,膠原與細(xì)胞或組織的相互作用不夠明確。因此,本文首先采用生物安全性良好的可食用有機(jī)酸交聯(lián)劑和實(shí)驗(yàn)室自主合成的高生物相容性高效醛交聯(lián)劑分別對(duì)膠原進(jìn)行改性。相比于傳統(tǒng)膠原類(lèi)交聯(lián)劑有著交聯(lián)效率高、顯色反應(yīng)小、生物... 

【文章來(lái)源】：華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：133 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstracts
主要符號(hào)表
第一章 緒論
    1.1 角膜組織與角膜相關(guān)疾病
        1.1.1 角膜的結(jié)構(gòu)與功能
        1.1.2 角膜疾病與治療
    1.2 角膜損傷后的修復(fù)過(guò)程
        1.2.1 角膜上皮損傷修復(fù)
        1.2.2 角膜基質(zhì)損傷修復(fù)
    1.3 角膜板層移植術(shù)及術(shù)后評(píng)估
        1.3.1 角膜板層移植術(shù)
        1.3.2 術(shù)后常見(jiàn)問(wèn)題
        1.3.3 術(shù)后常用儀器與觀察指標(biāo)
    1.4 角膜替代與再生性修復(fù)材料
        1.4.1 羊膜
        1.4.2 脫細(xì)胞角膜基質(zhì)
        1.4.3 人工合成高分子聚合物
        1.4.4 天然提取高分子聚合物
    1.5 膠原及其在角膜再生修復(fù)材料中的應(yīng)用
        1.5.1 膠原簡(jiǎn)介
        1.5.2 膠原基角膜再生修復(fù)材料
    1.6 本論文的研究目的、意義、研究?jī)?nèi)容及創(chuàng)新性
第二章 羧酸類(lèi)交聯(lián)劑改性膠原復(fù)合膜的制備及性能研究
    2.1 引言
    2.2 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.2 膠原-食用有機(jī)酸復(fù)合膜的制備
        2.2.3 膠原-食用有機(jī)酸復(fù)合膜的性能表征
        2.2.4 膠原-食用有機(jī)酸復(fù)合膜的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.3.1 飽和含水率
        2.3.2 光學(xué)性能
        2.3.3 力學(xué)性能
        2.3.4 耐酶解性能
        2.3.5 角膜上皮細(xì)胞在材料上的黏附與生長(zhǎng)
        2.3.6 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.3.7 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    2.4 本章小結(jié)
第三章 醛類(lèi)交聯(lián)劑改性膠原復(fù)合膜的制備及性能研究
    3.1 引言
    3.2 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        3.2.2 膠原基材料的制備
        3.2.3 膠原基材料的性能表征
        3.2.4 膠原基材料的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.3.1 表面與截面形貌分析
        3.3.2 飽和含水率
        3.3.3 光學(xué)性能
        3.3.4 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)透過(guò)性能
        3.3.5 力學(xué)性能
        3.3.6 耐酶解性能
        3.3.7 交聯(lián)劑IC50 測(cè)試
        3.3.8 角膜上皮細(xì)胞在材料上的黏附與生長(zhǎng)
        3.3.9 角膜上皮細(xì)胞移行實(shí)驗(yàn)
        3.3.10 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    3.4 本章小結(jié)
第四章 具有瘢痕抑制能力的膠原基角膜再生修復(fù)材料的制備及理化性能研究
    4.1 引言
    4.2 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.2 AuNP與 miRNA結(jié)合能力
        4.2.3 miRNA在膠原成膜環(huán)境中的穩(wěn)定性
        4.2.4 AuNP對(duì) miRNA穩(wěn)定性的保護(hù)能力
        4.2.5 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 負(fù)載AuNP/miR-133b的膠原基材料制備
        4.2.7 膠原基材料的性能表征
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.3.1 AuNP與 miRNA-133b的結(jié)合能力
        4.3.2 膠原成膜環(huán)境下miRNA-133b的穩(wěn)定性
        4.3.3 AuNP對(duì) miRNA-133b穩(wěn)定性的保護(hù)能力
        4.3.4 AuNP對(duì)角膜基質(zhì)細(xì)胞的毒性測(cè)試
        4.3.5 角膜基質(zhì)細(xì)胞的移行實(shí)驗(yàn)
        4.3.6 材料表面形貌分析
        4.3.7 飽和含水率
        4.3.8 光學(xué)性能
        4.3.9 力學(xué)性能
    4.4 本章小結(jié)
第五章 膠原基角膜再生修復(fù)材料的瘢痕抑制能力研究
    5.1 引言
    5.2 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        5.2.2 負(fù)載熒光標(biāo)記AuNP/miR-133b的膠原基材料制備
        5.2.3 AuNP/miR-133b進(jìn)入角膜基質(zhì)細(xì)胞能力檢測(cè)
        5.2.4 免疫熒光染色
        5.2.5 RNA提取與實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)
        5.2.6 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        5.3.1 AuNP/miR-133b進(jìn)入角膜基質(zhì)細(xì)胞能力
        5.3.2 材料中AuNP/miR-133b進(jìn)入角膜組織能力檢測(cè)
        5.3.3 肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化關(guān)鍵蛋白α-SM和 Col-1 免疫熒光染色
        5.3.4 肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化關(guān)鍵基因α-SM和 Col-1的qRT-PCR檢測(cè)
        5.3.5 新西蘭兔角膜板層移植實(shí)驗(yàn)
    5.4 小結(jié)
第六章 炎癥環(huán)境下角膜細(xì)胞與膠原基材料的相互作用研究
    6.1 引言
    6.2 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        6.2.2 膠原基膜材料的制備
        6.2.3 膠原基材料的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        6.2.4 膠原基材料對(duì)IL-6與MMP-1 的吸附能力實(shí)驗(yàn)
        6.2.5 膠原基材料的降解量檢測(cè)
        6.2.6 膠原基材料的降解產(chǎn)物對(duì)角膜細(xì)胞表達(dá)IL-6 的影響
        6.2.7 新西蘭兔角膜板層移植模型淚液中IL-6 含量檢測(cè)
    6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        6.3.1 炎癥環(huán)境下IL-6與MMP-1 在角膜細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的表達(dá)
        6.3.2 膠原基材料對(duì)炎癥環(huán)境中角膜細(xì)胞表達(dá)IL-6與MMP-1 的影響
        6.3.3 膠原基材料對(duì)IL-6與MMP-1 的吸附作用
        6.3.4 角膜細(xì)胞對(duì)膠原基材料的降解作用
        6.3.5 膠原基材料的降解產(chǎn)物對(duì)角膜細(xì)胞表達(dá)IL-6 的影響
        6.3.6 新西蘭兔角膜板層移植模型中膠原基材料對(duì)淚液中IL-6 表達(dá)的影響
    6.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
附件



本文編號(hào)：3174670