發(fā)布時間：2021-04-25 07:54

　　目的:正常細(xì)胞的功能維持依賴于細(xì)胞內(nèi)精細(xì)的物質(zhì)運(yùn)輸體系,相較于正常細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)代謝、信號傳導(dǎo)更活躍。細(xì)胞質(zhì)動力蛋白是細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)囊粋�重要載體,是由多個亞基組成的分子量較大的復(fù)合物,其主要功能為沿著微管向微管負(fù)端進(jìn)行長距離細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸,以及有絲分裂過程中核膜破裂、紡錘體組裝、染色體運(yùn)動等。既往研究顯示其功能異�？蓪�(dǎo)致腫瘤發(fā)生,并且在腫瘤發(fā)展過程中,細(xì)胞質(zhì)動力蛋白可以與某些促癌蛋白協(xié)同作用促進(jìn)腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移。DYNC1I1是細(xì)胞質(zhì)動力蛋白的重要貨物結(jié)合亞基,其在腫瘤中的作用存在爭議。早期研究發(fā)現(xiàn)其在肝細(xì)胞癌中表達(dá)增加,但最近研究顯示在腦膠質(zhì)瘤中其表達(dá)下調(diào),抑制腫瘤進(jìn)展,高表達(dá)DYNC1I1腦膠質(zhì)瘤患者預(yù)后較好。目前對DYNC1I1在腫瘤中的作用研究有限,在胃癌中尚無報道。我們前期在線數(shù)據(jù)分析表明DYNC1I1是胃癌預(yù)后不良因素,但在胃癌中的作用及機(jī)制并不明確。在這里,我們主要研究DYNC1I1在胃癌中的作用及其潛在機(jī)制。材料與方法:1.利用MTT法測定細(xì)胞活性。2.利用ELISA檢測細(xì)胞上清液中IL-6的濃度。3.利用eBioscience^TMAnnex... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :細(xì)胞質(zhì)動力蛋白中間鏈1（DYNC1I1）促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖、遷移及機(jī)制研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.2.1 主要試劑
            2.2.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 Western blot檢測蛋白水平
            2.2.3 脂質(zhì)體介導(dǎo)siRNA/shRNA轉(zhuǎn)染
            2.2.4 實(shí)時定量PCR（Real-Time PCR）
            2.2.5 網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫下載及數(shù)據(jù)分析
            2.2.6 MTT法進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測
            2.2.7 mRNA Array芯片篩查
            2.2.8 集落形成測定
            2.2.9 細(xì)胞遷移能力檢測
            2.2.10 免疫共沉淀
            2.2.11 免疫熒光
            2.2.12 酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbentassay,ELISA）
            2.2.13動物實(shí)驗(yàn)
            2.2.14 慢病毒轉(zhuǎn)染
            2.2.15 免疫組化
            2.2.16 細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白提取
            2.2.17 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 高DYNC1I1 表達(dá)與胃癌患者預(yù)后不良相關(guān)
        3.2 DYNC1I1 促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖和遷移
        3.3 DYNC1I1 促進(jìn)小鼠體內(nèi)胃癌的增殖和轉(zhuǎn)移
        3.4 DYNC1I1 通過上調(diào)IL-6 發(fā)揮作用
        3.5 DYNC1I1 上調(diào)IL-6 促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖和遷移
        3.6 DYNC1I1 通過促進(jìn)NF-κB核轉(zhuǎn)運(yùn)上調(diào)IL-6 的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論一
第二部分 :DYNC1I1 促進(jìn)入核輔助因子TNPO2表達(dá)
    6 前言
    7 材料與方法
        7.1 試劑
        7.2 實(shí)驗(yàn)方法
            7.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            7.2.2 脂質(zhì)體介導(dǎo)siRNA轉(zhuǎn)染
            7.2.3 MTT法進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測
            7.2.4 細(xì)胞周期檢測
            7.2.5 實(shí)時定量RT-PCR（Real-Time qPCR）
            7.2.6 Western blot檢測蛋白水平
            7.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    8 結(jié)果
        8.1 DYNC1I1 上調(diào)胃癌細(xì)胞中TNPO2 表達(dá)
        8.2 高TNPO2 表達(dá)的胃癌患者預(yù)后不良
        8.3 TNPO2 促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖
        8.4 DYNC1I1 上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子SP1 上調(diào)TNPO2 表達(dá)
    9 討論
    10 結(jié)論二
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介



本文編號：3159021