第一部分MEG3調(diào)節(jié)VSMC功能在螺旋動(dòng)脈重鑄中的作用目的通過研究MEG3在子癇前期胎盤和蛻膜中的表達(dá),同時(shí)在基因水平靶向調(diào)控MEG3在人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞系HA-VSMC中的表達(dá),探討MEG3調(diào)節(jié)VSMC功能在螺旋動(dòng)脈重鑄中的作用。方法1.實(shí)驗(yàn)分組:子癇前期組和正常妊娠對(duì)照組:收集兩組孕婦晚孕期胎盤和蛻膜組織,q RT-PCR檢測(cè)兩組組織中MEG3的表達(dá);2.收集正常孕婦人工流產(chǎn)蛻膜組織,利用原位雜交定位MEG3在螺旋動(dòng)脈肌層的表達(dá),3.MEG3的調(diào)控:（1）上調(diào)MEG3:轉(zhuǎn)染MEG3過表達(dá)質(zhì)粒至VSMC（MEG3過表達(dá)組）;（2）下調(diào)MEG3:轉(zhuǎn)染MEG3干擾質(zhì)粒至VSMC（MEG3抑制組）;（3）分別轉(zhuǎn)染相應(yīng)的空白質(zhì)粒（陰性對(duì)照組）;（4）不做處理的VSMC（空白對(duì)照組）;4.檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率:q RT-PCR檢測(cè)MEG3 m RNA表達(dá);5.CCK-8法測(cè)定轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞活性;6.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞凋亡水平;7.Transwell模型檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞的遷移能力;結(jié)果1.子癇前期組胎盤和蛻膜組織中MEG3的表達(dá)明顯低于正常孕婦;原位雜交結(jié)果顯示MEG3廣泛表達(dá)于蛻膜間質(zhì)... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1.兩組孕婦標(biāo)本中MEG3的表達(dá)水平子癇前期組胎盤及蛻膜組織中MEG3的表達(dá)明顯低于對(duì)照組

MEG3 的表達(dá)（0.42±0.05 vs. 0.97±0.13）顯著低于正常孕婦。圖 1-1. 兩組孕婦標(biāo)本中 MEG3 的表達(dá)水平 子癇前期組胎盤及蛻膜組織中 MEG3 的表達(dá)明顯低于對(duì)照組。（placenta：胎盤；decidual：蛻膜； *P<0.05； **P<0.01）三、MEG3 在人早孕蛻膜中的定位與表達(dá)如圖 1-2 所示，原位雜交結(jié)果顯示，MEG3 在蛻膜 VSMC 呈陽性表達(dá)。

圖 1-3. qRT-PCR 檢測(cè) MEG3 轉(zhuǎn)染效率 A：轉(zhuǎn)染 MEG3 干擾質(zhì)粒能顯著降低 VSMCMEG3 mRNA 表達(dá)水平；B：轉(zhuǎn)染 MEG3 過表達(dá)質(zhì)粒能顯著提高 VSMC MEG3 表達(dá)。（control 代表空白對(duì)照組；shMEG3 代表 MEG3 抑制組；shNC 代表 MEG3 抑制組的陰性對(duì)照；H-MEG3 代表 MEG3 過表達(dá)組； NC 代表 MEG3 過表達(dá)組的陰性對(duì)照； *P<0.05；**P<0.01；ns 代表無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）五、MEG3 對(duì) VSMC 功能的影響1、細(xì)胞活性CCK-8 法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后 VSMC 細(xì)胞活性情況，如圖 1-4 所示，同陰性對(duì)照組相比，過表達(dá)組活性降低（0.56±0.02 vs. 0.82±0.04, P<0.001），抑制組細(xì)胞活性升高（1.25±0.02 vs. 0.71±0.02, P<0.001）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]長(zhǎng)鏈非編碼RNA母系印記基因3對(duì)人類絨毛發(fā)育的作用[J]. 丁海遐,馬妍,盛菲,紀(jì)逸萱,李文.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(02)
[2]長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR調(diào)節(jié)PE滋養(yǎng)細(xì)胞功能的研究[J]. 鄒艷芬,孫麗洲.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(01)



本文編號(hào)：3129730