第一部分MEG3調(diào)節(jié)VSMC功能在螺旋動脈重鑄中的作用目的通過研究MEG3在子癇前期胎盤和蛻膜中的表達,同時在基因水平靶向調(diào)控MEG3在人主動脈血管平滑肌細胞系HA-VSMC中的表達,探討MEG3調(diào)節(jié)VSMC功能在螺旋動脈重鑄中的作用。方法1.實驗分組:子癇前期組和正常妊娠對照組:收集兩組孕婦晚孕期胎盤和蛻膜組織,q RT-PCR檢測兩組組織中MEG3的表達;2.收集正常孕婦人工流產(chǎn)蛻膜組織,利用原位雜交定位MEG3在螺旋動脈肌層的表達,3.MEG3的調(diào)控:（1）上調(diào)MEG3:轉(zhuǎn)染MEG3過表達質(zhì)粒至VSMC（MEG3過表達組）;（2）下調(diào)MEG3:轉(zhuǎn)染MEG3干擾質(zhì)粒至VSMC（MEG3抑制組）;（3）分別轉(zhuǎn)染相應的空白質(zhì)粒（陰性對照組）;（4）不做處理的VSMC（空白對照組）;4.檢測轉(zhuǎn)染效率:q RT-PCR檢測MEG3 m RNA表達;5.CCK-8法測定轉(zhuǎn)染后各組細胞活性;6.流式細胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后各組細胞凋亡水平;7.Transwell模型檢測轉(zhuǎn)染后各組細胞的遷移能力;結(jié)果1.子癇前期組胎盤和蛻膜組織中MEG3的表達明顯低于正常孕婦;原位雜交結(jié)果顯示MEG3廣泛表達于蛻膜間質(zhì)... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【部分圖文】：

圖1-1.兩組孕婦標本中MEG3的表達水平子癇前期組胎盤及蛻膜組織中MEG3的表達明顯低于對照組

MEG3 的表達（0.42±0.05 vs. 0.97±0.13）顯著低于正常孕婦。圖 1-1. 兩組孕婦標本中 MEG3 的表達水平 子癇前期組胎盤及蛻膜組織中 MEG3 的表達明顯低于對照組。（placenta：胎盤；decidual：蛻膜； *P<0.05； **P<0.01）三、MEG3 在人早孕蛻膜中的定位與表達如圖 1-2 所示，原位雜交結(jié)果顯示，MEG3 在蛻膜 VSMC 呈陽性表達。

圖 1-3. qRT-PCR 檢測 MEG3 轉(zhuǎn)染效率 A：轉(zhuǎn)染 MEG3 干擾質(zhì)粒能顯著降低 VSMCMEG3 mRNA 表達水平；B：轉(zhuǎn)染 MEG3 過表達質(zhì)粒能顯著提高 VSMC MEG3 表達。（control 代表空白對照組；shMEG3 代表 MEG3 抑制組；shNC 代表 MEG3 抑制組的陰性對照；H-MEG3 代表 MEG3 過表達組； NC 代表 MEG3 過表達組的陰性對照； *P<0.05；**P<0.01；ns 代表無統(tǒng)計學意義）五、MEG3 對 VSMC 功能的影響1、細胞活性CCK-8 法檢測轉(zhuǎn)染后 VSMC 細胞活性情況，如圖 1-4 所示，同陰性對照組相比，過表達組活性降低（0.56±0.02 vs. 0.82±0.04, P<0.001），抑制組細胞活性升高（1.25±0.02 vs. 0.71±0.02, P<0.001）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]長鏈非編碼RNA母系印記基因3對人類絨毛發(fā)育的作用[J]. 丁海遐,馬妍,盛菲,紀逸萱,李文.  第二軍醫(yī)大學學報. 2017(02)
[2]長鏈非編碼RNA HOTAIR調(diào)節(jié)PE滋養(yǎng)細胞功能的研究[J]. 鄒艷芬,孫麗洲.  四川大學學報(醫(yī)學版). 2015(01)



本文編號：3129730