第一部分潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)直腸癌小鼠模型的構(gòu)建和mi RNA-200b的表達(dá)水平研究目的:構(gòu)建潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)直腸癌（ulcerative colitis related colorectal cancer,UCRCC）小鼠模型,并檢測(cè)各組小鼠腸道內(nèi)mi RNA-200b的表達(dá)情況,以探討mi RNA-200b的表達(dá)水平是否與UCRCC的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。方法:構(gòu)建過表達(dá)mi RNA-200b的慢病毒載體,并設(shè)立陰性對(duì)照慢病毒（lentiviral vector-negative control,LV-NC）;取體重在18-20克左右的無特定病原體（specific pathogen free,SPF）級(jí)野生型C57 BL/6J小鼠,隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組（Normal group）、模型組（Model group）、過表達(dá)mi RNA-200b慢病毒組（mi RNA-200b組）、陰性慢病毒對(duì)照組（negative control組,NC組）和復(fù)方苦參湯組（CSD組）,采用單次注射氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）聯(lián)合3個(gè)循環(huán)自由飲用葡聚糖硫酸鈉（dextran s... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

上海吉?jiǎng)P基因有限公司提供的慢病毒載體圖譜

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文25圖2.實(shí)驗(yàn)流程示意圖1.2.3.4組織芯片的制備（1）目標(biāo)組織的收集：根據(jù)各組小鼠結(jié)腸切片的HE染色病理診斷結(jié)果，確定石蠟組織切塊上的取樣靶點(diǎn)。（2）制備受體蠟塊，根據(jù)樣本數(shù)量確定打孔數(shù)目及區(qū)域，在蠟塊中間設(shè)計(jì)4行×4列點(diǎn)組織陣列，并標(biāo)記各孔。（3）植入組織蠟芯：待組織樣本蠟塊受熱后，用取樣針將各取樣靶點(diǎn)中的目標(biāo)組織芯轉(zhuǎn)移到受體蠟塊上已標(biāo)記的相應(yīng)孔中。（4）將已植入組織蠟芯的受體蠟塊置于60℃烤箱中烘烤約10分鐘，隨后取出，室溫下冷卻，以促進(jìn)受體蠟塊和組織蠟芯緊密融合。（5）切片：將已融合完全的蠟塊放入4℃冰箱中約30分鐘，然后用切片機(jī)切成4微米厚度的切片，并用烤箱加熱烤片，使組織貼附于載玻片上。1.2.3.5PCR檢測(cè)

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文31圖3.重組質(zhì)粒載體陽(yáng)性克隆測(cè)序結(jié)果比對(duì)結(jié)果如下：ACTGTAAACACAAAGATATTAGTACAAAATACGTGACGTAGAAAGTAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTT


本文編號(hào)：3102777