外源性EPO通過調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞保護(hù)糖尿病視網(wǎng)膜病變血-視網(wǎng)膜內(nèi)屏障
發(fā)布時(shí)間:2021-03-16 02:43
目的:研究玻璃體腔內(nèi)注射促紅細(xì)胞生成素(EPO)在早期糖尿病視網(wǎng)膜病變(簡稱“糖網(wǎng)病”)中對血-視網(wǎng)膜內(nèi)屏障(iBRB)的保護(hù)作用及其對視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用;并利用體外實(shí)驗(yàn)探討糖網(wǎng)病中小膠質(zhì)細(xì)胞的活化與iBRB破壞的關(guān)系以及EPO對其的作用。方法:采用腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。建模同時(shí),將大鼠分為兩組,分別行玻璃體腔內(nèi)注射EPO和磷酸鹽緩沖液(PBS)。糖尿病發(fā)病2周后,采用異硫氰酸熒光素-右旋糖酐(FITC-Dextran)灌注實(shí)驗(yàn)檢測視網(wǎng)膜滲漏情況、采用免疫熒光檢測和分析視網(wǎng)膜中小膠質(zhì)細(xì)胞的分布、數(shù)量和形態(tài)學(xué)變化、采用免疫熒光和Western blot檢測細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)情況。采用氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)處理BV2小膠質(zhì)細(xì)胞建立細(xì)胞模型,通過CCK-8測定細(xì)胞活力選擇合適的oxLDL濃度和處理時(shí)間。收集不同處理組的小膠質(zhì)細(xì)胞上清液,用于培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC),并通過FITC-Dextran滲漏實(shí)驗(yàn)和跨上皮電阻(TEER)實(shí)驗(yàn)檢測HUVEC屏障的完整性。采用免疫熒光、實(shí)時(shí)定量PCR及Western blot等...
【文章來源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:104 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2各組大鼠視網(wǎng)膜中FTTC-Dextran的滲漏情況
圖3各組大鼠視網(wǎng)膜中淺層小肢質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)變化
圖4各組大鼠視網(wǎng)膜中深層小肢質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)變化
本文編號:3085264
【文章來源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:104 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2各組大鼠視網(wǎng)膜中FTTC-Dextran的滲漏情況
圖3各組大鼠視網(wǎng)膜中淺層小肢質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)變化
圖4各組大鼠視網(wǎng)膜中深層小肢質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)變化
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