(一)雪貂作為動物模型,在科學(xué)研究中有著其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),人類從1933年開始就將雪貂用作于疾病研究的動物模型之一。首先雪貂的大腦皮層已經(jīng)出現(xiàn)了溝回折疊的結(jié)構(gòu),這使得雪貂和小鼠相比在大腦發(fā)育與結(jié)構(gòu)上更加的接近人類;其次雪貂的生殖周期較短,生殖能力較強(qiáng)。而且個體的獲得性也比非人靈長類動物更容易。在實(shí)驗(yàn)操作的方便性以及實(shí)驗(yàn)成本上都具有優(yōu)勢。盡管雪貂在癌癥、流感等科學(xué)研究上具有許多優(yōu)點(diǎn),但也有其局限性,導(dǎo)致這種局限性的很大一個原因就在于目前沒有報道過對雪貂進(jìn)行有效而精準(zhǔn)的基因修飾方法。我們利用CRISPR/CAS9系統(tǒng),通過將CAS9 mRNA和sgRNA共同注射進(jìn)雪貂的1-cell時期的胚胎,針對Doublecortin（DCX）基因序列造成其突變。成功的獲得了高效基因修飾的雪貂,其效率可以高達(dá)73.3%。DCX基因在大腦發(fā)育以及大腦皮層溝回產(chǎn)生的過程中有著重要的作用。對于人類的DCX突變患者來說,其大腦皮層變得光滑,腦室增大,也就是我們所說的“平滑腦”表型,而DCX突變的雪貂體內(nèi),大腦皮層也變得光滑,同時伴有腦室增大皮層變厚以及神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)變化等表型,這些表型都與人類患者十分的相似。我們進(jìn)一... 

【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１小鼠和人腦的神經(jīng)前體細(xì)胞概況??圖注：（Ａ）嚙齒類大腦皮層中參與皮層發(fā)育的神經(jīng)前體細(xì)胞

ｓｇＲＮＡ的選擇上我們使用了網(wǎng)絡(luò)上的??ｓｇＲＮＡ設(shè)計(jì)網(wǎng)站來設(shè)計(jì)（ｈｔｔｐ：／／ｃｒｉｓｐｒ．ｍｉｔ．ｅｄｕ／?）?ＣＡＳ９的設(shè)計(jì)則根據(jù)??（ｈｔｔｐ：／／ＣＡＳ９．ｃｂｉ．ｐｋｕ．ｅｄｕ．ｃｎ／）網(wǎng)絡(luò)工具來設(shè)計(jì)。經(jīng)過篩選后，我們確定了兩個來??源于不同外顯子上的不同的ｓｇＲＮＡ。??Ｅ１?Ｅ２?Ｅ３?Ｅ４?Ｅ５?Ｅ６??Ｄ?Ｈｉ?ＩＩ?Ｉ?????ｓｇＲＮＡ２??５－ＣＴＡＭＣＡＧＴＣＡＣＣＣＡＴＣＴＣＣＡＣＧＣＣＣＡＣＣＡＧＴＣＣＴＧＧＣＡＧＣＣＴＣＣＧＱ－３＇??圖２．１?基因ｓｇＲＮＡ設(shè)計(jì)示意圖??圖注：綠色標(biāo)記為ＰＡＭ序列，ｓｇＲＮＡ靶位點(diǎn)用紅色標(biāo)記??２５??

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Creating animal models, why not use the Chinese tree shrew（Tupaia belangeri chinensis）?[J]. Yong-Gang Yao.  Zoological Research. 2017(03)
[2]Tree shrew（Tupaia belangeri） as a novel non-human primate laboratory disease animal model[J]. Ji Xiao,Rong Liu,Ce-Shi Chen.  Zoological Research. 2017(03)



本文編號：3026779