卵巢癌是死亡率最高的婦科惡性腫瘤,近年來藥物抵抗成為治療卵巢癌的一個主要挑戰(zhàn)。腫瘤細胞的化療耐藥與多種因素相關,包括:DNA損傷修復,化療藥物誘導的凋亡逃逸,ROS介導的氧化還原狀態(tài)以及蛋白降解等。目前認為,探討不同信號間的交互調(diào)控能更深入的闡明腫瘤耐藥機制。蛋白酶體活性在腫瘤發(fā)生及化療耐藥中發(fā)揮了重要作用,且多種癌癥中蛋白酶體水平異常升高。蛋白酶體能夠清除氧化應激過程中受損蛋白以減輕氧化應激損傷,而抗氧化能力的增強能夠促進20S及19S蛋白酶體亞基的表達。提示,蛋白酶體活性與氧化還原功能間存在著相互調(diào)控作用,探究兩者間關系將更加有助于解決卵巢癌化療耐藥問題。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（UPS）通過調(diào)節(jié)參與信號轉導和細胞周期途徑的蛋白來維持細胞穩(wěn)態(tài)。抑制蛋白酶體功能能夠引起促凋亡蛋白的積累,誘導腫瘤細胞凋亡。然而,近來臨床研究發(fā)現(xiàn),并非所有腫瘤都對蛋白酶體抑制劑敏感。蛋白酶體抑制劑抵抗的腫瘤患者其抗氧化基因的表達水平普遍較高。其中,核因子E2相關因子2（Nrf2,基因名NEF212）介導的抗氧化應激途徑作為抵抗機制在蛋白酶體抑制劑耐藥表型中被發(fā)現(xiàn)。Nrf2能夠調(diào)控蛋白酶體成熟蛋白（POMP）的... 

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順鉑的作用方式[21]

受損蛋白在被泛素修飾后即被蛋白酶體識別。26S蛋白酶體是真核生物中主要的蛋白酶,在胞漿和胞核中都可以對蛋白進行降解。主要由包含蛋白水解核心微粒(CP)的20S和調(diào)節(jié)微粒(RP)的19S組成。20S核心蛋白酶體包含四個以αββα排列的堆疊環(huán),每個環(huán)包含四個亞基。外α亞基充當調(diào)節(jié)蛋白質進入內(nèi)催化位點的門,而內(nèi)β亞基具有蛋白水解胰凝乳蛋白酶樣(β5),胰蛋白酶樣(β2)以及PGPH樣(β1)活性。此外,還包含免疫蛋白酶體20Si,其中包含不同的催化亞基集,分別成為β1i,β2i和β3i。20S以ATP非依賴的方式降解錯誤折疊蛋白或短肽。20S的水解活性位點單獨隔離在圓柱形復合體管腔內(nèi),以避免對胞內(nèi)蛋白的非特異性降解。RP包含6個可以直接連到CPα環(huán)的AAA+型ATP酶亞單位(Rpt1-6)以及13個非ATP酶亞單位(Rpn1-3,5-13以及15)。19S的RP是一個由多個亞單位組成的大型復合體,具有多種酶的活性:ATP酶,泛素及去泛素等。其在ATP存在情況下,與20S的蛋白酶體的一端或兩端結合,將泛素化的蛋白指引到中心活性位點區(qū)域進行降解[26,27]。進入20S CP的泛素蛋白由19S RP嚴格把控,只允許顯示正確Ub標簽的蛋白進入。除了19S RP,11S調(diào)節(jié)者(PA28)也負責對進入20S CP的蛋白進行監(jiān)督,它能替代19S RP形成免疫蛋白酶體。近來研究發(fā)現(xiàn),越來越多蛋白質可直接通過20S蛋白酶體降解,無需被泛素化(如圖1.2)。1.2.2 泛素-蛋白酶體與腫瘤

Nrf2是有效的bZIP轉錄因子,屬于cap‘n’collar(CNC)家族蛋白。在氧化應激條件下,能誘導多種解毒和細胞保護性基因表達。Nrf2具有7個Nrf2-ech同源結構域(Neh1-7),每一個都具有不同的功能(如圖1.3)。Neh1包含CNC-bZIP的DNA結合域,能夠促使Nrf2和小Marf蛋白的ZIP結構域形成異二聚體。Neh2區(qū)域包含兩個高度保守的氨基酸片段,DLG和ETGE。主要作用是介導Nrf2和它的負向調(diào)節(jié)因子Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關蛋白1(Keap1)的結合,以及介導7個賴氨酸殘基的泛素化進而誘導Nrf2被泛素蛋白酶體系統(tǒng)降解。Neh3結構域能與染色體ATP酶或解旋酶DNA結合蛋白家族成員CHD6結合,CHD6可作為轉錄共激活子來促進ARE介導的基因的轉錄。Neh4和Neh5能夠共同介導Nrf2的轉錄活性,它們與Neh3結構域均屬于反式激活結構域。Neh6結構域是一個絲氨酸富集的區(qū)域,包含兩個保守的肽基DSGIS和DSAPGS。糖原合成激酶3β(GSK3β)能夠通過調(diào)控DSGIS磷酸化,進而促進Nrf2被β-轉錄重復包含蛋白(β-Tr CP)介導的泛素蛋白酶體降解,參與Nrf2穩(wěn)定性調(diào)控。Neh7結構域通過兩種蛋白之間的物理聯(lián)系參與了視黃酮受體α對Nrf2轉錄活性的抑制[58]。Nrf2活性的調(diào)控復雜且多面,主要從轉錄水平,轉錄后水平及蛋白穩(wěn)定性加以控制(如圖1.4)。轉錄水平可受多種基因如NF-κB、Kras、Myc、PI3K/AKT及Notch通路的調(diào)控[60-62]。值得注意的是,Nrf2啟動子區(qū)含有ARE序列,能提供正反饋機制來擴大Nrf2效應[63]。microRNA以及Nrf2轉錄體的異常可以通過轉錄后修飾使得Nrf2活性下降[64,65]。此外,Nrf2介導的轉錄調(diào)控受細胞背景、活性刺激,對ARE元件的識別以及與其他激活子或抑制因子的競爭和合作等的影響。


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