本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對實(shí)驗(yàn)性心肌重塑的干預(yù)作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究銀杏葉提取物(GBE)對實(shí)驗(yàn)性心肌重塑的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。方法:1.采用TGF-β1誘導(dǎo)的乳鼠心肌成纖維細(xì)胞(CFb)增殖為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?給予GBE和TGF-β1抑制劑進(jìn)行干預(yù),將實(shí)驗(yàn)分為五組A組:陰性對照組,藥物同容積的細(xì)胞培養(yǎng)液;B組:TGF-β1作用組,TGF-β1(20 ng/m L)干預(yù);C組:ALK5抑制劑(SB431542)作用組,SB431542(6mg/m L)+TGF-β1(20 ng/m L);D組:GBE低劑量組,GBE(2mg/ml)+TGF-β1(2 0ng/m L),;E組:GBE高劑量組,GBE(20mg/ml)+TGF-β1(20 ng/m L)。采用MTT法和HE染色分析GBE對TGF-β1誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞增殖及形態(tài)的影響;采用免疫組織化學(xué)分析各組大鼠心肌TGF-β1、I和III型膠原、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)、以及TIMP1和TIMP2蛋白表達(dá)變化。2.采用Ang II誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞細(xì)胞凋亡為研究對象,給予GBE和ALK5抑制劑進(jìn)行干預(yù),將實(shí)驗(yàn)分為五組:A組:陰性對照組,藥物同容積的細(xì)胞培養(yǎng)液;B組:Ang II作用組,Ang II(10-5 mol/L)干預(yù);C組:ALK5抑制劑作用組,SB431542(6mg/m L)+Ang II(10-5 mol/L);D組:GBE低劑量組,GBE(2mg/ml)+Ang II(10-5 mol/L);E組:GBE高劑量組,GBE(20mg/ml)+Ang II(10-5 mol/L)。采用HE染色和倒置相差顯微鏡觀察Ang II誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞心肌凋亡的形態(tài)學(xué)變化;流式細(xì)胞儀和原位末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL法)檢測各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡情況;采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)檢測心肌凋亡相關(guān)蛋白Bax和Bcl-2在細(xì)胞內(nèi)m RNA及蛋白水平的表達(dá)。3.采用結(jié)扎大鼠左冠狀動脈前降支建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型,術(shù)后將存活鼠分為5組(每組20只):假手術(shù)組(A組)、AMI模型組(B組)、AMI+阿司匹林10 mg/kg組(C組)、AMI+卡托普利20 mg/kg組(D組)、AMI+GBE 100mg/kg組(E組),分別干預(yù)至4周和8周。采用免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分別檢測各組大鼠心�、裥湍z原、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)以及TGF-β1、MMP-2和MMP-9 m RNA轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)變化。結(jié)果:1.與TGF-β1造模組比較,高濃度GBE組和SB431542組I、III型膠原蛋白表達(dá)顯著減少(P0.05);與TGF-β1造模組比較,高濃度GBE組MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)顯著減少(P0.05),SB431542組僅MMP-2蛋白表達(dá)顯著減少(P0.05);與TGF-β1造模組比較,SB431542組TIMP1、TIMP2蛋白表達(dá)均減少(P0.05),高濃度GBE組僅TIMP1蛋白表達(dá)減少(P0.05)。2.與陰性對照組比較,Ang II造模組Bax基因表達(dá)增加,Bcl-2基因表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);B431542組和高濃度GBE組Bax基因表達(dá)下降(P0.05);B431542組和高濃度GBE組Bcl-2基因表達(dá)上升(P0.05);與Ang II造模組比較,SB431542組和高濃度GBE組細(xì)胞凋亡率顯著減少(P0.01),高濃度GBE組細(xì)胞內(nèi)Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高(P0.05),僅高濃度GBE組細(xì)胞內(nèi)Bax蛋白表達(dá)顯著降低(P0.05),低濃度組或高濃度GBE組的Bcl-2/Bax值有顯著增高(P0.05)。3.與AMI模型組比較,4周或8周時(shí)GBE組、阿司匹林及卡普托利處理組的Ⅰ型膠原、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)水平以及TGF-β1、MMP-2和MMP-9 m RNA轉(zhuǎn)錄水平均顯著降低(P0.01);8周時(shí),GBE、阿司匹林及卡普托利組Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)水平較4周均明顯降低(P0.05),GBE組MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)水平與阿司匹林組相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;GBE、阿司匹林及卡普托利處理組TGF-βm RNA 8周時(shí)的表達(dá)均顯著低于4周(P0.01);GBE、阿司匹林及卡普托利處理組MMP-2和MMP-9的m RNA表達(dá)在8周時(shí)與4周時(shí)比較均無明顯差異。結(jié)論:1、GBE顯著抑制TGF-β1誘導(dǎo)心肌成纖維細(xì)胞增殖與分化,其抑制作用與MMPs系統(tǒng)密切相關(guān);2、GBE對Ang II誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡具有顯著的保護(hù)作用,其作用機(jī)制與提高細(xì)胞凋亡抑制基因Bcl-2蛋白及m RNA的表達(dá)和降低促細(xì)胞凋亡基因Bax蛋白及m RNA的表達(dá)、上調(diào)Bcl-2/Bax值相關(guān);3、GBE可降低大鼠急性心肌梗死后心肌重塑與MMPs及TGF-β1密切相關(guān)。GBE對大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌纖維化模型具有抑制作用,其作用機(jī)制與抑制心肌細(xì)胞凋亡、改善成纖維細(xì)胞增殖及分化密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：銀杏葉提取物 轉(zhuǎn)化生長因子-β1 血管緊張素II 心肌纖維化 細(xì)胞凋亡 心室重塑
【學(xué)位授予單位】：貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-13
• 略縮詞表13-15
• 前言15-20
• 第一章 GBE對TGF-β1 誘導(dǎo)的新生大鼠心肌成纖維細(xì)胞纖維化的干預(yù)作用20-47
• 引言20-21
• 材料與方法21-27
• 結(jié)果27-42
• 討論42-46
• 結(jié)論46-47
• 第二章 GBE對Ang II誘導(dǎo)的新生大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響47-70
• 引言47-48
• 材料與方法48-55
• 結(jié)果55-66
• 討論66-69
• 結(jié)論69-70
• 第三章 銀杏葉提取物對AMI大鼠心肌組織心肌重塑相關(guān)因子的影響70-84
• 引言70
• 材料與方法70-74
• 結(jié)果74-82
• 討論82-84
• 結(jié)論84
• 參考文獻(xiàn)84-97
• 綜述97-111
• 參考文獻(xiàn)105-111
• 作者簡歷111-113
• 致謝113-114
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集114

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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  本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對實(shí)驗(yàn)性心肌重塑的干預(yù)作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：294354