研究背景建立人妊娠的第一個(gè)關(guān)鍵步驟是人胚胎植入到子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞,這一過(guò)程稱(chēng)為胚胎著床。人胚胎著床是一個(gè)復(fù)雜的、繁瑣的過(guò)程,在此期間,胚胎首先定位,再粘附到子宮內(nèi)膜層上,接著是胚胎穿透子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞層(EEC)層入侵到子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞(ESC)層。在這一過(guò)程中,胚胎從桑葚胚發(fā)育成囊胚,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分化成對(duì)胚胎具有可接受性的容受性子宮內(nèi)膜,同時(shí),囊胚的發(fā)育與子宮內(nèi)膜的分化具有同步性,胚胎著床才能獲得成功。哺乳動(dòng)物胚胎著床過(guò)程,子宮內(nèi)膜均對(duì)胚胎具有容受性,容受性期間,無(wú)粘附能力的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化成有粘附能力的子宮內(nèi)膜,可以使胚胎粘附到子宮內(nèi)膜上皮層,并穿透子宮內(nèi)膜上皮層到間質(zhì)層。容受性的子宮內(nèi)膜具有以下幾個(gè)特點(diǎn)：1)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞屏障的破壞,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞頂體膜的結(jié)構(gòu)和功能的轉(zhuǎn)變；2)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分泌階段特異性的蛋白質(zhì)和糖蛋白；3)在子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分泌物的調(diào)節(jié)下,子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞發(fā)生蛻膜化改變；4)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重塑。研究表明,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞的分化均受月經(jīng)周期類(lèi)固醇激素水平的調(diào)節(jié),這確保了子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎的容受性在排卵后的第7-11天,這一時(shí)期稱(chēng)為胚胎著床的“窗口期”�？梢�(jiàn)在早期的胚胎著床中,首先是子宮內(nèi)膜細(xì)胞屏障的破壞,之后發(fā)生重塑,但其重塑的機(jī)制尚不明確,細(xì)胞的遷移和分化是否跟重塑相關(guān)也不明確。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial mesenchymal transition, EMT)是指上皮細(xì)胞獲得成纖維細(xì)胞特性,它參與了人體許多的生理病理過(guò)程,包括胚胎發(fā)生、器官分化,組織炎癥,創(chuàng)傷愈合等,EMT的特征是細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲,包括腫瘤細(xì)胞的早期發(fā)生和轉(zhuǎn)移。同時(shí)有研究證實(shí),在植入過(guò)程中子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的EMT引起的細(xì)胞遷移對(duì)容受性的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的重塑起著十分重要的作用。E-鈣粘蛋白和N-鈣粘蛋白是鈣粘蛋白超家族的成員,在正常的上皮細(xì)胞中表達(dá),是一種跨膜粘附分子,能介導(dǎo)同種細(xì)胞的粘附,并與維持細(xì)胞的極性相關(guān)。目前眾多的研究表明,在EMT中,發(fā)生了E-鈣粘蛋白的下調(diào)和N-鈣粘蛋白的上調(diào),這種現(xiàn)象被稱(chēng)為“鈣粘蛋白開(kāi)關(guān)”�！扳}粘蛋白開(kāi)關(guān)”與肌動(dòng)蛋白重排相關(guān),如應(yīng)力纖維的形成和皮層肌動(dòng)蛋白的減弱等細(xì)胞運(yùn)動(dòng)加速度的控制。許多轉(zhuǎn)錄因子抑制E-鈣粘蛋白的表達(dá),如Snail/Slug家族蛋白、E12/E47和Twist以及ZEB家族。除了細(xì)胞粘附分子的參與,還有細(xì)胞骨架蛋白、細(xì)胞基質(zhì)金屬酶等均參與了EMT的發(fā)生和調(diào)控。波形蛋白(Vimentin)是一種細(xì)胞骨架蛋白,是間質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)記物,在上皮細(xì)胞中不表達(dá)。波形蛋白參與維持細(xì)胞與細(xì)胞器形態(tài)、促進(jìn)細(xì)胞粘附及移行及細(xì)胞凋亡相關(guān)。波形蛋白表達(dá)異常增多導(dǎo)致細(xì)胞骨架蛋白發(fā)生變化,使得上皮源性細(xì)胞具有間質(zhì)細(xì)胞行為,更易于侵襲和轉(zhuǎn)移。EMT過(guò)程中,波形蛋白的表達(dá)明顯上升,在腫瘤的轉(zhuǎn)移細(xì)胞中,波形蛋白過(guò)度表達(dá),因此波形蛋白被認(rèn)為是EMT的分子之一。但在胚胎植入過(guò)程中的作用尚不明確。ZEB家族屬于鋅指蛋白類(lèi)的轉(zhuǎn)錄因子,包含ZEB1和ZEB2。ZEB1能與E-鈣粘蛋白編碼基因的啟動(dòng)子上的E2盒的[CACCT(G)]結(jié)合,抑制E-鈣粘蛋白的轉(zhuǎn)錄,誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生EMT,增強(qiáng)細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。目前研究證實(shí)ZEB1在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及其腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到十分重要的作用,并與microRNA-200相互抑制,成一條負(fù)反饋途徑,在腫瘤細(xì)胞中調(diào)控Notch信號(hào)途徑。ZEB1在人子宮肌層和子宮間質(zhì)的表達(dá),在月經(jīng)周期中的分泌期(體內(nèi)雌孕激素水平高)顯著高于增生期(體內(nèi)雌孕激素水平較低)。在胎牛的母胚界面檢測(cè)到ZEB1的高表達(dá),在小鼠的胚胎著床過(guò)程中存在著EMT過(guò)程,同時(shí)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)也初步證實(shí)了在胚胎著床過(guò)程,胚胎粘附到子宮內(nèi)膜細(xì)胞時(shí)發(fā)生了上皮間質(zhì)化過(guò)程,同時(shí)伴隨了粘附因子E-鈣粘蛋白的降低,以及上皮細(xì)胞標(biāo)志物波形蛋白的上升和間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物角蛋白的降低,并且胚胎著床中的間質(zhì)化過(guò)程受到雌孕激素水平的調(diào)控。ZEB1和E-鈣粘蛋白的E-BOX元件結(jié)合,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生了上皮間質(zhì)化過(guò)程而引起腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。目前在生殖和胚胎發(fā)育過(guò)程的研究中,上皮間質(zhì)化過(guò)程逐漸受到重視,但國(guó)內(nèi)外的研究均較少,對(duì)其機(jī)制尚不明確。胚胎植入過(guò)程與腫瘤侵襲過(guò)程很大程度上具有相似性,而且兩者都存在上皮向間質(zhì)轉(zhuǎn)化,而轉(zhuǎn)錄因子ZEB1在EMT中起著重要作用。研究表明ZEB1在人子宮肌層和子宮間質(zhì)均有表達(dá),且在分泌期的表達(dá)顯著高于增生期,這一時(shí)期是胚胎植入的窗口期,因此我們推測(cè)ZEB1可能參與了胚胎植入過(guò)程的上皮間質(zhì)化過(guò)程,對(duì)胚胎植入過(guò)程起著重要的作用。在去勢(shì)后的δEF1/ZEB1 LacZ雜合子小鼠研究中發(fā)現(xiàn),ZEB1在ER受體定位的子宮肌層和間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)且受雌孕激素的調(diào)節(jié)。根據(jù)以上胚胎植入過(guò)程的相關(guān)因子如E-鈣粘蛋白、雌孕激素和ZEB1的密切關(guān)系,我們推斷ZEB1參與了胚胎植入過(guò)程,其機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)E-鈣粘蛋白促進(jìn)了著床期子宮內(nèi)膜細(xì)胞的EMT過(guò)程,并且該過(guò)程可能受雌孕激素的調(diào)控。目前大量的研究證實(shí)了ZEB1在腫瘤發(fā)生以及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用。而ZEB1在胚胎發(fā)育過(guò)程中作為中胚層和神經(jīng)嵴細(xì)胞遷移能力標(biāo)志以及在EMT中的關(guān)鍵作用已被證實(shí)。腫瘤的侵襲性和胚胎植入過(guò)程有很大的相似性。以往的研究結(jié)果初步說(shuō)明ZEB1在胚胎植入過(guò)程中可能起了重要的作用,但目前在胚胎著床中的功能研究和機(jī)制探討尚屬于空白。臨床上對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、反復(fù)胚胎移植失敗、不明原因不孕癥的誘因,有學(xué)說(shuō)認(rèn)為是胚胎著床過(guò)程失敗,導(dǎo)致妊娠失敗。因此,對(duì)胚胎著床失敗的原因及其發(fā)生的機(jī)制仍亟待研究。研究目的本研究利用RNA干擾技術(shù)構(gòu)建ZEB1的shRNA慢病毒載體,同時(shí)建立人體外胚胎植入體外模型和妊娠小鼠模型,旨在研究ZEB1在胚胎植入過(guò)程中的作用,并對(duì)其促進(jìn)胚胎著床的EMT的機(jī)制進(jìn)行初步研究,為輔助生殖及不孕不育的治療提供新的理論依據(jù)。研究材料和方法1.利用qRT-PCR技術(shù)、免疫組織化學(xué)、Western Blot技術(shù)研究鋅指轉(zhuǎn)錄因子ZEB1在正常人月經(jīng)周期子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律。2.采用RNA干擾技術(shù)構(gòu)建ZEB1的shRNA慢病毒載體,將其轉(zhuǎn)染至人子宮內(nèi)膜癌RL95-2細(xì)胞得到穩(wěn)定的細(xì)胞株,QRT-PCR技術(shù)和Western Blot技術(shù)鑒定轉(zhuǎn)染的效果。并用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、EDU增殖實(shí)驗(yàn)和DNA復(fù)制實(shí)驗(yàn)對(duì)其功能進(jìn)行研究。同時(shí)利用人子宮內(nèi)膜癌RL95-2細(xì)胞與人絨毛膜癌JAR細(xì)胞建立人體外胚胎著床模型,研究ZEB1在人胚胎植入中的功能,并探討在人胚胎植入過(guò)程中,ZEB1是否通過(guò)下調(diào)E-Cadherin和上調(diào)Vimentin,介導(dǎo)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞發(fā)生EMT,促進(jìn)胚胎植入。3.建立妊娠小鼠模型,檢測(cè)ZEB1、E-Cadherin和Vimentin在小鼠胚胎圍著床期的子宮內(nèi)膜的表達(dá)規(guī)律,研究ZEB1在小鼠胚胎圍著床期子宮內(nèi)膜引起的EMT過(guò)程。4.同時(shí)將RNA干擾后的小鼠ZEB1-shRNA稀釋液注入著床前小鼠宮腔,觀察小鼠的妊娠結(jié)局,初步探討ZEB1在小鼠胚胎著床過(guò)程的作用。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料中,兩個(gè)樣本之間比較采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,行t檢驗(yàn)；多個(gè)樣本之間比較采用方差分析,滿足方差齊性的采用單因素的LSD檢驗(yàn),不滿足方差齊性的用Welch檢驗(yàn),用F值表示,P0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.利用qRT-PCR技術(shù)及Western blot檢測(cè)ZEB1mRNA和ZEB1蛋白的表達(dá),結(jié)果發(fā)現(xiàn)ZEB1在人子宮內(nèi)膜的增生早(mRNA:0.018±0.006; Protein: 1.000±0.100)、中(mRNA:0.175±0.006; Protein:0.987±0.076)、晚(mRNA:0.019±0.004; Protein:1.170±0.176)期、分泌早(mRNA: 0.022±0.007; Protein:1.357±0.832)、中(mRNA:0.043±0.015; Protein: 1.853±0.150)、晚期(mRNA:0.026±0.007; Protein:1.330±0.128)均有表達(dá),以分泌中期的最為顯著,和增生期以及分泌早期、晚期(mRNA: F=12.99, P=0.000; Protein:F=19.988, P=0.000)的比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.成功構(gòu)建ZEB1-shRNA慢病毒載體,轉(zhuǎn)染RL95-2細(xì)胞,得到穩(wěn)定的ZEB1-shRNA-RL95-2細(xì)胞株,并對(duì)其功能進(jìn)行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),該細(xì)胞和陰性對(duì)照細(xì)胞的ZEB1 (0.326±0.053 vs 1.001±0.138, t=-12.525, P=0.000)和Vimentin (0.498±0.117 vs 1.000±0.230, t=-4.403, P=0.000)的表達(dá)顯著下調(diào),E-Cadherin (3.260±0.342 vs 1.001±0.138, t=13.869, P=0.000)的表達(dá)顯著上調(diào)。同時(shí),72h開(kāi)始,細(xì)胞的增殖能力(0.72±0.07 vs 0.94±0.09,F=4.329,P=0.003)、遷移力、DNA復(fù)制能力(43.26±5.11 vs 62.73±7.29,F=3.788,P=0.019)以及對(duì)JAR球體的粘附能力(0.398±0.065 vs 0.833±0.053,t=16.425,P=0.000)與陰性對(duì)照細(xì)胞相比也顯著下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.運(yùn)用qRT-PCR和Western blot分別對(duì)未孕小鼠和孕2.5-6.5天小鼠子宮內(nèi)膜ZEB1的mRNA和蛋白表達(dá)進(jìn)行定量研究,結(jié)果顯示妊娠小鼠子宮內(nèi)膜ZEB1mRNA (mRNA:D2.5:0.028±0.007, D3.5:0.031±0.007, D4.5: 0.042±0.006, D5.5:0.031±0.008, D6.5:0.025±0.007)和蛋白(Protein: D2.5:0.032±0.005, D3.5:0.035±0.011, D4.5:0.041±0.002, D5.5: 0.029±0.012, D6.5:0.028±0.005)的表達(dá)高于非妊娠(mRNA:0.018±0.009,Protein:0.027±0.005)小鼠子宮內(nèi)膜,且ZEB1 mRNA和蛋白的表達(dá)隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(shì),在小鼠著床窗第4.5天達(dá)到最高,與其他妊娠組之間行兩兩比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mRNA:F=11.165, P=0.000;蛋白：F=14.66, P=0.000)。ZEB1 mRNA和蛋白的表達(dá)從第5.5天開(kāi)始下降。免疫組化染色結(jié)果顯示：ZEB1蛋白在未孕和妊娠小鼠子宮內(nèi)膜組織都有表達(dá)。陽(yáng)性著色部位主要在細(xì)胞核,特別是上皮細(xì)胞(包括腔上皮和腺上皮細(xì)胞)胞核,妊娠小鼠基質(zhì)細(xì)胞胞核也有較豐富的表達(dá)。ZEB1蛋白在小鼠子宮內(nèi)膜腔上皮和腺上皮細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸增強(qiáng)的趨勢(shì),第4.5天最為明顯,直到第5.5天開(kāi)始降低；而基質(zhì)細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)在妊娠2.5天幾乎未見(jiàn),而在第3.5天逐漸增加,6.5天開(kāi)始降低(圖17)4.對(duì)小鼠子宮內(nèi)膜E-Cadherin的mRNA和蛋白表達(dá)進(jìn)行研究,結(jié)果顯示非妊娠小鼠子宮內(nèi)膜E-Cadherin的mRNA (CtrlD0:1.87±0.66)和蛋白(CtrlD0:1.000±0.251)表達(dá)高于妊娠早期小鼠子宮內(nèi)膜E-Cadherin (mRNA:D2.5:1.10±0.389, D3.5:0.75±0.15, D4.5:0.30±0.13, D5.5: 0.39±0.11, D6.5:0.80±0.22) (Protein:D2.5:0.633±0.119, D3.5: 0.553±0.058, D4.5:0.213±0.029, D5.5:0.517±0.086, D6.5:0.520±0.026)的表達(dá),且隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì),在小鼠著床窗口期第4.5天的表達(dá)降到最低,與妊娠各組之間E-Cadherin的mRNA和蛋白的表達(dá)兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mRNA:F=26.379, P=0.000:蛋白：F=32.188, P=0.001)。E-Cadherin的表達(dá)從第6.5天開(kāi)始上升。E-Cadherin在內(nèi)膜上皮細(xì)胞的陽(yáng)性著色部位主要在細(xì)胞漿,尤其妊娠上皮細(xì)胞(包括腔上皮和腺上皮細(xì)胞)胞漿,小鼠基質(zhì)細(xì)胞的胞漿幾乎未見(jiàn)染色,且隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸減弱的趨勢(shì),在第4.5天最為明顯。5.對(duì)小鼠宮內(nèi)膜Vimentin的mRNA和蛋白表達(dá)進(jìn)行研究,結(jié)果顯示非妊娠小鼠子宮內(nèi)膜Vimentin的mRNA (CtrlD0:0.59±0.21)和蛋白(CtrlD0: 0.99±0.40)表達(dá)低于妊娠早期小鼠子宮內(nèi)膜(mRNA:D2.5:1.19±0.15, D3.5:1.59±0.40, D4.5:2.92±0.99, D5.5:2.13±0.51, D6.5:1.82±0.59)(Protein:D2.5:1.23±0.24, D3.5:1.64±0.26, D4.5:2.37±0.20, D5.5: 1.67±0.11, D6.5:1.52±0.31) Vimentin的表達(dá),且隨著妊娠天數(shù)的增加呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(shì),在小鼠著床窗口期第4.5天達(dá)高峰,且與妊娠各組之間Vimentin的mRNA和蛋白的表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(mRNA:F=23.914,P=0.000；蛋白：F=9.191,P=0.001),Vimentin的表達(dá)第5.5天的表達(dá)開(kāi)始顯著下降。6.在小鼠胚胎著床前的1天,經(jīng)小鼠的宮角注射ZEB1-shRNA稀釋液或ZEB1-shCtrl陰性對(duì)照,繼續(xù)飼養(yǎng)至妊娠第8天,脫頸椎法處死小鼠,觀察ZEB1-shRNA對(duì)小鼠胚胎著床的數(shù)量的影響。結(jié)果顯示：發(fā)現(xiàn)ZEB1-shRNA組小鼠的胚胎著床的數(shù)量明顯少于生理鹽水側(cè)子宮,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(1.875±0.835 vs 7.375±1.408, t=9.505, P=0.000); ZEB1-shCtrl組小鼠的胚胎著床的數(shù)量與生理鹽水側(cè)子宮無(wú)差別,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(6.375±1.119 vs7.500±1.119,t=1.888,P=0.080)。結(jié)論1.ZEB1在月經(jīng)周期的子宮內(nèi)膜有表達(dá),而且分泌中期的表達(dá)顯著增高,分泌中期是胚胎植入的窗口期,ZEB1在人胚胎著床窗口期的高表達(dá),提示ZEB1可能參與了子宮內(nèi)膜容受性的調(diào)節(jié),對(duì)人早期胚胎著床起了重要的作用。2.ZEB1基因的敲除明顯抑制子宮內(nèi)膜RL95-2細(xì)胞的增殖和遷移,對(duì)模型胚胎JAR球體的粘附率顯著下降,同時(shí)E-鈣粘蛋白表達(dá)增加,波形蛋白表達(dá)減少,提示ZEB1在人胚胎植入過(guò)程中,可能是通過(guò)下調(diào)E-Cadherin和上調(diào)Vimentin,促進(jìn)了胚胎植入過(guò)程中的EMT過(guò)程,引起了子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化,增加細(xì)胞的遷移能力。上皮細(xì)胞的遷移使上皮細(xì)胞屏障被破壞,改變了子宮內(nèi)膜容受性,促進(jìn)胚胎的粘附和植入。3.EMT的標(biāo)記因子ZEB1和Vimentin在著床窗口期小鼠子宮內(nèi)膜的高表達(dá)、E-Cadherin的低表達(dá)均提示了小鼠胚胎植入過(guò)程中也發(fā)生了EMT過(guò)程。ZEB1可能也是通過(guò)下調(diào)E-Cadherin,觸發(fā)鈣粘蛋白開(kāi)關(guān),上調(diào)波形蛋白,抑制粘附分子的表達(dá),誘發(fā)了EMT的發(fā)生,引起細(xì)胞骨架的改變和應(yīng)力纖維的改變,促進(jìn)子宮內(nèi)膜上皮容受性的改變,使著床部位的上皮屏障發(fā)生破壞和重塑,促進(jìn)了胚胎植入的發(fā)生和子宮內(nèi)膜的蛻膜化改變。4.在著床前期的小鼠的宮角注入小鼠ZEB1-反義寡核苷酸的稀釋液,顯著降低了胚胎著床率,再一次證明了ZEB1在著床起著重要的調(diào)節(jié)作用,可能是促進(jìn)了子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的EMT過(guò)程,促進(jìn)了子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的分化和重塑。
【學(xué)位單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類(lèi)】：R321
【部分圖文】：

通常使用溶解曲線的負(fù)一次微分曲線進(jìn)行溶解曲線分析的較多。逡逑Ｗ邋ＧＡＰＤＨ作內(nèi)參，通過(guò)Ｒｅａｌ邋Ｔｉｍｅ邋ＰＣＲ檢測(cè)差異蛋白ＺＥＢ１基因Ｒｅａｌ逡逑ＴｉｍｅＰＣ民擴(kuò)增后的溶解曲線（圖１）。由圖可見(jiàn)目的基因的溶解曲線只出現(xiàn)一逡逑個(gè)峰，說(shuō)明沒(méi)有引物二聚體等非特異性擴(kuò)增的產(chǎn)生，擴(kuò)增過(guò)程較為理想，引物逡逑設(shè)升較為合理，可進(jìn)行后續(xù)的相對(duì)定量分析處理。逡逑２７逡逑

泌期ＺＥＢ１的表達(dá)較增殖期強(qiáng)，Ｗ分泌中期（０．０４３邋＋邋０．０１５）的最為顯著，和增逡逑生期Ｗ及分泌早期（０．０２２邋＋邋０．００７）、晚期（０．０２６邋＋化００７）的比較，差異有統(tǒng)逡逑計(jì)學(xué)意義（Ｆ＝１２．９９，Ｐ＝０．０００）（圖２，表１）。分泌中期是胚胎桂入的窗口逡逑期，沈Ｂ１在此時(shí)的子宮內(nèi)膜的表達(dá)增強(qiáng)，可能與子宮內(nèi)膜的容受性相關(guān)。逡逑３－逡逑0邋＊＊＊逡逑也0逡逑２－逡逑ＵＪ邋0逡逑含巧邐戶Ｉ邐？逡逑Ｋ邋２邋１－邐－Ｔ－逡逑ｉ邋Ｊ胃ＩＪＵＩ」＂？■，逡逑炒合、於＞／邋＜／於ｓ／逡逑Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ邐Ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ逡逑圖２邐ＺＥＢｌ邋ｍＲＮＡ在月經(jīng)周期的增生期和分泌期予宮內(nèi)膜表達(dá)的表達(dá)逡逑Ｆｉｇ．邋２邐Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｚ巨ＢＩ邋ｍＲＮＡ邋ｉｎ邋ｈｕｍａ打邋ｅｎｄｏｍｅｔｒ

３．２NＲＬＷ－２細(xì)胞和正子胞形ＲＬ９５－２細(xì)胞成上皮細(xì)胞形態(tài)，多邊形，無(wú)細(xì)胞極性，缺乏頂膜結(jié)構(gòu)。正常逡逑子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的形態(tài)呈多邊形，排列緊密，有頂膜結(jié)構(gòu)，有細(xì)胞極性（圖逡逑４）。逡逑

本文編號(hào)：2825963