【摘要】：干眼是眼科門診相當(dāng)常見的疾病之一,其臨床表現(xiàn)主要是眼部干燥、異物感、畏光及眼皮沉重緊繃等不適,嚴(yán)重者可引起視功能下降,從而影響工作和生活。祖國醫(yī)學(xué)認為“肝開竅于目”,“肝在液為淚”,肝所受藏的精微物質(zhì)輸送于目,使目受滋養(yǎng),從而維持正常的視覺功能。逍生散是導(dǎo)師謝立科主任醫(yī)師臨床經(jīng)驗的總結(jié),臨床常用于治療干眼患者證屬肝郁陰虛證者。使用疏肝養(yǎng)陰法辨證治療干眼,前期應(yīng)用于臨床及動物實驗均顯示一定療效,本研究旨在進一步探討逍生散治療干眼的作用及分子作用機制,為干眼的中醫(yī)治療提供新思路和客觀依據(jù)。目的觀察肝郁陰虛型干眼各證候要素的分布;比較三種不同檢查方法測量干眼淚膜穩(wěn)定性的差異及相關(guān)性;觀察逍生散對肝郁陰虛型干眼治療前后淚膜穩(wěn)定性、臨床癥狀評分、淚液分泌試驗SchimerI及角膜熒光素染色積分的變化;觀察逍生散對干眼角膜上皮細胞損傷模型的干預(yù)作用,進一步探討逍生散治療干眼的作用及分子作用機制。方法1參照干眼診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)選取我院門診干眼患者中證屬肝郁陰虛者100例,將各中醫(yī)證候條目分為無、輕度、中度、重度4級,分別計0、1、2、3分,問診時準(zhǔn)確記錄患者信息,根據(jù)積分法進行統(tǒng)計分析,進行肝郁陰虛型干眼的臨床調(diào)研。2用Sirius、RT-7000及FLS三種方法測量干眼患者的淚膜穩(wěn)定性,分析比較三種方法對淚膜穩(wěn)定性測量的差異及相關(guān)性。3選取我院門診干眼患者中證屬肝郁陰虛者80例,口服中藥逍生散治療連續(xù)4周,治療前和治療后,觀察患者淚膜穩(wěn)定性、臨床癥狀評分、淚液分泌試驗SchimerI及角膜熒光素染色積分的變化。4人角膜上皮細胞加入苯扎氯銨溶液制備得干眼角膜上皮細胞損傷模型,加入低、中、高劑量逍生散含藥血清和空白對照血清孵育后,分別于作用24h、48h、72h時用光鏡觀察角膜上皮細胞形態(tài)學(xué)改變,CCK-8法檢測細胞活性,流式細胞儀檢測細胞凋亡及RT-PCR檢測角膜上皮細胞中IL-1、IL-6、TNF-a、MMP-9細胞因子的表達情況。結(jié)果1本研究所納入患者,平均年齡42.09歲,其中最小18歲,最大60歲;性別方面,男性44人(占44.00%),女性56人(占56.00%);職業(yè)方面,工人14人(占14.00%),退休9人(占9.00%),無業(yè)5人(占5.00%),學(xué)生4人(占4.00%),職員68人(占68.00%);證候要素(除舌脈)所占比例由大到小前三位依次為目珠干燥、刺痛、煩躁易怒。2三種方法測量的淚膜破裂時間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),兩兩比較結(jié)果顯示FLS法測量的淚膜破裂時間與Sirius和RT7000相比相對較長,而Sirius和RT7000的淚膜破裂時間測量相對較短且他們之間沒有差異。Pearson相關(guān)分析結(jié)果表明,FLS和Sirius的相關(guān)系數(shù)為0.39,FLS和RT7000的相關(guān)系數(shù)為0.41,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3服用逍生散后三種測量方法的結(jié)果均顯示淚膜破裂時間變長,且時間增加具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.0001),相關(guān)性分析結(jié)果顯示,同一種方法在服用中藥前后的測量結(jié)果一致性較高,Sirius法服藥前后的相關(guān)系數(shù)達到0.81(P0.0001),RT7000的相關(guān)系數(shù)為0.83(P0.0001),FLS的測量結(jié)果前后一致性稍差,相關(guān)系數(shù)為0.68(P0.0001);用藥后臨床癥狀評分降低,淚液分泌量增加,角膜熒光素染色積分降低,均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.0001)。4苯扎氯胺濃度為1ug/ml時,對角膜上皮細胞毒性較低,可見細胞隨時間延長緩慢變大,包漿內(nèi)空泡逐漸增加,細胞活性相對降低,其作用比較緩和,故選用1ug/ml的BAC濃度作為造模濃度。空白血清濃度不高于10%時,對角膜上皮細胞活性沒有影響,故選用10%的空白血清作為對照,2.5%、5%、10%的逍生散含藥血清作為中藥低、中、高劑量組進行實驗。中藥中、高劑量組干預(yù)角膜上皮細胞損傷模型,能明顯抑制細胞體積增大、細胞松解及間隙變大,減少細胞脫壁及溶解、壞死;減少細胞凋亡;CCK-8法檢測細胞活性顯示,中藥中、高劑量的細胞活性值和其他組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);R-TPCR檢測IL-1、IL-6、TNF-a及MMP-9的表達,結(jié)果顯示,中藥中、高劑量組的結(jié)果相對較低,且呈現(xiàn)隨藥物濃度增加,抑制效果相對越好的結(jié)果,24h、48h和72h時點均出現(xiàn)中藥中、高劑量組抑制炎癥因子的作用更為明顯(P0.05)。結(jié)論1肝郁陰虛型干眼患者以女性居多,好發(fā)于40歲左右,常見從事職業(yè)為職員、工人、退休人員,主要證候有目珠干燥、刺痛、煩躁易怒。2三種不同檢查方法測量干眼患者的淚膜破裂時間有不同,FLS法測量的時間相對較長,Sirius和RT7000測量的時間相對較短,但三種方法測量的淚膜破裂時間在趨勢上有一致性,對干眼的臨床診斷和治療均有一定意義。3逍生散治療肝郁陰虛型干眼患者后三種測量方法均顯示淚膜破裂時間變長,且同一種方法在服用中藥前后的測量結(jié)果一致性較高;用藥后臨床癥狀評分降低,淚液分泌量增加,角膜熒光素染色積分降低,進一步證實了逍生散治療的有效性。4逍生散含藥血清中、高劑量組能明顯升高細胞活性;減少細胞凋亡;逍生散可能通過降低IL-1的產(chǎn)生,進而降低產(chǎn)生IL-6、TNF-a等炎癥因子以及可能通過降低IL-1的產(chǎn)生,調(diào)控MMP-9的數(shù)量和活性,發(fā)揮保護角膜上皮細胞的作用。
【圖文】：

方差分析結(jié)果表明，三組之間的淚膜破裂時間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜0．0５），兩逡逑兩比較結(jié)果顯示ＦＬＳ法測量的淚膜破裂時間與Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００相比相對較長，而逡逑Ｓｉｒｉｕｓ和ＲＴ７０００的淚膜破裂時間測量相對較短且他們之間沒有差異，見表３、圖２。逡逑表３三種方法測量淚膜穩(wěn)定性比較邐逡逑方法邐Ｎ邐Ｍｅａｎ邐ＳＤ邐Ｍｅｄｉａｎ邐Ｑ１邐Ｑ３邐Ｍｉｎ邐Ｍａｘ邐Ｆ邋Ｐ逡逑３３．０７邐＜．０００１逡逑Ｓｉｒｉｕｓ邐１００邐２．３７邐１．１２邐２．０６邐１．５４邐２．８８邐０．７６邐５．００邐Ｂ逡逑ＲＴ７０００邐１００邐２．２３邐１．８６邐１．６０邐０．５０邐４．４０邐０．１０邐５．００邐Ｂ逡逑ＦＬＳ邐１００邐３．６８邐１．０５邐４．０９邐３．００邐４．３６邐１．３０邐５．００邐Ａ逡逑５１邋ｊ邐＿Ｔ邐Ｔ逡逑４逡逑Ｓ邐ｗ邋＇丨．．．．．二．ｔ邐％＇ｉｊ；邐一￣Ｔ一＂？逡逑ｓ逡逑孩逡逑１邐0邐ｏ逡逑熙２邐邐—逡逑１逡逑ｉ逡逑：邋±逡逑０邋邐邐ｊ逡逑ＳｉｒｉｕＳ＿0邐ＲＴ７０００＿０邐ＦＬＳ＿０逡逑圖２三種測量方法淚膜破裂時間差值分布逡逑

３．１用藥前后淚膜穩(wěn)定性比較逡逑結(jié)果表明，，用藥后三種測量方法均顯示淚膜破裂時間變長，且時間X椉泳哂型沖義霞蒲б庖澹ǎ穡跡埃埃埃埃保恚�、６、７及哇E場ｅ義媳恚滌靡┣昂螅櫻椋潁椋酰蟛飭坷崮の榷ㄐ員冉襄義現(xiàn)副赍畏擲噱斡靡┣板斡靡┖簀甕臣屏浚ǎ兄擔(dān)╁義希櫻椋潁椋酰簀危五澹ǎ停椋螅螅椋睿紓╁危福埃ǎ埃╁危福埃ǎ埃╁危玻保保埃ㄅ潿藻澹簦校跡埃埃埃埃保╁義希停澹幔睿ǎ櫻模╁危玻保常ǎ埃梗埃╁危矗埃擔(dān)ǎ保常埃╁義希停澹幔鑠澹梗擔(dān)ィ茫懾危ǎ保梗�，２．３３）逦（３．ＡP叮矗常矗╁義希停澹洌椋幔鑠澹ǎ眩常眩保╁危保梗擔(dān)ǎ保保福╁危矗埃埃ǎ保叮玻╁義希眩�，Ｑ_危ǎ保矗罰玻叮矗╁危ǎ常保�，４．８０）辶x希ǎ停椋�，邋Ｍａｘ）逦（０．ＡP�，４．�(dān)玻╁危ǎ保玻矗罰埃埃╁義媳恚隊靡┣昂螅遙裕罰埃埃安飭坷崮の榷ㄐ員冉襄義現(xiàn)副赍畏擲噱斡靡┣板斡靡┖簀甕臣屏浚ǎ兄擔(dān)╁義希遙裕罰埃埃板危危ǎ停椋螅螅椋睿紓╁危福埃ǎ埃╁危福埃ǎ埃╁危保罰福埃ㄅ潿裕�，Ｐ�

本文編號：2523722