本文選題：肥胖 + 胰島素抵抗�。� 參考：《吉林大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：脂肪組織區(qū)域免疫異常引起的慢性炎癥是肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗的關(guān)鍵因素,巨噬細(xì)胞募集及極化是脂肪組織區(qū)域免疫異常的中心環(huán)節(jié),而核轉(zhuǎn)錄因子PPARγ是巨噬細(xì)胞活化的關(guān)鍵調(diào)控分子。有研究表明與脂肪細(xì)胞分化相關(guān)的mi R-27a在肥胖人群的血液中表達(dá)水平明顯增加,并且mi R-27a直接的下游作用靶點為PPARγ,因此我們推測,mi R-27a作為巨噬細(xì)胞活化的分子開關(guān),通過調(diào)控PPARγ調(diào)節(jié)肥胖誘導(dǎo)的胰島素抵抗。本研究通過肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗模型小鼠、mi R-27a抑制干預(yù)的肥胖小鼠、mi R-27a慢病毒過表達(dá)小鼠以及肥大脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)模型,探討mi R-27a調(diào)控巨噬細(xì)胞募集及極化的分子機(jī)制,闡明mi R-27a參與脂肪組織區(qū)域性免疫的細(xì)胞及分子網(wǎng)絡(luò)調(diào)控,揭示mi R-27a在肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗中的關(guān)鍵作用,為肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗提供新的干預(yù)靶點。本論文研究內(nèi)容包括三個部分。第一部分探討脂肪組織巨噬細(xì)胞活性變化在肥胖胰島素抵抗中的作用。首先建立肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗小鼠模型,結(jié)果顯示喂養(yǎng)4w、8w和12w后,肥胖程度、空腹血糖、空腹胰島素、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白的水平均呈持續(xù)增長狀態(tài),高密度脂蛋白水平下降,并且葡萄糖耐受能力持續(xù)下降,胰島素抵抗情況越來越明顯;這一過程亦可促進(jìn)血清中以及內(nèi)臟脂肪組織中趨化因子MCP1和巨噬細(xì)胞M1型炎性因子TNFα的分泌;組織形態(tài)學(xué)亦可見內(nèi)臟脂肪區(qū)域的脂肪細(xì)胞形態(tài)變化明顯,細(xì)胞體積逐漸增大,并且伴隨著大量巨噬細(xì)胞在脂肪組織中的募集和浸潤,同時出現(xiàn)大量M1型巨噬細(xì)胞,巨噬細(xì)胞極化現(xiàn)象明顯。結(jié)果說明巨噬細(xì)胞活化與肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗相關(guān)。第二部分研究mi R-27a在肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗中的關(guān)鍵作用及其與巨噬細(xì)胞活化的關(guān)系。結(jié)果顯示,在小鼠持續(xù)給予高脂飲食建立肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗的模型中,隨著肥胖時間延長,血清中的mi R-27a分泌量從4周到12周持續(xù)升高,空腹血糖、空腹胰島素、甘油三酯和總膽固醇等生化指標(biāo)水平升高,胰島素抵抗程度加重,提示mi R-27a可能參與胰島素抵抗。為了證明此觀點,進(jìn)一步建立mi R-27a過表達(dá)和mi R-27a抑制小鼠模型,結(jié)果證明mi R-27a水平對于體重、飲食熱量、體脂含量以及空腹血糖、空腹胰島素、甘油三酯和總膽固醇的水平都有影響,mi R-27a過表達(dá)組的空腹血糖、空腹胰島素等生化指標(biāo)水平均升高,葡萄糖耐量和胰島素耐量下降,導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生,胰島素的敏感性降低;mi R-27a過表達(dá)促進(jìn)血清中和內(nèi)臟脂肪組織中炎性因子(MCP1、TNFα)的分泌和釋放,同時mi R-27a過表達(dá)組的脂肪組織出現(xiàn)大量M1型巨噬細(xì)胞。但mi R-27a抑制組的空腹血糖、空腹胰島素等生化指標(biāo)的水平均降低,改善糖耐量,增加胰島素敏感性,緩解胰島素抵抗;mi R-27a抑制可減少炎性因子的分泌和釋放,也能明顯緩解持續(xù)高脂飲食喂養(yǎng)引起的內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞極化現(xiàn)象及局部炎癥反應(yīng)。說明mi R-27a在肥胖誘發(fā)胰島素抵抗中起關(guān)鍵作用,其作用機(jī)制與巨噬細(xì)胞活化導(dǎo)致的慢性低度炎癥有關(guān)。第三部分探討mi R-27a對巨噬細(xì)胞活化調(diào)控作用的分子機(jī)制。在肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗小鼠脂肪組織相關(guān)蛋白水平的分析顯示,胰島素代謝信號通路中的Akt在胰島素刺激下未被激活,出現(xiàn)胰島素抵抗。內(nèi)臟脂肪區(qū)域PPARγ的蛋白水平下降,巨噬細(xì)胞活化相關(guān)蛋白TLR4以及p-NF-κB的蛋白水平均升高,IκBα水平下降,巨噬細(xì)胞活化通路被激活;另有下游炎性反應(yīng)通路TNFR1和p-JNK的蛋白水平顯著升高,刺激炎性因子的釋放和分泌。細(xì)胞實驗結(jié)果顯示,mi R-27a overexpression質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Raw264.7細(xì)胞后,PPARγ的蛋白水平下降,細(xì)胞上清液中MCP1和TNFα的水平明顯增加,M2型抑炎細(xì)胞因子ARG1水平降低,但給予PPARγ激活劑羅格列酮后,細(xì)胞上清液中MCP1和TNFα的水平明顯下降,ARG1水平明顯增加;其次mi R-27a過表達(dá)后巨噬細(xì)胞遷移數(shù)量明顯增多,同時給予羅格列酮后遷移細(xì)胞減少;另外,棕櫚酸刺激使脂肪細(xì)胞肥大后,mi R-27a水平升高,促進(jìn)巨噬細(xì)胞遷移,但刺激肥大的脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-27a inhibitor后,巨噬細(xì)胞遷移數(shù)量明顯下降,在無脂肪細(xì)胞組給予棕櫚酸刺激,巨噬細(xì)胞沒有遷移。說明mi R-27a通過抑制PPARγ引起巨噬細(xì)胞的募集及極化,促進(jìn)巨噬細(xì)胞活化。因此,本課題首次闡明mi R-27a在肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗中起到關(guān)鍵作用,主要作用機(jī)制可能是肥胖過程中高表達(dá)的mi R-27a能夠抑制其靶基因PPARγ的表達(dá),進(jìn)而激活NF-κB,促進(jìn)炎性因子的合成及分泌,促進(jìn)巨噬細(xì)胞的募集和極化,誘導(dǎo)肥胖胰島素抵抗的發(fā)生,為肥胖誘導(dǎo)胰島素抵抗提供新的干預(yù)靶點,亦為糖尿病預(yù)防和治療提供實驗依據(jù)和理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:Chronic inflammation caused by regional immune abnormality in adipose tissue is the key factor for obesity induced insulin resistance. Macrophage recruitment and polarization are central links in the regional immune abnormality of adipose tissue, and nuclear factor PPAR gamma is the key regulator of macrophage activation. Research shows that MI R-27a related to adipocyte differentiation is in fertilizer. The level of blood expression in the fat population increased significantly and the direct downstream target of MI R-27a was PPAR gamma. Therefore, we speculate that MI R-27a acts as a molecular switch activated by macrophages and regulates obesity induced insulin resistance by regulating PPAR gamma. This study inhibited the insulin resistance model mice by obesity and the MI R-27a inhibition intervention. Obese mice, MI R-27a lentivirus overexpressed mice and hypertrophic adipocyte and macrophage co culture model, explore the molecular mechanism of MI R-27a regulating macrophage recruitment and polarization, elucidate the cell and molecular network regulation of MI R-27a involved in regional immunization of adipose tissue, and reveal the key to MI R-27a in insulin resistance induced by obesity. The purpose of this study is to provide new targets for the intervention of obesity induced insulin resistance. This paper includes three parts. The first part discusses the role of the changes in the activity of macrophage in adipose tissue in the obesity insulin resistance. First, we establish a model of obesity induced insulin resistance in mice. The results showed that after feeding 4W, 8W and 12W, the degree of obesity and empty stomach was empty. The levels of blood glucose, fasting insulin, triglyceride, total cholesterol, low density lipoprotein were continuously growing, the level of high density lipoprotein decreased, and the glucose tolerance continued to decline, and insulin resistance became more and more obvious; this process also promoted the chemokine MCP1 in the serum and in the visceral adipose tissue. The secretion of M1 type inflammatory factor TNF alpha, and the morphological changes of adipocytes in the visceral adipose area are also obvious, the volume of the cells gradually increases, and the recruitment and infiltration of a large number of macrophages in the adipose tissue are accompanied by a large number of M1 macrophages, and the polarization of macrophage cells is obvious. Activation is associated with insulin resistance induced by obesity. Second the key role of MI R-27a in obesity induced insulin resistance and the relationship with macrophage activation are studied. The results show that the MI R-27a secretion in serum is prolonged with the prolonged obesity induced insulin resistance in mice. From 4 to 12 weeks, the level of fasting blood glucose, fasting insulin, triglyceride, total cholesterol and other biochemical indexes increased, and the degree of insulin resistance was aggravated, suggesting that MI R-27a may be involved in insulin resistance. In order to prove this point of view, further establishment of MI R-27a overexpression and MI R-27a inhibition mice model, the results prove that MI R-27a level is the same. The levels of body weight, diet calorie, body fat content and fasting blood glucose, fasting insulin, triglyceride and total cholesterol were all affected. The levels of fasting blood glucose, fasting insulin and other biochemical indexes in the MI R-27a overexpressed group were all elevated, glucose tolerance and insulin tolerance decreased, resulting in insulin resistance and insulin sensitivity. The overexpression of MI R-27a promotes the secretion and release of inflammatory factors (MCP1, TNF a) in serum and visceral adipose tissue, while a large number of M1 type macrophages appear in the adipose tissue of the MI R-27a overexpressed group. However, the fasting blood glucose, fasting insulin and other biochemical indexes of the MI R-27a inhibition group decrease, improving the glucose tolerance and increasing the insulin sensitivity. Alleviating insulin resistance; MI R-27a inhibition can reduce the secretion and release of inflammatory factors and significantly alleviate the polarization and local inflammatory response of visceral adipose tissue induced by continuous high fat diet. It shows that MI R-27a plays a key role in obesity induced insulin resistance, and its mechanism is associated with the activation of macrophages. The third part discusses the molecular mechanism of MI R-27a on the regulation of macrophage activation. In the analysis of adipose tissue related protein levels in insulin resistant mice induced by obesity, the Akt in insulin signaling pathway is not activated by insulin stimulation, and insulin resistance. The visceral fat region PPAR gamma The protein level of the macrophage activation related protein TLR4 and p-NF- kappa B increased, the level of I kappa B alpha was decreased, the activation pathway of macrophage was activated, and the protein level of TNFR1 and p-JNK in the downstream inflammatory pathway increased significantly and stimulated the release and secretion of inflammatory factors. The results of cell experiments showed mi R-27a overexpre. After the transfection of ssion plasmid to Raw264.7 cells, the protein level of PPAR gamma decreased, the level of MCP1 and TNF alpha in the cell supernatant increased obviously, and the level of M2 anti inflammatory cytokine ARG1 decreased, but the level of MCP1 and TNF a in the cell supernatant decreased obviously, and the ARG1 level increased obviously after the PPAR gamma activator rosiglitazone was given, followed by the giant MI. The number of macrophage migration increased significantly and the migratory cells were reduced after rosiglitazone. In addition, when palmitic acid stimulated the fat cells to hypertrophy, the level of MI R-27a increased and promoted the migration of macrophages. However, after the transfection of hypertrophic adipocytes to MI R-27a inhibitor, the number of macrophage cell migration decreased significantly and was given to brown in the adipocyte group. It is the first time that MI R-27a plays a key role in obesity induced insulin resistance, the main mechanism of which is that MI R-27a plays a key role in obesity induced insulin resistance. The main mechanism may be that the high expression of MI R-27a in the process of obesity can inhibit it in the process of obesity. The expression of target gene PPAR gamma, then activation of NF- kappa B, promotes the synthesis and secretion of inflammatory factors, promotes the recruitment and polarization of macrophages, induces the occurrence of obese insulin resistance, provides new intervention targets for obesity induced insulin resistance, and provides experimental basis and theoretical basis for the prevention and treatment of diabetes.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R58

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張惠,張建,蘇昕,王廷濤,陳厚芹;胰島素抵抗與妊娠高血壓綜合征的關(guān)系[J];華北煤炭醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2000年04期

2 傅誠強(qiáng);胰島素抵抗和擇期性手術(shù)[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2001年03期

3 賈偉平;中國人群胰島素抵抗的狀況[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2002年04期

4 寧光;李長貴;洪潔;湯正義;李果;龔艷春;彭怡文;郭冀珍;沈衛(wèi)峰;商淑華;羅邦堯;陳家倫;;胰島素抵抗基礎(chǔ)和臨床研究[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2002年11期

5 姚小皓,沈凱,李學(xué)軍;胰島素對中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2003年01期

6 柯紅林;;2型糖尿病中胰島素抵抗發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(老年醫(yī)學(xué)分冊);2003年03期

7 常桂娟;胰島素抵抗的環(huán)境因素[J];現(xiàn)代診斷與治療;2004年02期

8 米杰 ,張力;胰島素抵抗[J];中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

9 王繼旺,張素華,任偉,杜娟,陳靜,包柄楠,汪志紅,苗青;吸煙與胰島素抵抗的相關(guān)性調(diào)查與分析[J];中國公共衛(wèi)生;2004年08期

10 陽柳雪;劉紅;;可溶性腫瘤壞死因子受體2與胰島素抵抗[J];中國醫(yī)學(xué)文摘.內(nèi)科學(xué);2004年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陳艷秋;宗敏;華莉;李臻;肖菲;孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪與胰島素抵抗的關(guān)系[A];中國營養(yǎng)學(xué)會老年營養(yǎng)分會第七次全國營養(yǎng)學(xué)術(shù)交流會“營養(yǎng)與成功老齡化”暨國家級繼續(xù)教育項目“神經(jīng)系統(tǒng)疾病醫(yī)學(xué)營養(yǎng)治療”資料匯編[C];2010年

2 陳艷秋;陳敏;宗敏;華莉;李臻;張鑫毅;孫建琴;;2型糖尿病患者肝臟脂肪分布與胰島素抵抗[A];老年營養(yǎng)研究進(jìn)展與老年營養(yǎng)供餐規(guī)范研討會暨糖尿病腎病醫(yī)學(xué)營養(yǎng)治療進(jìn)展學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2011年

3 宋曉敏;耿秀琴;郭長磊;;胰島素抵抗幾個相關(guān)因素在公安人群中的狀態(tài)與分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

4 游捷;陳瑤;黃培基;林哲章;;血清可溶性腫瘤壞死因子受體與胰島素抵抗的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

5 謝彬;陳上云;郭堅;劉薇;勞干誠;;監(jiān)測真胰島素觀察胰島素抵抗與胰島素敏感性[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

6 尹義輝;王經(jīng)武;;消胰抗治療胰島素抵抗的臨床研究[A];第七次全國中醫(yī)糖尿病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2003年

7 呂圭源;劉賽月;;中藥抗胰島素抵抗研究進(jìn)展[A];浙江省2005年中藥學(xué)術(shù)年會論文集[C];2005年

8 王曉靜;劉正齊;;一種簡便實用且較準(zhǔn)確評估胰島素抵抗的新方法[A];全國中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

9 白秀平;李宏亮;楊文英;肖建中;王冰;杜瑞琴;樓大鈞;;脂肪分存順序與肝臟及肌肉胰島素抵抗的關(guān)系[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

10 孫勤;李伶;楊剛毅;歐陽凌云;陳渝;劉華;唐毅;Gunther Boden;;小鼠擴(kuò)展胰島素鉗夾術(shù)的建立[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 ;胰島素小常識[N];保健時報;2004年

2 ;胰島素抵抗，怎么辦？[N];解放日報;2004年

3 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院老年病科副教授 陳化;什么是“胰島素抵抗”[N];健康報;2001年

4 張家慶 （教授）;適度鍛煉身體改善胰島素抵抗[N];上海中醫(yī)藥報;2003年

5 本報記者 韓曉英;注射胰島素會成癮嗎[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

6 張怡梅 劉 斌;惡性腫瘤與胰島素抵抗[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

7 健康時報特約記者 陳錦屏;胖人易發(fā)“胰島素抵抗”[N];健康時報;2007年

8 殳雪怡;胰島素抵抗 有辦法“抵抗”嗎[N];家庭醫(yī)生報;2007年

9 劉文山;胰島素抵抗[N];家庭醫(yī)生報;2007年

10 孟懷東;“致命四重奏”與胰島素抵抗[N];中國醫(yī)藥報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 殷青青;胰島素抵抗大鼠腦組織損傷機(jī)制以及番茄紅素的保護(hù)作用研究[D];山東大學(xué);2015年

2 施琳穎;二氫楊梅素通過誘導(dǎo)細(xì)胞自噬改善骨骼肌胰島素抵抗的作用及其機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 隆敏;下丘腦室旁核神經(jīng)肽Y長期過表達(dá)誘導(dǎo)外周胰島素抵抗作用機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 黃文輝;高胰島素抑制腎臟尿酸排泄的基礎(chǔ)與臨床研究以及氯沙坦的干預(yù)機(jī)制[D];蘭州大學(xué);2015年

5 付鋒;缺血后心肌胰島素抵抗促發(fā)缺血性心力衰竭及其機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 王宗保;NO-1886對糖脂代謝的影響及機(jī)制研究[D];南華大學(xué);2014年

7 張真穩(wěn);小檗堿協(xié)同甘丙肽降低2型糖尿病鼠脂肪組織胰島素抵抗的實驗研究[D];揚州大學(xué);2015年

8 何奕多;TNF-α對脂聯(lián)素多聚化修飾及分泌調(diào)控的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 陳璇;白虎二地湯調(diào)控胰島素信號通路改善2型糖尿病胰島素抵抗的研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

10 許鳳;海藻中新型PTP1B抑制劑對db/db糖尿病模型的改善與作用機(jī)制的研究[D];青島大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李晨;辛伐他汀、胰島素聯(lián)合用藥對糖尿病大鼠下頜骨骨折愈合的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 賈曉嬌;血清Vaspin、u樗�、脂联素灾R焉鍰悄蠆』頰咧興郊壩胍鵲核氐摯溝墓叵礫D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 黃聲;胰島素抵抗與認(rèn)知功能障礙的關(guān)系研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 牛尚梅;骨骼肌PGC-1α在高脂導(dǎo)致的胰島素抵抗中的作用機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 安雨;血清視黃醇結(jié)合蛋白-4與2型糖尿病及肥胖的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 陳旭;高胰島素水平導(dǎo)致肥胖相關(guān)機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2015年

7 劉晨曦;津力達(dá)改善棕櫚酸誘導(dǎo)的肌細(xì)胞胰島素抵抗的機(jī)制[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 段力園;津力達(dá)顆粒對高脂誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞胰島素抵抗影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 張東蛟;津力達(dá)對高脂誘導(dǎo)的胰島素抵抗ApoE基因敲除小鼠脂肪組織中脂代謝的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李貴平;黃芪甲苷對高胰島素誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號：1990116