本文關(guān)鍵詞：養(yǎng)肺通絡(luò)法干預(yù)Notch信號(hào)通路防治肺纖維化的機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《重慶醫(yī)科大學(xué)》 2015年

氯胺酮干擾非洲爪蟾早期胚胎分子機(jī)制的研究

陳春江  

【摘要】：目的：氯胺酮俗稱(chēng)K粉,是非特異性N-甲基-天門(mén)冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑,臨床常用于手術(shù)麻醉,是國(guó)際上流行的一類(lèi)新型毒品。關(guān)于氯胺酮濫用對(duì)早期胚胎發(fā)育的影響開(kāi)展了大量的研究。目前認(rèn)為氯胺酮的主要藥理作用是通過(guò)對(duì)NMDA受體的拮抗實(shí)現(xiàn)的,NMDA受體是一類(lèi)對(duì)Ca2+高度通透的配體門(mén)控離子通道,在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、神經(jīng)元存活和突觸可塑性上發(fā)揮著重要的作用。然而對(duì)于氯胺酮濫用影響早期胚胎發(fā)育所引起的出生缺陷目前尚缺乏有效的干預(yù)手段,很大部分原因是因?yàn)槲覀兡壳斑�不完全了解氯胺酮對(duì)早期胚胎發(fā)育的影響以及其作用的分子機(jī)制。因此研究氯胺酮暴露對(duì)胚胎早期發(fā)育影響的分子機(jī)制對(duì)于我們了解該類(lèi)藥物的藥理毒性作用、評(píng)估該類(lèi)藥物在手術(shù)麻醉中的潛在風(fēng)險(xiǎn)、預(yù)防和干預(yù)該類(lèi)藥物濫用導(dǎo)致的出生缺陷具有很強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義和科學(xué)價(jià)值。材料和方法：胚胎原位雜交,胚胎顯微注射,RT-PCR,雙重?zé)晒馑孛笀?bào)告分析,分子克隆技術(shù)構(gòu)建質(zhì)粒,細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染,電泳遷移率分析結(jié)果：1.氯胺酮暴露導(dǎo)致胚胎發(fā)生色素細(xì)胞減少或消失、腸道粗大、無(wú)神經(jīng),眼睛發(fā)育異常、顱面軟骨縮小或消失等一系列的發(fā)育缺陷；2.氯胺酮可以抑制Zic5在神經(jīng)嵴區(qū)域的表達(dá)；3.氯胺酮使得Notch信號(hào)通路下游靶基因的表達(dá)量下降；4. Notch信號(hào)通路的核內(nèi)部分NICD能夠明顯增強(qiáng)爪蛙zic5基因的表達(dá)；5.成功構(gòu)建爪蛙Zic5基因啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)重組熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒共10個(gè),并通過(guò)雙重?zé)晒馑孛笀?bào)告分析顯示NICD對(duì)爪蛙Zic5基因-186/-29啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的增強(qiáng)作用明顯低于-200/-29啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性,初步估計(jì)NICD結(jié)合Zic5基因啟動(dòng)子的區(qū)域在-186到-2006.電泳遷移率分析發(fā)現(xiàn)爪蛙Zic5-200/-186探針能與轉(zhuǎn)染了 NICD的SY5Y細(xì)胞總蛋白結(jié)合。結(jié)論：1氯胺酮通過(guò)干擾胚胎神經(jīng)嵴發(fā)育引起一系列的發(fā)育缺陷2.Zic5是氯胺酮干擾早期胚胎神經(jīng)嵴誘導(dǎo)的分子靶點(diǎn)3. NICD能上調(diào)Zic5基因的表達(dá),顯著增強(qiáng)爪蛙zic5啟動(dòng)子活性并且其識(shí)別位點(diǎn)為啟動(dòng)子-200/-1864.Notch信號(hào)通路在氯胺酮干擾神經(jīng)嵴誘導(dǎo)中發(fā)揮這關(guān)鍵作用

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R96
【目錄】：

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