天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

CXCR4受體反應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控甲狀腺乳頭狀癌細胞遷移、侵襲作用的機制研究

發(fā)布時間:2018-04-27 20:23

  本文選題:甲狀腺癌 + 基質(zhì)細胞衍生因子-1。 參考:《吉林大學(xué)》2017年博士論文


【摘要】:背景和目的:甲狀腺癌的發(fā)病率逐年上升,包括:乳頭狀癌、濾泡狀癌、未分化癌和髓樣癌。盡管分化良好的甲狀腺癌占甲狀腺癌患者的90%以上,但甲狀腺癌轉(zhuǎn)移的發(fā)生率卻非常高,20%-90%的甲狀腺乳頭狀癌患者在首次確診時已發(fā)生局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,嚴重影響了疾病的預(yù)后[3]。目前,甲狀腺癌轉(zhuǎn)移的分子機制尚不明確,研究甲狀腺癌轉(zhuǎn)移的分子機制對于尋找甲狀腺癌新的治療靶點具有重要的理論和實際意義;|(zhì)細胞衍生因子-1(SDF-1)是趨化因子蛋白家族主要成員之一,廣泛的表達于各種組織和細胞中。CXC族趨化因子受體4(CXCR4)是G蛋白偶聯(lián)受體家族的一員,是SDF-1的主要受體之一,SDF-1/CXCR4系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要作用。CXCR4在正常的甲狀腺細胞和多數(shù)良性的甲狀腺瘤細胞中低或不表達,而在甲狀腺癌細胞中高表達CXCR4[6,7]。CXCR4受體密度的增加,可增強SDF-1引起的細胞侵襲活動,但對癌細胞增殖沒有影響[8]。提示SDF-1/CXC R4系統(tǒng)可能在甲狀腺癌細胞的遷移侵襲過程中發(fā)揮重要作用。本課題的目的是在細胞模型中研究SDF-1/CXCR4系統(tǒng)調(diào)節(jié)甲狀腺乳頭狀癌細胞遷移、侵襲的作用及相關(guān)分子機制。材料和方法:1.材料82例人甲狀腺乳頭狀癌組織為吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院2014年12月至2016年5月手術(shù)切除標本;B-CPAP購于上海中喬新舟生物科技公司。2.方法(1)免疫組化檢測人甲狀腺乳頭狀癌組織標本中CXCR4的表達。(2)體外培養(yǎng)人甲狀腺乳頭狀癌細胞株(B-CPAP)。設(shè)計并合成CXCR4基因CDS區(qū),構(gòu)建CXCR4過表達的質(zhì)粒。B-CPAP細胞轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì);?qū)?yīng)的vector(空載質(zhì)粒),瞬轉(zhuǎn)獲得B-CPAP-vector和B-CPAP-CXCR4細胞。轉(zhuǎn)染48小時后,免疫印跡和熒光定量實驗檢測各組細胞中CXCR4的表達水平。(3)在B-CPAP細胞中轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì)粒24小時后,用100ng/ml的SDF-1處理48小時。然后通過劃痕實驗檢測各組細胞遷移能力;通過Transwel l實驗檢測各組細胞侵襲能力。(4)在B-CPAP細胞中轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì)粒24小時后,用100ng/ml的SDF-1處理48小時。然后免疫印跡檢測E-cadherin(上皮-鈣黏素),N-cadhe rin(神經(jīng)-鈣黏素),Vimentin(波形蛋白),NF-κB,磷酸化的IκB(P-IκB)以及細胞核內(nèi)NF-κB的表達水平。免疫熒光實驗檢測E-cadherin的表達情況。(5)在B-CPAP細胞中轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì)粒24小時后,用5μmol NF-κB抑制劑BAY11-7028(BAY)預(yù)處理1小時,然后加入100ng/ml的SDF-1處理48小時。免疫印跡實驗檢測NF-κB、P-IκB以及細胞核內(nèi)NF-κB的水平;劃痕實驗檢測各組細胞遷移能力;Transwell實驗檢測各組細胞侵襲能力。結(jié)果:(1)免疫組化檢測結(jié)果顯示CXCR4在甲狀腺乳頭狀癌組織中高表達(2)免疫印跡和熒光定量檢測結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì)粒后,B-CPA P-CXCR4細胞中CXCR4表達明顯增加。(3)在B-CPAP細胞中轉(zhuǎn)染CXCR4過表達質(zhì)粒后,用SDF-1處理,細胞的遷移性和侵襲性顯著增強。(4)SDF-1/CXCR4明顯減少了E-cadherin蛋白表達量,增加了N-cadhe rin蛋白、Vimentin蛋白的表達量。免疫熒光檢測E-cadherin蛋白發(fā)現(xiàn),SDF-1/CXCR4系統(tǒng)可以明顯抑制E-cadherin的表達量。表明SDF-1/CXCR4系統(tǒng)促進B-CPAP的EMT過程。(5)SDF-1/CXCR4系統(tǒng)可以顯著性提高細胞核中NF-κB的表達量,降低細胞質(zhì)中NF-κB的表達量,降低細胞中P-IκB的表達量,激活NF-κB信號通路。(6)免疫印跡實驗表明NF-κB抑制劑BAY可以提高E-cadherin表達量,降低N-cadherin、Vimentin表達量,抑制了SDF-1/CXCR4系統(tǒng)對B-CPAP的EM T過程的促進作用;劃痕實驗表明NF-κB抑制劑BAY可以減弱SDF-1/CXCR4系統(tǒng)對B-CPAP遷移能力的促進作用;Transwell實驗表明NF-κB抑制劑BAY可以減弱SDF-1/CXCR4系統(tǒng)對B-CPAP侵襲能力的促進作用。結(jié)論:(1)CXCR4受體反應(yīng)系統(tǒng)可加強NF-κB通路的信號傳導(dǎo),促進甲狀腺乳頭狀癌細胞的EMT過程,加強乳頭狀癌細胞的遷移侵襲。(2)NF-κB通路的抑制劑BAY可削弱CXCR4受體反應(yīng)系統(tǒng)對甲狀腺乳頭狀癌細胞EMT過程的促進作用,減輕CXCR4受體反應(yīng)系統(tǒng)對甲狀腺乳頭狀癌細胞的促遷移侵襲作用。NF-κB通路可望成為抑制甲狀腺乳頭狀癌細胞遷移侵襲的潛在治療靶點。
[Abstract]:Background and objective: the incidence of thyroid cancer is increasing year by year, including papillary, follicular, undifferentiated and medullary cancer. Although well differentiated thyroid cancer accounts for more than 90% of thyroid cancer patients, the incidence of thyroid cancer metastasis is very high, and 20%-90% thyroid papillary carcinoma has been localized at the first diagnosis. The molecular mechanism of thyroid cancer metastasis is not clear. The molecular mechanism of thyroid cancer metastasis is of great theoretical and practical significance for finding new therapeutic targets for thyroid cancer. The matrix derived factor -1 (SDF-1) is one of the main members of the chemokine protein family, [3]. is a major member of the chemokine protein family. .CXC chemokine receptor 4 (CXCR4), a member of the G protein coupling receptor family, is widely expressed in various tissues and cells. It is one of the major receptors of SDF-1. The SDF-1/CXCR4 system plays an important role in the occurrence of tumor and in the metastasis process,.CXCR4 is low or non expression in normal thyroid cells and most benign thyroid tumor cells. The increase in the density of CXCR4[6,7].CXCR4 receptor in thyroid cancer cells enhances SDF-1 induced cell invasion, but does not affect the proliferation of cancer cells by [8]. suggesting that SDF-1/CXC R4 system may play an important role in the migration and invasion of thyroid cancer cells. The purpose of this topic is to study SDF-1/ in the cell model. CXCR4 system regulates the migration, invasion and related molecular mechanisms of thyroid papillary carcinoma cells. Materials and methods: 1. materials and 82 cases of human thyroid papillary carcinoma were resected from December 2014 to May 2016 in the Sino Japanese Friendship Hospital of Jilin University; B-CPAP was purchased in.2. method (1) of Shanghai Zhong Qiao new boat biotechnology company (1) immunization The expression of CXCR4 in human papillary thyroid carcinoma tissue was detected. (2) human papillary carcinoma cell line (B-CPAP) was cultured in vitro. The CDS region of CXCR4 gene was designed and synthesized, and CXCR4 overexpressed plasmid.B-CPAP cells were transfected into CXCR4 overexpressed plasmid or corresponding vector (empty plasmid), and B-CPAP-vector and B-CPAP-CXCR4 cells were transients. After 48 hours transfection, the expression level of CXCR4 in each group was detected by immunoblotting and fluorescence quantitative assay. (3) after transfecting CXCR4 overexpression plasmid in B-CPAP cells for 24 hours, 100ng/ml SDF-1 was treated for 48 hours. Then the migration ability of each group was detected by scratch test, and the invasive ability of each group was detected through Transwel l test. (4) After transfecting the CXCR4 overexpression plasmid in B-CPAP cells for 24 hours, SDF-1 was treated with 100ng/ml for 48 hours. Then, E-cadherin (epithelia calcinin), N-cadhe Rin (nerve calcin), Vimentin (vimentin), NF- kappa B, I kappa B (kappa B) and the expression level of nuclear kappa protein in the nucleus were detected by immunoblotting. (5) (5) after transfection of CXCR4 overexpression plasmid in B-CPAP cells for 24 hours, 1 hours were pretreated with BAY11-7028 (BAY) of 5 mol NF- kappa B inhibitor, and then 100ng/ml SDF-1 for 48 hours. Results: (1) immunohistochemical detection showed that CXCR4 was highly expressed in thyroid papillary carcinoma (2) the results of immunoblotting and fluorescence quantitative detection showed that after transfection of CXCR4 overexpressed plasmid, the expression of CXCR4 in B-CPA P-CXCR4 cells increased significantly. (3) transfection of CXCR4 overexpressed plasmid in B-CPAP cells. The mobility and invasiveness of the cells were significantly enhanced by SDF-1 treatment. (4) SDF-1/CXCR4 significantly reduced the expression of E-cadherin protein and increased the expression of N-cadhe Rin protein and Vimentin protein. The immunofluorescent detection of E-cadherin protein found that SDF-1/CXCR4 system could significantly inhibit the expression of E-cadherin. The SDF-1/CXCR4 system promoted B-C. The EMT process of PAP. (5) the SDF-1/CXCR4 system can significantly increase the expression of NF- kappa B in the nucleus, reduce the expression of NF- kappa B in the cytoplasm, reduce the expression of P-I kappa B in the cell, and activate the NF- kappa B signaling pathway. (6) immunoblotting experiments show that the expression of NF- kappa inhibitor can improve the expression, decrease the expression and suppress the expression. The effect of SDF-1/CXCR4 system on the EM T process of B-CPAP was made, and the scratch test showed that NF- kappa B inhibitor BAY could weaken the promoting effect of SDF-1/CXCR4 system on B-CPAP migration ability. Transwell experiment showed that NF- kappa B inhibitor could weaken the promoting effect of the system on the invasion energy. Conclusion: (1) the receptor reaction system The signal transduction of NF- kappa B pathway can be strengthened to promote the EMT process of papillary thyroid carcinoma cells and to strengthen the migration and invasion of papillary carcinoma cells. (2) the inhibitor BAY of the NF- kappa B pathway can weaken the EMT process of the thyroid papillary carcinoma cell by the CXCR4 receptor reaction system and reduce the CXCR4 receptor reaction system to the thyroid papillary carcinoma. Cell migration and invasion.NF- kappa B pathway is expected to be a potential therapeutic target to inhibit the migration and invasion of papillary thyroid carcinoma cells.

【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R736.1

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 程秀英,門康;甲狀腺乳頭狀癌雙肺粟粒性轉(zhuǎn)移1例[J];診斷病理學(xué)雜志;2002年03期

2 王肖琴,陳興美,徐昌良,傅燕萍;甲狀腺乳頭狀癌的超聲特征[J];中國醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2002年05期

3 吳黎敏,李航,徐衛(wèi)萍;甲狀腺乳頭狀癌92例臨床分析[J];陜西腫瘤醫(yī)學(xué);2003年01期

4 周歡,陳輝,陳賢明;囊性甲狀腺乳頭狀癌誤診1例[J];東南國防醫(yī)藥;2004年01期

5 王紅衛(wèi),洪濤,劉江華,曹仁賢,文格波;人甲狀腺乳頭狀癌高表達基因片段篩選與克隆[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;2004年05期

6 林艷麗,王麗曾;甲狀腺乳頭狀癌36例臨床病理分析[J];西北國防醫(yī)學(xué)雜志;2004年06期

7 王國亮;張國昌;趙瑾;李鋒;;甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生的分子遺傳學(xué)研究[J];山東醫(yī)藥;2005年34期

8 賀清明;張修莉;師福才;;甲狀腺乳頭狀癌二次手術(shù)治療體會[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2006年08期

9 何春年;張靜;邢穎;;甲狀腺乳頭狀癌的診治進展[J];現(xiàn)代診斷與治療;2006年05期

10 梁粉花;付青;戴翠華;王剛平;李江濤;趙明春;;甲狀腺乳頭狀癌與乳頭狀增生的病理研究[J];腫瘤研究與臨床;2006年11期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王英煒;朱宏;宋月佳;戚基萍;劉娜;;甲狀腺透明變梁狀腫瘤與甲狀腺乳頭狀癌的分析[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

2 鄭薇;張桂芝;譚建;;甲狀腺乳頭狀癌胸骨轉(zhuǎn)移2例病例報道[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第30次學(xué)術(shù)年會暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會論文集[C];2010年

3 岳林先;馬懿;鄧立強;蔡志清;王士光;;彌漫硬化型甲狀腺乳頭狀癌的聲像圖表現(xiàn)[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第八屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 李沿江;劉燕娜;黃敏;章春泉;皮小蘭;蔡建華;李車英;李薇;徐翔;沈孝萍;張詩淵;;甲狀腺乳頭狀癌聲像圖回顧分析[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第三次全國淺表器官及外周血管超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議(高峰論壇)論文匯編[C];2011年

5 王全;楊俊杰;沈強;唐衛(wèi)華;;甲狀腺乳頭狀癌的手術(shù)范圍探討[A];2005年浙江省外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 嚴峗;;甲狀腺乳頭狀癌的超聲診斷體會[A];2012年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年

7 時嘉欣;田家瑋;;甲狀腺乳頭狀癌的超聲造影特點[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

8 李逢生;韓琴芳;徐榮;;超聲造影在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

9 王建紅;趙誠;劉榮桂;牛曉燕;房世保;王正濱;;橋本甲狀腺炎合并甲狀腺乳頭狀癌的超聲診斷價值[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第八屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

10 王長秋;趙文雯;魯安懷;柳劍英;梅放;張波;;甲狀腺乳頭狀癌組織壞死后礦化特征研究[A];中國礦物巖石地球化學(xué)學(xué)會第13屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉欣;甲狀腺乳頭狀癌風(fēng)險評估研究[D];吉林大學(xué);2013年

2 劉宇飛;DLC1基因的表達與甲狀腺乳頭狀癌中淋巴管生成關(guān)系的臨床研究[D];武漢大學(xué);2014年

3 張凌;促甲狀腺激素與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生相關(guān)的臨床基礎(chǔ)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 王璐;PRDM1在橋本甲狀腺炎和甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生中的分子機理研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 李銳;miR-29a通過靶向調(diào)節(jié)AKT3抑制甲狀腺乳頭狀癌生長與轉(zhuǎn)移的研究[D];吉林大學(xué);2016年

6 吳靖芳;RNA干擾TFF3基因?qū)θ思谞钕偃轭^狀癌細胞增殖與侵襲的影響及機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

7 楊梅柳;LncRNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及功能分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

8 趙水英;LDOC1在人甲狀腺乳頭狀癌中的表達及作用機制研究[D];鄭州大學(xué);2016年

9 董帥;橋本氏甲狀腺炎伴多灶性甲狀腺乳頭狀癌的BRAF基因突變分析及預(yù)警信號的研究[D];浙江大學(xué);2016年

10 寧麗峰;MAPK通路基因多態(tài)性與甲狀腺乳頭狀癌關(guān)系的遺傳流行病學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李瑋;甲狀腺乳頭狀癌細胞對促甲狀腺激素反應(yīng)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 馬恒;術(shù)前PLR、NLR對甲狀腺乳頭狀癌患者術(shù)后無復(fù)發(fā)生存的預(yù)測價值[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

3 王倩倩;CCNG2在人甲狀腺乳頭狀癌K1細胞中的表達及其對K1細胞增殖凋亡影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 許建輝;慢病毒介導(dǎo)CCDC67轉(zhuǎn)染甲狀腺乳頭狀癌細胞生物學(xué)活性的鑒定[D];鄭州大學(xué);2015年

5 宋廣昊;TXNIP在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊岳;STIP1、EMA和ER-α蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及其意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 趙愛國;TC-1在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及臨床意義[D];鄭州大學(xué);2015年

8 鄭建;MiR-146b-5p對甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1相關(guān)生物學(xué)特性的影響研究[D];鄭州大學(xué);2015年

9 楊珂;甲狀腺乳頭狀癌BRAF~(V600E)基因突變與遠處轉(zhuǎn)移灶攝碘能力的相關(guān)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

10 馬思遠;FoxP3對甲狀腺乳頭狀癌中NIS表達的影響及機制研究[D];鄭州大學(xué);2015年

,

本文編號:1812181

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/shoufeilunwen/yxlbs/1812181.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶ec6fc***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
日韩高清中文字幕亚洲| 91欧美日韩国产在线观看| 欧美午夜一级特黄大片| 免费福利午夜在线观看| 麻豆剧果冻传媒一二三区| 日韩在线视频精品视频| 中文字幕人妻av不卡| 国产免费人成视频尤物| 91福利免费一区二区三区| 国产精品国三级国产专不卡| 日韩午夜老司机免费视频| 欧美成人黄色一级视频| 黄男女激情一区二区三区| 免费特黄一级一区二区三区| 亚洲精品国男人在线视频| 大香蕉伊人精品在线观看| 国产激情国产精品久久源| 久久精品国产亚洲av麻豆尤物| 午夜精品久久久99热连载| 又大又长又粗又猛国产精品| 亚洲av日韩av高潮无打码| 国产精品十八禁亚洲黄污免费观看 | 日本国产欧美精品视频| 午夜福利视频六七十路熟女| 亚洲中文字幕视频在线观看| 日韩女优视频国产一区| 青青免费操手机在线视频| 免费在线观看激情小视频| 欧美又黑又粗大又硬又爽| 中文文精品字幕一区二区| 久久人人爽人人爽大片av| 91欧美日韩一区人妻少妇| 天海翼精品久久中文字幕| 国产精品乱子伦一区二区三区| 中文字幕精品人妻一区| 嫩草国产福利视频一区二区| 亚洲精品偷拍视频免费观看| 日本国产欧美精品视频| 日韩精品人妻少妇一区二区| 亚洲成人免费天堂诱惑| 在线观看免费视频你懂的|