本文選題：HDAC7　切入點(diǎn)：Nur77　出處：《山東大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究目的與意義學(xué)習(xí)記憶是大腦的高級(jí)功能之一,在我們生存和生活過程中發(fā)揮著重要作用。認(rèn)清學(xué)習(xí)記憶發(fā)生的本質(zhì),不僅可以幫助我們更好的認(rèn)識(shí)及改造世界,也能為臨床上以學(xué)習(xí)記憶能力異常為主要特征的某些神經(jīng)精神疾病,如阿爾茲海默氏病、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)、成癮等的治療,提供有效的治療靶點(diǎn)和治療方案。基因轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成的動(dòng)態(tài)變化以及由其導(dǎo)致的神經(jīng)元結(jié)構(gòu)及功能的可塑性,在形成記憶的過程中發(fā)揮著非常重要的作用。目前已知,特定神經(jīng)環(huán)路中的特定神經(jīng)元內(nèi)一系列關(guān)鍵分子及其下游信號(hào)通路的激活,是上述過程的前提,但是由于這些關(guān)鍵分子的變化時(shí)間有限(從幾小時(shí)至幾天,最長(zhǎng)不過幾個(gè)月),并不能維持基因轉(zhuǎn)錄及蛋白合成的長(zhǎng)期變化,提示我們學(xué)習(xí)記憶的形成及保存還需另外的機(jī)制參與。近期研究發(fā)現(xiàn),表觀遺傳(epigenetic)修飾對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的持續(xù)調(diào)控,在長(zhǎng)期記憶的過程中發(fā)揮重要作用。表觀遺傳修飾即在保持核苷酸序列不變的情況下,通過改變?nèi)旧|(zhì)的空間構(gòu)型、調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子與相關(guān)基因的結(jié)合,來影響基因的表達(dá),主要包括組蛋白的修飾(包括乙酰化、甲基化、磷酸化等)、DMA甲基化修飾、染色質(zhì)重塑和非編碼RNA等作用方式。其中乙酰化修飾備受關(guān)注,發(fā)現(xiàn)其動(dòng)力學(xué)變化在多種認(rèn)知過程以及神經(jīng)精神疾病中發(fā)揮重要作用。乙�；砂l(fā)生于每一個(gè)組蛋白的多個(gè)位點(diǎn)上,嚴(yán)格受到兩種作用完全相反的酶,組蛋白乙酰化轉(zhuǎn)移酶(histone acetyltransferase,HAT)和組蛋白去乙�；�(histone deacetylase,HDAC)的動(dòng)態(tài)調(diào)控。HAT激活后將乙酰輔酶A的乙�；D(zhuǎn)移到組蛋白氨基末端特定的賴氨酸殘基上,主要使DNA與組蛋白的親和力降低,有利于各種轉(zhuǎn)錄因子連同協(xié)同轉(zhuǎn)錄因子與DNA相應(yīng)位點(diǎn)特異性結(jié)合,激活特定基因的轉(zhuǎn)錄,促進(jìn)大腦的認(rèn)知能力。而HDAC則促進(jìn)組蛋白去乙�；�,從而促進(jìn)組蛋白與DNA緊密結(jié)合,染色質(zhì)更加致密卷曲,基因的轉(zhuǎn)錄因此受到抑制,從而在多個(gè)腦區(qū)中對(duì)學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行負(fù)調(diào)節(jié)。目前研究表明HDAC在學(xué)習(xí)記憶中發(fā)揮重要作用,機(jī)體內(nèi)有HDAC共4類,18種(HDAC1-11和SIRT1-7),不同的HDAC在學(xué)習(xí)和記憶中發(fā)揮不同的作用。有研究表明敲除小鼠海馬CA1區(qū)HDAC3,可以增強(qiáng)方位認(rèn)知能力但是不影響新奇物體認(rèn)知能力;HDAC5敲除小鼠表現(xiàn)出空間記憶能力缺失,但不影響聯(lián)想學(xué)習(xí)記憶的形成;過表達(dá)HDAC1可以促進(jìn)恐懼記憶的消退,但不影響恐懼記憶的形成。使用HDAC的抑制劑可以有效增強(qiáng)動(dòng)物在條件性恐懼記憶、物體方位認(rèn)知,新奇物體認(rèn)知,食物偏好及空間記憶測(cè)試中的表現(xiàn),提示抑制HDAC的活性可以增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力,并有望成為改善人類記憶缺陷的新方法。但目前使用的HDAC抑制劑具有廣譜性,而通過作用于何種特異性的HDAC發(fā)揮改善記憶的作用仍不清楚,這極大限制了選擇性HDAC抑制劑的開發(fā)和應(yīng)用。因此進(jìn)一步闡明不同HDAC在學(xué)習(xí)和記憶中的作用及機(jī)制,將為開發(fā)特異性HDAC抑制劑提供重要的理論依據(jù)。環(huán)境依賴性恐懼記憶(contextual fear conditioning,CFC)是一種經(jīng)典的學(xué)習(xí)記憶模型,可以分別檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶的獲得,短時(shí)記憶和長(zhǎng)時(shí)記憶的形成。對(duì)CFC訓(xùn)練后海馬CA1腦區(qū)進(jìn)行基因芯片的篩選發(fā)現(xiàn),包含HDAC7在內(nèi)的多種HDACs發(fā)生了明顯的變化,提示HDAC可能在其中發(fā)揮重要作用。HDAC7是Ⅱ類HDAC,研究多集中于心血管及免疫等非神經(jīng)系統(tǒng),但其在學(xué)習(xí)記憶中的作用及機(jī)制尚未見報(bào)道。為此,本課題應(yīng)用CFC模型及體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究HDAC7在學(xué)習(xí)和記憶中的作用及其機(jī)制。研究表明在CFC后小鼠背側(cè)海馬(dorsal hippocampus,DH)腦區(qū)中HDAC7表達(dá)明顯下降;過表達(dá)或者干擾HDAC7可以明顯改變小鼠CFC學(xué)習(xí)記憶的能力,提示HDAC7在學(xué)習(xí)記憶中發(fā)揮重要作用。進(jìn)一步通過蛋白質(zhì)譜篩選、免疫共沉淀及體內(nèi)外泛素化實(shí)驗(yàn)研究表明CFC記憶形成過程中E3連接酶CBX4參與了 HDAC7的降解,并發(fā)現(xiàn)HDAC7通過調(diào)控下游效應(yīng)分子Nur77參與到環(huán)境依賴恐懼記憶的調(diào)控,本課題充實(shí)和完善了對(duì)HDAC7在學(xué)習(xí)記憶中生物學(xué)功能的認(rèn)識(shí),為臨床相關(guān)疾病治療提供新的靶點(diǎn)和思路,具有重要的理論意義和潛在的應(yīng)用價(jià)值。研究方法1.HDAC7在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中的生理學(xué)變化1.1 環(huán)境依賴恐懼記憶模型的構(gòu)建及HDAC7的檢測(cè)選取年齡為12周的雄性野生型(wildtype,WT)C57BL/6J小鼠。單只分籠放在環(huán)境依賴恐懼記憶模型(contextual fear conditioning,CFC)訓(xùn)練房間適應(yīng)一晚上,然后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將小鼠柔和的放入CFC訓(xùn)練箱內(nèi),使其自由活動(dòng)適應(yīng)箱內(nèi)環(huán)境2min,然后分別給予三次足底電擊(0.4 mA或0.7 mA)2s,每?jī)纱巫愕纂姄糁g的間隔為58s。最后一次足底電擊后,小鼠在訓(xùn)練箱中再放置58s,然后放回飼養(yǎng)籠中,繼續(xù)單只飼養(yǎng)。整個(gè)訓(xùn)練過程一共持續(xù)5min。在實(shí)驗(yàn)所需的時(shí)間點(diǎn)處死小鼠,斷頭取材。使用蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot,WB)、Real-time RT-PCR 和免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry,IHC)檢測(cè) HDAC7 通過 CFC 訓(xùn)練后在背側(cè)海馬(dorsal hippocampus,DH)腦區(qū)中表達(dá)變化。1.2 HDAC7變化的特異性CFC模型建立成功后6h處死小鼠,斷頭取腦。用腦模具將小鼠的背側(cè)海馬(dorsal hippocampus,DH)、腹側(cè)海馬(ventral hippocampus,VH)和基底外側(cè)杏仁核(basolateral amygdale,AMY)分別取出,使用蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot,WB)檢測(cè)HDAC7蛋白水平在不同腦區(qū)的變化,以及在背側(cè)海馬(dorsal hippocampus,DH)腦區(qū),不同HDACs的蛋白水平的變化。1.3 環(huán)境及恐懼記憶的偶聯(lián)引起HDAC7的生理學(xué)變化單籠飼養(yǎng)的小鼠,分別進(jìn)行CFC訓(xùn)練,足底電擊單因素刺激(shock,只用電擊板快速給予小鼠足底電擊)和環(huán)境單因素刺激(context,把小鼠放入CFC訓(xùn)練箱內(nèi)5min,不給予足底電擊)。訓(xùn)練后6h處死小鼠,斷頭取腦,使用蛋白質(zhì)免疫印跡法(western blot,WB)檢測(cè)HDAC7蛋白水平在不同刺激中的變化。2.HDAC7在小鼠環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中的作用2.1 病毒的構(gòu)建及效率檢測(cè)用四質(zhì)粒系統(tǒng)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞進(jìn)行病毒包裝及生成,轉(zhuǎn)染72h后收集病毒液進(jìn)行純化濃縮。將濃縮的病毒液用腦立體定位儀和微量注射泵定點(diǎn)注射到小鼠的DH腦區(qū)。然后用組織免疫熒光(immunofluorescence,IF)方法檢測(cè)病毒的侵染效率,用WB檢測(cè)HDAC7的干擾和過表達(dá)效率。2.2 干擾或過表達(dá)HDAC7對(duì)小鼠環(huán)境依賴恐懼記憶的影響用病毒在小鼠DH腦區(qū)干擾或者過表達(dá)HDAC7,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練。分別在訓(xùn)練后1h和24h進(jìn)行CFC測(cè)試,將經(jīng)過CFC訓(xùn)練的小鼠放回訓(xùn)練箱5min,不給足底電擊,記錄小鼠的不動(dòng)(freezing)時(shí)間。檢測(cè)小鼠的短時(shí)記憶(short term memory,STM)和長(zhǎng)時(shí)記憶(long term memory,LTM)。2.3 HDAC7作用的特異性用病毒在小鼠AMY腦區(qū)干擾或者過表達(dá)HDAC7,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練。分別在訓(xùn)練后1h和24h進(jìn)行CFC測(cè)試,將經(jīng)過CFC訓(xùn)練的小鼠放回訓(xùn)練箱5min,不給足底電擊,記錄小鼠的不動(dòng)(freezing)時(shí)間。檢測(cè)小鼠的短時(shí)記憶(short term memory,STM)和長(zhǎng)時(shí)記憶(long term memory,LTM)。3.HDAC7在不同海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶模式中的作用用病毒裝載干擾或者過表達(dá)HDAC7的質(zhì)粒,在小鼠DH腦區(qū)干擾或者過表達(dá)HDAC7。用水迷宮檢測(cè)HDAC7對(duì)空間記憶的影響,采用一個(gè)直徑為120cm,高度40cm的圓柱形水池。水溫恒定在22℃C,在水池周圍布置不同的裝飾物作為觀察標(biāo)記。將水池平分為四個(gè)象限,在其中一個(gè)象限中央放置一個(gè)隱藏的平臺(tái)。將小鼠面向池壁放入水中,使其自由游泳尋找平臺(tái),連續(xù)訓(xùn)練5天,第6天進(jìn)行測(cè)試。用Smart軟件記錄小鼠的軌跡和找到平臺(tái)的潛伏期。檢測(cè)小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。用方位認(rèn)知模型檢測(cè)HDAC7對(duì)小鼠方位認(rèn)知的影響。在長(zhǎng)*寬*高為40cm*40cm*35cm的立方體空間內(nèi),放入兩個(gè)相同的物體,讓小鼠進(jìn)行自由探索訓(xùn)練,24h后移動(dòng)其中一個(gè)物體的位置,讓經(jīng)過探索訓(xùn)練的小鼠再次自由探索。用Smart軟件記錄小鼠的軌跡和對(duì)不同位置物體的探索時(shí)間。檢測(cè)小鼠的方位認(rèn)知能力。4.HDAC7生理變化的機(jī)制4.1 HDAC7蛋白合成和降解的檢測(cè)將小鼠進(jìn)行埋管手術(shù),恢復(fù)兩周后進(jìn)行CFC訓(xùn)練。CFC訓(xùn)練前分別將溶劑對(duì)照,蛋白合成抑制劑CHX和蛋白降解抑制劑βLAC通過微管注射到小鼠DH腦區(qū)。然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練,訓(xùn)練后6h處死小鼠,斷頭取材。用WB的方法檢測(cè)HDAC7蛋白水平的變化。用Co-IP的方法檢測(cè)HDAC7的泛素化的變化。4.2 HDAC7的E3連接酶的篩選及驗(yàn)證用蛋白質(zhì)譜篩選HDAC7的E3連接酶。用外源Co-IP,內(nèi)源Co-IP,純化蛋白直接結(jié)合以及體外泛素化的方法驗(yàn)證HDAC7的E3連接酶。4.3 E3連接酶對(duì)HDAC7參與環(huán)境依賴恐懼記憶的影響用病毒裝載CBX4的干擾序列。采用定點(diǎn)注射的方法,用立體定位儀和微量注射泵在小鼠DH腦區(qū)注射病毒。然后將小鼠進(jìn)行CFC訓(xùn)練及測(cè)試。記錄小鼠的freezing值。5.HDAC7影響環(huán)境依賴恐懼記憶的機(jī)制5.1 HDAC7調(diào)控的組蛋白乙�；稽c(diǎn)的篩選用病毒干擾小鼠DH腦區(qū)中的HDAC7,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練。6h后處死小鼠,斷頭取材,用WB的方法檢測(cè)不同乙酰化位點(diǎn)的變化。5.2 HDAC7調(diào)控的下游靶基因及其調(diào)控機(jī)制將小鼠進(jìn)行CFC訓(xùn)練,在不同時(shí)間點(diǎn)取材。用Real-time RT-PCR方法檢測(cè)Nur77的變化。在體外神經(jīng)元和小鼠DH腦區(qū)中分別用病毒干擾或者過表達(dá)HDAC7,然后用WB的方法檢測(cè)Nur77的變化。用染色質(zhì)免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)的方法檢測(cè) HDAC7 對(duì) Nur77 promoter的影響。5.3 HDAC7下游靶基因?qū)Νh(huán)境依賴恐懼記憶的影響用病毒裝載Nur77的干擾序列。在小鼠DH腦區(qū)定點(diǎn)注射干擾Nur77的病毒。然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練及測(cè)試,記錄小鼠的freezing值。研究結(jié)果1.HDAC7在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中的表達(dá)變化1.1 HDAC7在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中蛋白水平明顯降低WB檢測(cè)小鼠DH腦區(qū)HDAC7的表達(dá)。結(jié)果顯示,在CFC訓(xùn)練4h后HDAC7蛋白水平與正常對(duì)照(naive)組比較有顯著降低,到6h后降到最低,并能持續(xù)到24h。這一結(jié)果在IHC結(jié)果中也得到了驗(yàn)證。1.2 HDAC7蛋白水平在背側(cè)海馬腦區(qū)特異性的降低WB檢測(cè)小鼠不同腦區(qū)中HDAC7在CFC訓(xùn)練后蛋白水平的變化。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,只有DH腦區(qū)中HDAC7蛋白水平降低,VH和AMY腦區(qū)中HDAC7的蛋白水平?jīng)]有明顯變化。WB檢測(cè)不同HDACs在CFC訓(xùn)練后的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)naive相比,HDAC7蛋白水平明顯降低。1.3 環(huán)境及恐懼記憶的偶聯(lián)促進(jìn)HDAC7的變化WB檢測(cè)不同刺激對(duì)HDAC7蛋白水平的影響。結(jié)果顯示,與naive組相比,單因素刺激(context,shock)組HDAC7沒明顯變化,CFC訓(xùn)練組HDAC7蛋白水平明顯降低。2.背側(cè)海馬內(nèi)HDAC7損傷環(huán)境依賴恐懼記憶形成2.1 背側(cè)海馬內(nèi)HDAC7可以調(diào)控環(huán)境依賴恐懼記憶形成用病毒分別裝載HDAC7過表達(dá)質(zhì)粒和干擾質(zhì)粒以及相應(yīng)的對(duì)照質(zhì)粒,在小鼠DH腦區(qū)定點(diǎn)注射,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練和測(cè)試,記錄小鼠的Freezing值。結(jié)果顯示,與對(duì)照病毒組比較,過表達(dá)或干擾HDAC7組的小鼠在訓(xùn)練和STM測(cè)試的Freezing值均沒有顯著變化,但是在LTM測(cè)試中,過表達(dá)HDAC7小鼠的Freezing值較對(duì)照組有顯著的下降。而干擾HDAC7小鼠的Freezing值較對(duì)照組有顯著的升高。2.2 在杏仁核腦區(qū)HDAC7不影響環(huán)境依賴恐懼記憶形成用病毒分別裝載HDAC7過表達(dá)質(zhì)粒和干擾質(zhì)粒以及相應(yīng)的對(duì)照質(zhì)粒,在小鼠AMY腦區(qū)定點(diǎn)注射,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練和測(cè)試,記錄小鼠的Freezing值。結(jié)果顯示,與對(duì)照病毒組比較,干擾HDAC7或者過表達(dá)HDAC7組的小鼠在訓(xùn)練、STM和LTM測(cè)試中的Freezing值均沒有顯著變化。3.HDAC7參與多種海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶范式3.1 干擾HDAC7促進(jìn)小鼠空間記憶及方位認(rèn)知能力在小鼠DH腦區(qū)干擾HDAC7,然后進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練及測(cè)試。結(jié)果發(fā)現(xiàn),干擾HDAC7組的小鼠與對(duì)照組相比,找到平臺(tái)的潛伏期明顯降低;進(jìn)行方位認(rèn)知訓(xùn)練及測(cè)試。結(jié)果發(fā)現(xiàn),干擾HDAC7組的小鼠與對(duì)照組相比,探索新位置物體的時(shí)間明顯增加。3.2 過表達(dá)HDAC7損傷小鼠空間記憶及方位認(rèn)知能力在小鼠DH腦區(qū)過表達(dá)HDAC7,然后進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練及測(cè)試。結(jié)果發(fā)現(xiàn),過表達(dá)HDAC7組的小鼠與對(duì)照組相比,找到平臺(tái)的潛伏期明顯增加;進(jìn)行方位認(rèn)知訓(xùn)練及測(cè)試。結(jié)果發(fā)現(xiàn),過表達(dá)HDAC7組的小鼠與對(duì)照組相比,探索新位置物體的時(shí)間明顯減少。4.HDAC7在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中通過泛素化降解4.1 HDAC7在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程中泛素化增加Real-time RT-PCR檢測(cè)CFC對(duì)DH腦區(qū)中HDAC7的mRNA水平的影響并發(fā)現(xiàn),與naive組相比,CFC后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)小鼠DH腦區(qū)中HDAC7的mRNA水平?jīng)]有明顯改變。用內(nèi)源Co-IP檢測(cè)CFC后HDAC7的泛素化的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),CFC組較對(duì)照組泛素化水平明顯增加。用腦內(nèi)埋管技術(shù),在小鼠DH腦區(qū)中微量注射蛋白合成抑制劑CHX,蛋白降解抑制劑βLAC和溶劑對(duì)照,然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練。用WB檢測(cè)HDAC7蛋白水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn),βLAC組HDAC7與對(duì)照組相比沒有明顯差異,CHX組HDAC7蛋白水平較對(duì)照組明顯降低。4.2 CBX4作為HDAC7的E3連接酶促進(jìn)HDAC7的泛素化降解用質(zhì)譜的方法篩選HDAC7的E3連接酶,結(jié)果發(fā)現(xiàn)CBX4是HDAC7緊密結(jié)合的E3連接酶。用內(nèi)源Co-IP,外源Co-IP以及體外純化蛋白Co-IP檢測(cè)HDAC7和CBX4的結(jié)合。結(jié)果發(fā)現(xiàn),HDAC7和CBX4有明顯的結(jié)合。用內(nèi)源Co-IP及體外泛素化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CBX4對(duì)HDAC7泛素化的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),干擾CBX4組HDAC7泛素化較正常組明顯減少。4.3 CBX4在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程表達(dá)增加用WB檢測(cè)CBX4在CFC過程中的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與naive相比,CBX4在CFC后表達(dá)明顯增加。用WB檢測(cè)干擾CBX4后HDAC7的表達(dá)變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn),干擾CBX4組與對(duì)照組相比HDAC7的表達(dá)明顯增加。4.4 干擾CBX4可以損傷環(huán)境依賴恐懼記憶形成用病毒裝載CBX4的干擾質(zhì)粒,定點(diǎn)注射在小鼠DH腦區(qū),然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練,記錄小鼠freezing值。結(jié)果發(fā)現(xiàn),干擾CBX4組小鼠的freezing值較對(duì)照組明顯降低。并且同時(shí)干擾Nur77和HDAC7組小鼠的Freezing值較單獨(dú)干擾CBX4組有顯著升高。5.HDAC7通過Nur77發(fā)揮調(diào)控環(huán)境依賴恐懼記憶的形成5.1 Nur77在環(huán)境依賴恐懼記憶形成過程表達(dá)增加用Real-time RT-PCR和WB檢測(cè)CFC后Nur77的表達(dá)變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn),與naiive組相比,CFC訓(xùn)練能促進(jìn)DH腦區(qū)中Nur77的表達(dá),但是VH腦區(qū)中Nur77沒有明顯變化。5.2 HDAC7通過抑制H4K12位點(diǎn)的乙�；{(diào)控Nur77的表達(dá)用WB和CHIP的方法檢測(cè)HDAC7對(duì)Nur77的調(diào)控機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,干擾HDAC7組H4K12位點(diǎn)的乙酰化水平明顯增加,Nur77 promoter表達(dá)顯著升高,Nur77蛋白水平較對(duì)照組有明顯的升高。5.3 干擾Nur77損傷環(huán)境依賴恐懼記憶形成,并且能一定程度的逆轉(zhuǎn)HDAC7的作用用病毒裝載Nur77的干擾質(zhì)粒,在小鼠DH腦區(qū)定點(diǎn)注射病毒干擾Nur77表達(dá),然后進(jìn)行CFC訓(xùn)練及測(cè)試,記錄小鼠Freezing值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)和對(duì)照組相比較,單獨(dú)干擾Nur77組小鼠的Freezing值明顯降低,并且同時(shí)干擾Nur77和HDAC7組小鼠的Freezing較對(duì)照組也明顯降低。研究結(jié)論與創(chuàng)新性1.本研究首次闡明了 HDAC7在海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶中的表達(dá)變化及其調(diào)控機(jī)制,發(fā)現(xiàn)在CFC聯(lián)想學(xué)習(xí)記憶過程中HDAC7表達(dá)明顯降低,過表達(dá)HDAC7損傷海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶,CFC記憶形成過程中E3連接酶CBX4參與了HDAC7的降解。2.本研究進(jìn)一步闡明HDAC7調(diào)控海馬依賴學(xué)習(xí)記憶的作用機(jī)制,發(fā)現(xiàn)HDAC7通過調(diào)控H4K12位點(diǎn)乙�；{(diào)控下游基因Nur77的表達(dá),從而影響海馬依賴的學(xué)習(xí)記憶。綜上,本研究發(fā)現(xiàn)HDAC7通路調(diào)控海馬依賴學(xué)習(xí)記憶的多個(gè)靶點(diǎn),包括:CBX4,HDAC7和Nur77,為治療臨床上以學(xué)習(xí)記憶能力異常為主要特征的疾病提供了重要的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R749
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本文編號(hào)：1573747