本文關(guān)鍵詞： 補腎法 卵母細(xì)胞質(zhì)量 線粒體功能 氧化應(yīng)激 抗氧化 Nrf2信號通路　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：隨著不孕癥發(fā)病率逐年升高,體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技術(shù)成為治療不孕癥的重要手段�？刂菩月殉泊碳�(control ovarian stimulation,COS)是通過注射外源性促性腺激素調(diào)控卵巢內(nèi)多個卵泡同時發(fā)育的干預(yù)過程,是IVF過程中關(guān)鍵步驟。單次移植的成功率很低,6個IVF-ET的累計活產(chǎn)率僅約65.3%,臨床上重復(fù)COS十分常見。受精卵由精卵結(jié)合而成,卵母細(xì)胞作為來源于母親的生殖細(xì)胞,具有傳遞遺傳物質(zhì),儲備營養(yǎng)能量的重要作用。重復(fù)COS后顆粒細(xì)胞線粒體功能下降已被證實,影響線粒體功能的重要因素即氧化應(yīng)激狀態(tài)的存在。卵母細(xì)胞與顆粒細(xì)胞同處于卵泡中,線粒體作為卵母細(xì)胞胞質(zhì)中含量最為豐富的細(xì)胞器,為卵母細(xì)胞發(fā)育及早期胚胎發(fā)育提供能量,是評價卵母細(xì)胞胞質(zhì)成熟的重要指標(biāo)。卵母細(xì)胞線粒體是否受到影響值得研究。課題組前期研究發(fā)現(xiàn),補腎法能夠調(diào)節(jié)卵母細(xì)胞分泌因子表達,提高卵母細(xì)胞質(zhì)量,并具有提高排卵障礙模型大鼠卵巢的抗氧化能力,降低氧化產(chǎn)物水平,改善卵巢功能的作用。本論文擬研究重復(fù)COS是否會造成卵巢氧化應(yīng)激狀態(tài),觀察補腎法對重復(fù)COS后卵母細(xì)胞的影響及其作用機制,以期揭示補腎法通過改善氧化應(yīng)激狀態(tài),提高卵母細(xì)胞質(zhì)量,發(fā)揮調(diào)經(jīng)種子作用的可能機制,豐富“腎主生殖”的科學(xué)內(nèi)涵。第一部分補腎法對重復(fù)COS小鼠卵巢抗氧化應(yīng)激能力的影響目的:研究重復(fù)COS對小鼠抗氧化酶活性、抗氧化能力的影響及是否對卵巢組織蛋白、脂質(zhì)及核酸成分造成氧化損傷,并觀察補腎調(diào)經(jīng)方對重復(fù)COS后小鼠卵巢組織氧化損傷作用。方法:將40只8-10周齡雌性昆明小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周,每天早9:00陰道涂片觀察動情周期,隨機分為4組,補腎高劑量組、補腎低劑量組、模型組及空白組,每組各10只。模型組及補腎高、低劑量組每日上午9:00分別灌胃蒸餾水及補腎調(diào)經(jīng)方,1m L/100g體重,連續(xù)10天。模型組及補腎各組于第11日同時腹腔注射PMSG 10IU/只,48小時后腹腔注射HCG10IU/只�？瞻捉M每日陰道涂片觀察動情周期。重復(fù)以上過程3周期,每周期間隔4天。模型組及補腎高、低劑量組小鼠在COS第3周期注射PMSG后46h,擬注射HCG前脫頸椎處死,將兩側(cè)卵巢摘除,迅速凍于液氮中保存�？瞻捉M在觀察到發(fā)情期后10h脫頸椎處死,摘取卵巢,液氮凍存。使用時將卵巢由液氮中取出,置于冰上,加PBS勻漿,離心后取上清進行檢測。采用ELISA試劑盒檢測8-OHd G、AOPP、MDA、SOD、GSH-Px及T-AOC的水平。結(jié)果:1各組卵巢組織8-OH-d G含量的比較與正常組比較,補腎高劑量組卵巢組織8-OHd G含量無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),補腎低劑量組8-OHd G含量升高(P0.05),模型組8-OHd G含量顯著升高(P0.01);與模型組比較,補腎高劑量組、正常組8-OHd G含量顯著降低(P0.01),補腎低劑量組8-OHd G含量無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);補腎高、低劑量組之間比較,補腎高劑量組8-OHd G更低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2各組卵巢組織AOPP含量的比較與正常組比較,補腎高、低劑量組卵巢組織AOPP含量升高(P0.05),模型組AOPP含量顯著升高(P0.01);與模型組比較,補腎高、低劑量組AOPP含量顯著降低(P0.01),正常組AOPP含量顯著降低(P0.01)。補腎高低劑量組之間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3各組卵巢組織MDA含量的比較補腎高、低劑量組與正常組卵巢組織MDA含量比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組MDA含量明顯高于正常組(P0.01);與模型組比較,補腎高、低劑量組及正常組MDA含量明顯降低(P0.01);補腎高、低劑量組之間比較,差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4各組卵巢組織SOD活力的比較補腎高、低劑量組卵巢組織SOD活力與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組SOD活力較正常組明顯降低(P0.01);與模型組比較,補腎高、低劑量組及正常組SOD活力明顯升高(P0.01);且補腎高、低劑量組SOD活力差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),補腎高劑量組SOD活力更高。5各組卵巢組織GSH-Px活力的比較補腎高、低劑量組卵巢組織GSH-Px活力與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組GSH-Px活力較正常組顯著降低(P0.01);與模型組比較,補腎高、低劑量組及正常組GSH-Px活力顯著增高(P0.01);補腎高、低劑量組之間比較,差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6各組卵巢組織T-AOC比較補腎高低劑量組卵巢組織T-AOC水平與正常組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組T-AOC較正常組顯著降低(P0.01);與模型組比較,補腎高、低劑量組及正常組T-AOC增高(P0.05)。補腎高低劑量組之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。小結(jié):1重復(fù)COS會提高小鼠卵巢組織核酸、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)的氧化損傷水平,影響小鼠卵巢中抗氧化酶的活性,造成小鼠卵巢組織的氧化應(yīng)激狀態(tài)。2補腎調(diào)經(jīng)方能夠降低重復(fù)COS小鼠卵巢組織的核酸、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)的氧化損傷標(biāo)志物水平,提高小鼠卵巢組織抗氧化酶的活性,有助于消除重復(fù)COS對小鼠卵巢組織造成的氧化應(yīng)激狀態(tài),糾正卵巢氧化/抗氧化失衡,調(diào)節(jié)機體至“陰平陽秘”狀態(tài)。3重復(fù)COS可能通過影響卵巢組織氧化應(yīng)激狀態(tài)進而影響卵母細(xì)胞發(fā)育,降低卵母細(xì)胞質(zhì)量。補腎調(diào)經(jīng)方可通過糾正卵巢氧化應(yīng)激狀態(tài),以改善卵母細(xì)胞質(zhì)量。其機制有待進一步研究。第二部分補腎法對重復(fù)COS小鼠卵母細(xì)胞線粒體功能的影響目的:研究重復(fù)COS對小鼠卵母細(xì)胞ROS量及線粒體功能的影響,并觀察補腎調(diào)經(jīng)方對重復(fù)COS小鼠卵母細(xì)胞線粒體功能的作用。方法:將48只8-10周齡健康清潔級雌性昆明小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后,每天早9:00陰道涂片觀察動情周期,隨機分為4組,補腎高劑量組、補腎低劑量組、模型組及空白組,每組各12只。模型組及補腎高、低劑量組每日上午9:00分別灌胃蒸餾水及補腎調(diào)經(jīng)方,1m L/100g體重,連續(xù)10天。模型組及補腎各組于第11日同時腹腔注射PMSG 10IU/只,48小時后腹腔注射h CG 10IU/只�？瞻捉M每日陰道圖片觀察動情周期。重復(fù)以上過程3周期,每周期間隔4天。模型組及補腎高、低劑量組小鼠在超促排卵第3周期注射HCG后14-16h,空白組于觀察到動情期后12h,脫頸椎處死小鼠,剪開腹壁,充分暴露后取出輸卵管,在PBS中清洗去血液,將輸卵管置于M16培養(yǎng)液中,用1m L注射器針頭劃破輸卵管膨大處,卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物(COCs)溢出,透明質(zhì)酸酶消化,去除顆粒細(xì)胞后收集于無菌Ep管中,一部分液氮凍存檢測ROS水平;一部分立即送染色,激光共聚焦顯微鏡檢測線粒體功能。采用DCFH-DA染色,共聚焦顯微鏡觀察ROS水平;采用Mito Tracker Red染色,共聚焦顯微鏡觀察卵母細(xì)胞線粒體分布;采用熒光素酶法檢測卵母細(xì)胞ATP量;采用JC-1染色,共聚焦顯微鏡觀察卵母細(xì)胞膜電位(MMP);實時熒光定量PCR檢測卵母細(xì)胞mt DNA拷貝數(shù)。結(jié)果:1各組卵母細(xì)胞ROS水平的比較與正常組卵母細(xì)胞ROS水平比較,補腎高、低劑量組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組卵母細(xì)胞ROS水平較正常組顯著升高(P0.01);與模型組卵母細(xì)胞ROS水平比較,補腎高、低劑量組均降低,其中補腎高劑量組降低顯著(P0.01);補腎高、低劑量組間比較,高劑量組ROS水平較低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2各組卵母細(xì)胞mt DNA拷貝數(shù)比較與正常組比較,補腎高、低劑量組卵母細(xì)胞mt DNA拷貝數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組mt DNA拷貝數(shù)較正常組顯著降低(P0.01);與模型組比較,補腎高劑量組mt DNA明顯升高(P0.01),補腎低劑量組及正常組mt DNA升高(P0.05);補腎高低劑量組之間比較,卵母細(xì)胞mt DNA拷貝數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3各組卵母細(xì)胞ATP含量比較與正常組比較,補腎高、低劑量組卵母細(xì)胞ATP含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組ATP含量較正常組下降(P0.05);與模型組比較,補腎高劑量組ATP含量升高明顯(P0.01),補腎低劑量組及正常組ATP含量升高(P0.05);補腎高、低劑量組之間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4各組卵母細(xì)胞MMP強度的比較與正常組比較,補腎高、低劑量組卵母細(xì)胞MMP平均強度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),模型組MMP平均強度較正常組明顯降低,(P0.01);與模型組比較,補腎低劑量組MMP強度升高(P0.05),補腎高劑量組及正常組MMP平均強度明顯增高,差異具有顯著性(P0.01);補腎高劑量組MMP平均強度高于低劑量組(P0.05)。5各組卵母細(xì)胞線粒體分布補腎高/低劑量組、模型組及正常組卵母細(xì)胞線粒體均勻分布的比率分別為79.2%,73.9%,69%及80.9%。卡方檢驗結(jié)果顯示,補腎高/低劑量組及正常組線粒體均勻分布比率均高于模型組,但四組之間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。小結(jié):1重復(fù)COS會影響卵母細(xì)胞ROS水平、線粒體mt DNA拷貝數(shù)及MMP強度,影響卵母細(xì)胞ATP的水平,降低卵母細(xì)胞質(zhì)量。2補腎調(diào)經(jīng)方能夠降低重復(fù)COS后卵母細(xì)胞ROS水平,提高重復(fù)COS后卵母細(xì)胞線粒體mt DNA拷貝數(shù)、MMP強度及其ATP水平,改善重復(fù)COS后卵母細(xì)胞質(zhì)量,且高劑量補腎調(diào)經(jīng)方改善線粒體MMP強度的效果更優(yōu)。3補腎調(diào)經(jīng)方能夠提高重復(fù)COS后卵母細(xì)胞質(zhì)量與其改善卵母細(xì)胞線粒體功能有關(guān),可作為治療臨床重復(fù)COS后卵母細(xì)胞質(zhì)量下降的輔助用藥。第三部分體外培養(yǎng)小鼠卵母細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化及補腎法對體外培養(yǎng)氧化應(yīng)激狀態(tài)卵母細(xì)胞ROS水平及PB1排出率的影響目的:研究體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞發(fā)育過程中卵母細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,添加氧化劑H_2O_2對卵母細(xì)胞ROS水平及PB1排出率的影響,并觀察補腎調(diào)經(jīng)方對上述指標(biāo)的影響。方法:選用8只6-7周齡健康雌性SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)后每日灌胃補腎調(diào)經(jīng)方2次,1m L/200g體重(相當(dāng)于臨床等效劑量),連續(xù)3天。于第4日禁食12h后,一次性灌服全天劑量。給藥1h后水合氯醛腹腔注射麻醉,股動脈取血。室溫靜置2h后離心,留取血清,56℃水浴30min滅活補體,0.22μm無菌濾器過濾除菌,得到補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清,-80℃保存?zhèn)溆�。選用15只24-26日齡小鼠每只注射PMSG 5IU促排卵,44h后脫頸椎法處死小鼠。消毒后分離完整卵巢,清洗去除血液及多余組織,置于預(yù)熱的M2培養(yǎng)液中,體視顯微鏡下使用注射器針輕柔撕裂卵巢組織,挑破較大有腔卵泡,選擇大小均一、包裹3-5層卵丘細(xì)胞的卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物(COCs),清洗后移入35mm培養(yǎng)皿中,添加2m L IVM培養(yǎng)液(α-MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+100m IU/m L r FSH+1.5 U/m Lh CG+3ng/m L EGF+100IU/rn L青霉素+100μg/m L鏈霉素)。培養(yǎng)皿置于37℃、5%CO2、100%濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。將收集的卵母細(xì)胞隨機分為3組分別培養(yǎng)。(1)正常組:IVM培養(yǎng)液培養(yǎng)至14-16h;(2)補腎組:IVM培養(yǎng)液添加10%補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清培養(yǎng)2h,再給予H_2O_2,繼續(xù)培養(yǎng)至14-16h;(3)H_2O_2組:IVM培養(yǎng)液培養(yǎng)2h,添加100μM濃度H_2O_2,培養(yǎng)至14-16h。倒置顯微鏡觀察COCs發(fā)育過程中形態(tài)學(xué)變化。將COCs置于吹打消化,脫去顆粒細(xì)胞后倒置顯微鏡下統(tǒng)計PB1排出率。DCFH-DA染料染色,共聚焦顯微鏡觀察ROS水平。結(jié)果:1卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物在IVM培養(yǎng)過程中形態(tài)學(xué)變化GV期COCs中,卵母細(xì)胞可見透明帶,卵母細(xì)胞周圍可見多層、致密卵丘細(xì)胞包裹。IVM 16-18h后,COCs體積增大,卵丘擴張生長并且結(jié)構(gòu)松散,中間可見卵母細(xì)胞輪廓。100U/m L透明質(zhì)酸酶消化培養(yǎng)后的COCs,移液器吹打消化,MⅠ期卵母細(xì)胞無第一極體排出,MⅡ期卵母細(xì)胞可見明顯卵周間隙,卵周間隙可見第一極體。2各組間卵母細(xì)胞ROS水平比較與正常組比較,補腎調(diào)經(jīng)方組ROS水平的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),H_2O_2組較正常組ROS水平顯著升高(P0.01);補腎調(diào)經(jīng)方與H_2O_2組比較,卵母細(xì)胞ROS水平顯著降低(P0.01)。3各組間卵母細(xì)胞PB1排出率的比較統(tǒng)計結(jié)果顯示,與正常組比較,卵母細(xì)胞PB1排出率補腎調(diào)經(jīng)方組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),H_2O_2組卵母細(xì)胞PB1排出率較正常組顯著降低(P0.01);補腎調(diào)經(jīng)方組與H_2O_2組比較,卵母細(xì)胞PB1排出率顯著增高(P0.01)。小結(jié):1在體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞培養(yǎng)液中添加H_2O_2可引起卵母細(xì)胞中ROS增加,PB1排出率降低,造成卵母細(xì)胞氧化應(yīng)激模型。2體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞培養(yǎng)液中添加補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清可降低H_2O_2引起的卵母細(xì)胞內(nèi)ROS的堆積,提高卵母細(xì)胞PB1排出率,提示補腎調(diào)經(jīng)方具有改善卵母細(xì)胞氧化應(yīng)激狀態(tài),提高卵母細(xì)胞成熟率的作用。第四部分補腎調(diào)經(jīng)方對體外培養(yǎng)小鼠卵母細(xì)胞氧化應(yīng)激初期Nrf2抗氧化應(yīng)激通路的影響目的:研究體外培養(yǎng)小鼠卵母細(xì)胞氧化應(yīng)激初期對Nrf2信號通路及下游抗氧化酶的影響,及添加補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清培養(yǎng)對氧化應(yīng)激初期卵母細(xì)胞Nrf2信號通路及下游抗氧化酶的影響。方法:選用24只6-7周齡健康雌性SD大鼠,制備補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清,方法同第三部分。選用60只24-26日齡昆明小鼠,機械法分離GV期卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物,方法同第三部分。將收集的卵母細(xì)胞隨機分為3組分別培養(yǎng)。(1)正常組:IVM培養(yǎng)液培養(yǎng)6小時;(2)補腎組:IVM培養(yǎng)液添加10%補腎調(diào)經(jīng)方含藥血清培養(yǎng)4h,再給予H_2O_2,繼續(xù)培養(yǎng)至6h;(3)H_2O_2組:IVM培養(yǎng)液培養(yǎng)4h,添加100μM濃度H_2O_2,培養(yǎng)至6h。收集COCs,100U/m L透明質(zhì)酸酶中,吹打消化,脫去顆粒細(xì)胞,收集后一部分立即行免疫熒光檢測;一部分-80℃凍存用于RT-PCR檢測。結(jié)果:1各組體外培養(yǎng)小鼠卵母細(xì)胞中PKC、Keap1、Nrf2、SOD、GSH-PxmRNA的比較1.1各組卵母細(xì)胞中PKC、Keap1、Nrf2 mRNA含量的比較PKC mRNA表達:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組PKC mRNA表達均顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組PKC mRNA表達顯著升高(P0.01)。Keap1 mRNA表達:正常組、H_2O_2組及補腎組之間Keap1 mRNA表達比較,差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Nrf2 mRNA表達:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組Nrf2 mRNA表達顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組Nrf2 mRNA表達升高(P0.05)。1.2各組卵母細(xì)胞中Mn SOD及GSH-Px mRNA含量的比較Mn SOD mRNA表達:與正常組比較,H_2O_2組Mn SOD mRNA表達升高(P0.05),補腎組表達顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組Mn SOD mRNA表達顯著升高(P0.01)。GSH-Px mRNA表達:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組GSH-Px mRNA表達均顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組GSH-Px mRNA表達顯著升高(P0.01)。2各組體外培養(yǎng)小鼠卵母細(xì)胞中PKC、p-PKC、Keap1、Nrf2、p-Nrf2蛋白表達的比較PKC蛋白表達:各組之間卵母細(xì)胞中PKC蛋白表達差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);p-PKC蛋白表達:與正常組比較,H_2O_2組p-PKC蛋白表達升高(P0.05),補腎組表達顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組p-PKC蛋白表達顯著升高(P0.01)。p-PKC/PKC表達:與正常組比較,H_2O_2組升高(P0.05),補腎組顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組顯著升高(P0.01)。Keap1蛋白表達:各組之間卵母細(xì)胞中Keap1蛋白表達差異均不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。Nrf2蛋白表達:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組Nrf2蛋白表達均升高(P0.05);H_2O_2組與補腎組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。p-Nrf2蛋白表達:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組p-Nrf2蛋白表達顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組p-Nrf2蛋白表達顯著升高(P0.01)。p-Nrf2/Nrf2比值:與正常組比較,H_2O_2組及補腎組p-Nrf2/Nrf2比值顯著升高(P0.01);與H_2O_2組比較,補腎組p-Nrf2/Nrf2顯著升高(P0.01)。小結(jié):1氧化應(yīng)激可激活Nrf2信號通路,引起Nrf2 mRNA表達增加,及其下游抗氧化酶Mn SOD、GSH-Px的基因轉(zhuǎn)錄。2氧化應(yīng)激初期Nrf2蛋白活性升高與Keap1表達水平無明顯關(guān)系,可能與PKC提高Nrf2磷酸化水平,使其自Keap1解離有關(guān)。3補腎調(diào)經(jīng)方能夠減少氧化應(yīng)激后卵母細(xì)胞ROS水平,其機制可能與其調(diào)控氧化應(yīng)激初期PKC-Nrf2信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo),提高下游抗氧化酶基因轉(zhuǎn)錄有關(guān)。結(jié)論:重復(fù)控制性卵巢刺激會引起卵巢抗氧化能力下降,抗氧化酶活性降低,氧化損傷產(chǎn)物增多,并影響卵母細(xì)胞線粒體功能,降低卵母細(xì)胞質(zhì)量。補腎法能夠改善重復(fù)COS后卵巢抗氧化能力,提高抗氧化酶活性,減少卵巢氧化損傷,并能夠改善卵母細(xì)胞線粒體功能,其機制可能是通過使卵母細(xì)胞內(nèi)PKC表達升高,激活Nrf2基因轉(zhuǎn)錄,提高Nrf2蛋白活性,誘導(dǎo)Nrf2信號通路下游抗氧化酶基因表達,提高卵母細(xì)胞抗氧化能力,發(fā)揮其改善卵母細(xì)胞質(zhì)量的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R711.6

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 董金嬋;氚對小鼠卵巢的效應(yīng):殺死卵母細(xì)胞、生殖力降低和遺傳學(xué)的損傷[J];國外醫(yī)學(xué)(放射醫(yī)學(xué)分冊);1986年01期

2 王磊;邵小光;司遠彬;;卵母細(xì)胞成熟障礙4例與同期卵母細(xì)胞大部分不成熟患者比較分析[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2013年12期

3 張玲,朱桂金;卵母細(xì)胞的成熟抑制與發(fā)育潛力[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

4 Borini A ,Bonu M.A ,Coticchio G ,陳媛媛;卵母細(xì)胞低溫貯藏后的妊娠與分娩[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(婦產(chǎn)科學(xué)分冊);2005年05期

5 劉姍;李媛;高選;楊慧軍;顏軍昊;陳子江;;人卵母細(xì)胞體外成熟前后線粒體分布的變化[J];解剖學(xué)報;2007年05期

6 張紅琴;劉思瑤;黃軍;孟祥黔;艾玲;雷婉秋;鐘影;;冷凍載體濃度對復(fù)蘇卵母細(xì)胞存活率的影響及蔗糖[J];癌變·畸變·突變;2012年06期

7 楊琨;張云山;;卵母細(xì)胞捐贈相關(guān)問題及倫理爭論[J];生殖醫(yī)學(xué)雜志;2013年09期

8 董麗瑋;;人類卵母細(xì)胞冷凍現(xiàn)狀的研究進展[J];實用醫(yī)技雜志;2014年03期

9 魯棟梁,陳在賢;人類卵母細(xì)胞冷凍的研究進展[J];川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年03期

10 董云玲;劉永潔;李娟;;冷凍保存對卵母細(xì)胞影響的研究進展[J];國際生殖健康/計劃生育雜志;2008年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李向臣;姚雅馨;趙倩君;浦亞斌;王義鵬;關(guān)偉軍;馬月輝;;玻璃化冷凍對卵母細(xì)胞紡錘體分布的影響[A];第十二次全國畜禽遺傳標(biāo)記研討會論文集[C];2010年

2 戴建軍;吳彩鳳;張廷宇;張樹山;徐利;張德福;;三種冷凍方法對豬MⅡ期卵母細(xì)胞線粒體分布和損傷的影響[A];上海市制冷學(xué)會2013年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

3 劉姍;陳子江;李媛;高選;楊慧軍;顏軍昊;;線粒體分布變化與人卵母細(xì)胞體外成熟的關(guān)系初探[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)分會、中國動物學(xué)會生殖生物學(xué)分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

4 王磊;司遠彬;邵小光;;卵母細(xì)胞成熟障礙患者分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會議婦科內(nèi)分泌會場（婦科內(nèi)分泌學(xué)組、絕經(jīng)學(xué)組、計劃生育學(xué)組）論文匯編[C];2012年

5 王實;樸海仙;吳俊波;金一;;卵母細(xì)胞凋亡途徑及調(diào)控因子的研究現(xiàn)狀[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物繁殖學(xué)分會第十五屆學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2010年

6 王松波;寧剛;陳秀芬;歐陽宏;夏國良;;磷酸二脂酶5(PDE5)抑制劑zaprinast對小鼠卵母細(xì)胞自發(fā)成熟的影響[A];全國動物生理生化第九次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2006年

7 金帆;;卵母細(xì)胞的體外成熟[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會第八次學(xué)術(shù)年會暨國家級繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

8 金帆;;卵母細(xì)胞的體外成熟[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會第七次學(xué)術(shù)年會暨國家級繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2007年

9 禹學(xué)禮;栗穎華;鄧雯;孟雨;;牛腔前卵泡卵母細(xì)胞體外受精研究[A];河南省畜牧獸醫(yī)學(xué)會第七屆理事會第二次會議暨2008年學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

10 史中娜;陳雯;;卵母細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)空泡對胚胎發(fā)育的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國生殖醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議�？痆C];2012年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 記者 劉霞;美實驗證實人類存在卵原干細(xì)胞[N];科技日報;2012年

2 記者 許琦敏;出生后卵母細(xì)胞還能不斷產(chǎn)生[N];文匯報;2009年

3 楊淑娟;美發(fā)現(xiàn)近期骨髓細(xì)胞不能形成卵母細(xì)胞[N];中國醫(yī)藥報;2006年

4 美訊;使用冷凍卵母細(xì)胞可能降低體外受精成功率[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

5 記者 何德功;日本用卵母細(xì)胞成功培育出幼鼠[N];新華每日電訊;2004年

6 記者 劉霞;雌性老鼠出生后仍產(chǎn)卵母細(xì)胞[N];科技日報;2009年

7 ;人卵母細(xì)胞的低溫貯藏[N];中國醫(yī)藥報;2003年

8 記者 王丹 通訊員 魏書明 仰東萍;單個卵母細(xì)胞高精度全基因測序完成[N];健康報;2013年

9 付東紅 馬鳳琴;我國第一個“三凍”男嬰誕生[N];健康報;2006年

10 劉濤 董奇光;我省成功實施首例凍融卵母細(xì)胞試管嬰兒手術(shù)[N];太原日報;2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉雪青;LH誘導(dǎo)小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)過程中相關(guān)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

2 劉帥;豬卵胞質(zhì)注射及單精子胞質(zhì)內(nèi)注射介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因方法研究[D];廣西大學(xué);2015年

3 任亮;豬MⅡ期卵母細(xì)胞玻璃化冷凍的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 馬汝鈞;Rab蛋白在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 劉美菊;白藜蘆醇在高齡小鼠和人卵母細(xì)胞成熟中的作用研究[D];山東大學(xué);2016年

6 焦光忠;提高體外成熟卵母細(xì)胞質(zhì)量研究：抑制GVBD的后作用及體外成熟系統(tǒng)優(yōu)化[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 余超;卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組的調(diào)節(jié)及其在卵泡存活和早期胚胎發(fā)育中的作用[D];浙江大學(xué);2016年

8 劉偉;雌激素受體調(diào)控哺乳動物卵母細(xì)胞第一次減數(shù)分裂進程的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

9 張晨曦;MDM2-p53信號通路在卵泡的存活和發(fā)育過程中的作用研究[D];南京大學(xué);2016年

10 張亮;SIRTUINS在哺乳動物卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周洪彬;卵母細(xì)胞成熟抑制劑對豬卵母細(xì)胞成熟的影響[D];西南大學(xué);2006年

2 盧曉麗;鎘抑制卵母細(xì)胞MI期進程中MPF的活性及其相關(guān)基因的表達[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 沈江鵬;不同形態(tài)卵母細(xì)胞與不同濃度精子組合對受精及早期胚胎發(fā)育的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

4 張光利;小鼠死后滯留對卵巢卵母細(xì)胞存活與成熟的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

5 程立立;卵母細(xì)胞分泌因子在人MⅡ卵母細(xì)胞的卵丘顆粒細(xì)胞中的表達及其與卵母細(xì)胞發(fā)育潛能關(guān)系的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 岑文;豬卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)及孤雌胚胎體外培養(yǎng)的研究[D];陜西師范大學(xué);2015年

7 邵麗;卵母細(xì)胞體外成熟過程中卵丘細(xì)胞上基因表達譜變化及其生物學(xué)意義[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

8 木爾扎提·阿勒騰別克;綿羊磷脂酶C zeta(PLCζ)對綿羊卵母細(xì)胞的激活作用及早期胚胎發(fā)育的影響[D];石河子大學(xué);2015年

9 林秀嬌;Nlrp9b在小鼠早期胚胎發(fā)育中的表達、定位及功能[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

10 楊波;組蛋白變異體H2A.X在卵母細(xì)胞裂解液逆轉(zhuǎn)化小鼠胎兒成纖維細(xì)胞(MEFs)成為誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPSC)中的作用研究[D];西南大學(xué);2016年

，

本文編號：1487921