本文關(guān)鍵詞：尖葉假龍膽與烏腺金絲桃配伍對人肺癌A549細(xì)胞影響及其作用機制的研究

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【摘要】：目的觀察尖葉假龍膽與烏腺金絲桃配伍對人肺癌A549細(xì)胞的作用及其相關(guān)機制。方法制備含藥血清,體外培養(yǎng)人肺癌A549細(xì)胞。實驗分為空白組、尖葉假龍膽組、烏腺金絲桃組、尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組、尖葉假龍膽與烏腺金絲桃1:2配伍組、尖葉假龍膽與烏腺金絲桃1:1配伍組及陽性藥組(5-FU)。應(yīng)用MTT法檢測各組含藥血清對人肺癌A549細(xì)胞增殖的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組含藥血清對人肺癌A549細(xì)胞凋亡率的影響;應(yīng)用RT-PCR法檢測人肺癌 A549細(xì)胞內(nèi) FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Bcl-2mRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表達(dá)的變化;Western Blot方法檢測人肺癌A549細(xì)胞內(nèi)Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Bcl-2、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果1.MTT法檢測結(jié)果顯示,與空白組比較,各藥物組含藥血清均可顯著抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖,并具有時間-效應(yīng)關(guān)系;與尖葉假龍膽組及烏腺金絲桃組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖作用最強。2.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示,與空白組比較,各藥物組含藥血清均可明顯誘導(dǎo)人肺癌A549細(xì)胞凋亡;與尖葉假龍膽組及烏腺金絲桃組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組誘導(dǎo)人肺癌A549細(xì)胞凋亡作用最強。3.RT-PCR結(jié)果顯示,與空白組比較,各藥物組含藥血清均可明顯的上調(diào) FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表達(dá)并下調(diào) Bcl-2mRNA表達(dá);與尖葉假龍膽組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組可明顯的上調(diào)FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及Caspase-9mRNA表達(dá)并下調(diào)Bcl-2mRNA表達(dá);與烏腺金絲桃組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組可明顯的上調(diào)FasmRNA、Fas1mRNA、Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA、BaxmRNA、Cyt-cmRNA及 Caspase-9mRNA表達(dá)并下調(diào) BcI-2mRNA表達(dá);尖葉假龍膽與烏腺金絲桃1:1配伍組可明顯的上調(diào)Caspase-9mRNA及上調(diào) Caspase-3mRNA表達(dá)。4.Western Blot檢測結(jié)果顯示,與空白組比較,各藥物組含藥血清均可明顯的上調(diào)Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表達(dá)并下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá);與尖葉假龍膽組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組可明顯的上調(diào)Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及Active Caspase-9蛋白表達(dá)并下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá);與烏腺金絲桃組比較,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組可明顯的上調(diào)Fas、Fas1、Active Caspase-8、Active Caspase-3、Bax、Cyt-c及 Active Caspase-9蛋白表達(dá)并下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá);尖葉假龍膽與烏腺金絲桃1:1配伍組可上調(diào) Active Caspase-9及Active Caspase-3蛋白表達(dá)。結(jié)論1.各藥物組含藥血清可抑制人肺癌A549細(xì)胞增殖,能誘導(dǎo)其凋亡,尖葉假龍膽與烏腺金絲桃2:1配伍組作用效果最強。2.各藥物組含藥血清誘導(dǎo)人肺癌A549細(xì)胞凋亡作用的機制與死亡受體及線粒體信號傳導(dǎo)通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285

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本文編號：1282551