本文關(guān)鍵詞：USF1調(diào)控TGFβ信號(hào)通路對(duì)黑色素瘤發(fā)生發(fā)展的影響

  更多相關(guān)文章： 黑色素瘤 1205-Lu細(xì)胞 上游刺激因子1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 遷移

【摘要】：背景:上游刺激因子1(USF1)是一種多功能的轉(zhuǎn)錄因子,在真核生物中廣泛表達(dá),它在糖脂代謝,細(xì)胞增殖以及黑素沉積中均起重要作用。近來研究發(fā)現(xiàn)它可以激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β信號(hào)通路。而轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β信號(hào)通路與黑色素瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力有密切關(guān)系。但是,USF1在黑色素瘤中的作用不詳。目的:探討USF1在黑色素瘤中的表達(dá)以及USF1對(duì)黑色素瘤發(fā)生發(fā)展的影響及其機(jī)制。方法:采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)檢測(cè)USF1在正常人黑素細(xì)胞PIG1和黑色素瘤細(xì)胞1205-Lu、DO4、WM3211、WM278中的表達(dá)情況;高倍光學(xué)顯微鏡觀察在轉(zhuǎn)染USF1后的1205-Lu細(xì)胞形態(tài)變化;細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染USF1對(duì)1205-Lu細(xì)胞遷移的影響;為分析轉(zhuǎn)染USF1對(duì)1205-Lu細(xì)胞上皮間質(zhì)化的影響,采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)和Western blotting技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染USF1后1205-Lu細(xì)胞E-cad、α-SMA、Vi和FN表達(dá)情況;為進(jìn)一步分析USF1對(duì)黑色素瘤發(fā)生發(fā)展的影響,采用qRT-PCR和Western blotting檢測(cè)轉(zhuǎn)染USF1后1205-Lu細(xì)胞中(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β)TGF-β、Smad2和α-SMA表達(dá)情況,以及si RNA干擾USF1后1205-Lu細(xì)胞中TGF-β、Smad2和α-SMA表達(dá)情況;最后采用Western blotting檢測(cè)單獨(dú)或聯(lián)合轉(zhuǎn)染si-RNA和TGF-β后1205-Lu細(xì)胞中Smad2、E-cad、α-SMA、Vi和FN的表達(dá)情況,以及高倍光學(xué)顯微鏡觀察在單獨(dú)或聯(lián)合轉(zhuǎn)染si-RNA和TGF-β后的1205-Lu細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果:(1)USF1在1205-Lu、DO4、WM3211和WM278細(xì)胞的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯高于PIG1細(xì)胞,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。其中USF1在1205-Lu細(xì)胞中的表達(dá)量最高。(2)在轉(zhuǎn)染USF1后,1205-Lu細(xì)胞形態(tài)變長(zhǎng),呈梭狀,與對(duì)照組相比變化明顯。同時(shí)在轉(zhuǎn)染USF1后,1205-Lu細(xì)胞遷移能力與對(duì)照組相比明顯增強(qiáng)。(3)在1205-Lu細(xì)胞轉(zhuǎn)染USF1 48小時(shí)后,α-SMA、Vi和FN的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯高于未轉(zhuǎn)染USF1的對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。E-cad在1205-Lu細(xì)胞轉(zhuǎn)染USF1 48小時(shí)后的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯低于未轉(zhuǎn)染USF1的對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(4)在1205-Lu細(xì)胞轉(zhuǎn)染USF1 48小時(shí)后,TGF-β、Smad2和α-SMA的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯高于未轉(zhuǎn)染USF1的對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。同時(shí)在1205-Lu細(xì)胞轉(zhuǎn)染si-USF1 48小時(shí)后,USF1、TGF-β、Smad2和α-SMA的m RNA和蛋白相對(duì)表達(dá)量均顯著低于未轉(zhuǎn)染si-USF1的對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。(5)采用si RNA干擾USF1 48小時(shí)后,Smad2、α-SMA和FN的表達(dá)明顯低于未轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ的對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05);在轉(zhuǎn)染TGFβ48小時(shí)后,Smad2、α-SMA、Vi和FN的表達(dá)明顯高于未轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ的對(duì)照組和轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05);同時(shí)在轉(zhuǎn)染TGFβ組中E-cad的表達(dá)明顯低于未轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ的對(duì)照組和轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。在轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ48小時(shí)后,Smad2、E-cad、α-SMA、Vi和FN表達(dá)和未轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ組比較無明顯差異(P0.05)�！�6在轉(zhuǎn)染TGFβ后,1205-Lu細(xì)胞形態(tài)變長(zhǎng),呈梭狀,與未轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ的對(duì)照組和轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ組相比變化明顯,而轉(zhuǎn)染si-USF1和TGFβ后,能夠明顯逆轉(zhuǎn)TGFβ誘導(dǎo)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。結(jié)論:USF1在黑色素瘤細(xì)胞中存在明顯高表達(dá),同時(shí)USF1能夠通過激活TGFβ信號(hào)通路促進(jìn)黑色素瘤細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和遷移,USF1可能成為一個(gè)新的黑色素瘤治療靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R739.5

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊芳;連續(xù)拍照能及早發(fā)現(xiàn)黑色素瘤[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).護(hù)理學(xué)分冊(cè);2000年02期

2 紀(jì)小龍,徐薪,申明識(shí);黏膜黑色素瘤的常見臨床病理特點(diǎn)[J];診斷病理學(xué)雜志;2002年02期

3 李凌,徐慶中;黑色素瘤高頻超聲表現(xiàn)1例[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2002年09期

4 陳燁 ,劉敏賢 ,安秀珍 ,林昌萬 ,姜影;淚囊黑色素瘤1例報(bào)告[J];吉林醫(yī)學(xué);2003年01期

5 蔡振鑫;黑色素瘤:預(yù)測(cè)致死性特征的30年臨床經(jīng)驗(yàn)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊(cè);2004年02期

6 Helsing P.,Loeb M. ,馮義國(guó);小直徑黑色素瘤:挪威黑色素瘤隨訪項(xiàng)目[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊(cè));2005年04期

7 Murray C.S.;Stockton D.L.;Doherty V.R. ;黨倩麗;;增厚的黑色素瘤:長(zhǎng)久面對(duì)的挑戰(zhàn)[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊(cè));2005年08期

8 High W.A. ,Quirey R.A. ,Guillén D.R ,R.S. Taylor,劉超;7例甲單元原位黑色素瘤的臨床表現(xiàn)、組織病理和臨床預(yù)后[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊(cè));2005年02期

9 Curtin J.A.;Fridlyand J.;Kageshita T. ;B.C. Bastian;黨倩麗;;黑色素瘤不同位置的基因改變[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊(cè));2006年02期

10 Blaise S.;Rumeau-Trividic M.;Le Brun V.;周少娜;;黑色素瘤伴亞急性原發(fā)性纖維蛋白溶解[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(皮膚病學(xué)分冊(cè));2006年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李東;謝遵江;賀業(yè)春;劉穎;劉麗;;在黑色素瘤組織中免疫細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第八屆組織學(xué)與胚胎學(xué)專業(yè)青年研討會(huì)論文集[C];2004年

2 安菊生;吳令英;李寧;俞高志;劉麗影;;原發(fā)女性生殖道黑色素瘤42例臨床分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)婦科腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 陳陸霞;孫保存;張?jiān)娢?賀忠江;;眼內(nèi)移植性黑色素瘤微循環(huán)模式的初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

4 楊志濤;陸洪光;;死亡受體和黑色素瘤的抗凋亡作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

5 鐘傳華;楊文治;王曉蘭;;黑色素瘤與痔診治失誤的啟迪[A];2012醫(yī)學(xué)前沿——中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)肛腸分會(huì)第十四次全國(guó)肛腸學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文精選[C];2012年

6 郭軍;;黑色素瘤最新進(jìn)展和未來趨勢(shì)[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

7 孫保存;張?jiān)娢?劉志勇;張丹芳;郭華;;多西環(huán)素影響黑色素瘤微循環(huán)模式的形成[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

8 郭偉;;口腔頜面-頭頸黏膜黑色素瘤的個(gè)體化診治與思考[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

9 孫保存;張丹芳;張?jiān)娢?郭華;張文治;趙秀蘭;;缺血缺氧對(duì)黑色素瘤局部浸潤(rùn)的相關(guān)分子機(jī)制影響的初步研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

10 唐亮;;手術(shù)治療足跟底部皮膚黑色素瘤6例臨床分析[A];2013年全國(guó)激光醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)聯(lián)合會(huì)議暨2013年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)整形美容學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王倫邋王晨;早期發(fā)現(xiàn)黑色素瘤可挽救生命[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

2 倪方;黑色素瘤早治療可痊愈（三）[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2008年

3 健康時(shí)報(bào)特約記者 管九蘋;澳大利亞免費(fèi)普查黑色素瘤[N];健康時(shí)報(bào);2010年

4 實(shí)習(xí)生 易立;黑色素瘤,是否無藥可治？[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

5 記者 張e，

本文編號(hào)：1260058