本文關(guān)鍵詞：磷酸鈣與聚甲基丙烯酸甲酯制備復(fù)合型骨水泥的生物學(xué)研究

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【摘要】：研究背景21世紀(jì)進(jìn)行組織修復(fù)的最佳方式是利用組織工程學(xué)材料短期內(nèi)替代自身受損或缺損的組織,待機(jī)體自身組織細(xì)胞增殖或再生后重新獲得修復(fù)。臨床治療過(guò)程中發(fā)現(xiàn)：創(chuàng)傷骨折、骨組織感染壞死、骨腫瘤、骨質(zhì)疏松、椎體壓縮性骨折等疾病術(shù)前或術(shù)后常常合并骨缺損,而臨床的最終治療目的是盡可能的恢復(fù)骨組織的結(jié)構(gòu)、填補(bǔ)骨缺損從而保證機(jī)體的運(yùn)動(dòng)功能。以往的臨床治療經(jīng)驗(yàn)表明：自體骨移植是治療骨缺損的金標(biāo)準(zhǔn),因?yàn)樽泽w骨不僅具有骨傳導(dǎo)性、還具有骨誘導(dǎo)性和成骨活性,但是對(duì)于長(zhǎng)段骨缺損的患者來(lái)說(shuō),單純依靠自身骨組織再生來(lái)獲得長(zhǎng)段骨缺損的修復(fù)是十分困難的,因?yàn)閬?lái)源有限,即便是采取自體骨移植,也存在“拆東墻、補(bǔ)西墻”的問(wèn)題,也容易造成患者機(jī)體的二次損傷和再發(fā)感染、血腫、神經(jīng)損傷等并發(fā)癥,給患者帶來(lái)巨大的軀體和精神上的痛苦。當(dāng)然,還有同種異體骨移植法,雖然異體骨來(lái)源較為廣泛,但免疫原性和致病性等問(wèn)題一直是醫(yī)療界公認(rèn)的難題,故同種異體骨也不是骨組織缺損最理想的修復(fù)材料。近年來(lái),生物醫(yī)學(xué)工程所提出的骨生物材料得到飛快發(fā)展,其理念為：1.生物安全性良好,對(duì)人體無(wú)害無(wú)毒或低毒無(wú)損害；2.抗壓強(qiáng)度較高,可起到一定的支撐作用；3.具有一定的微孔結(jié)構(gòu),有利于骨細(xì)胞的長(zhǎng)入；4.具有可降解性,隨著機(jī)體骨髓腔結(jié)構(gòu)變化逐步降解被周圍骨質(zhì)所替代；5.具有一定的引導(dǎo)或誘導(dǎo)成骨活性,更利于骨缺損區(qū)域發(fā)揮促成骨作用,彌補(bǔ)骨質(zhì)不良的缺陷；6.材料具有可塑性,可以根據(jù)自身需要滿足不同的移植部位。隨著近幾年學(xué)者們對(duì)人工合成骨材料的廣泛、深入的研究,金屬、生物陶瓷、高分子聚合物、骨水泥等得到臨床較為廣泛的應(yīng)用、效果頗為顯著。為獲得多種材料取長(zhǎng)補(bǔ)短的最佳優(yōu)勢(shì)組合,以達(dá)到完美模擬自體骨在體內(nèi)促進(jìn)成骨的目的,許多學(xué)者將無(wú)機(jī)材料與有機(jī)材料進(jìn)行結(jié)合,制造出各種復(fù)合型骨組織替代材料,最大程度的滿足了機(jī)體骨骼修復(fù)的需求,當(dāng)然這些復(fù)合型骨組織替代材料同樣具備如下條件：1.生物安全性良好；2.材料本身具有一定的微孔結(jié)構(gòu)或材料的顆粒之間具有一定的孔徑距離,有利于骨細(xì)胞的長(zhǎng)入；3.具有可降解性；4.具有一定的引導(dǎo)或誘導(dǎo)成骨活性；5.材料具有一定的可塑性,可以根據(jù)骨缺損部位的空間需要滿足不同的移植需求；6.最大程度的滿足骨材料移植部位的生物力學(xué)強(qiáng)度。因此,本課題研究是尋找一種適合于機(jī)體負(fù)重區(qū)域的骨材料移植,既具有即刻穩(wěn)定性、又具有中長(zhǎng)期穩(wěn)定性,同時(shí)兼?zhèn)洌嚎箟耗芰?qiáng)并具有一定可塑性、具有骨引導(dǎo)活性或骨誘導(dǎo)活性、生物相容性好的多重功能的骨組織生物材料,結(jié)合本課題選擇的骨水泥材料磷酸鈣(CPC)和聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA),我們非常希望看到的是CPC和PMMA它們各自的優(yōu)點(diǎn)得到重新組合,獲得新的復(fù)合型骨組織生物材料,復(fù)合后的新型生物材料仍然能夠保持著自身的優(yōu)勢(shì),即CPC：降解速度中等(一般為3-6個(gè)月)、降解產(chǎn)物與骨骼成份相似、與骨骼結(jié)合牢固、具有骨引導(dǎo)活性、可載入抗生素藥物和相關(guān)活性因子成份或活性抑制因子成份。當(dāng)然,目前臨床上對(duì)硫酸鈣(CaS)的應(yīng)用也非常廣泛,本課題之所以不選取CaS作為復(fù)合型骨水泥的復(fù)合成份之一,是因?yàn)榕cCPC相比,CaS骨水泥降解過(guò)快(一般為1-3個(gè)月)、機(jī)械抗壓強(qiáng)度較弱(臨床上多將CaS應(yīng)用于肢體非負(fù)重區(qū)域的骨缺損移植),因此本組實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)之初就選擇了CPC作為該實(shí)驗(yàn)的復(fù)合成份,而PMMA在抗壓強(qiáng)度、抗拉伸強(qiáng)度及抗折強(qiáng)度等生物力學(xué)方面卻具有CPC和CaS都不具備的強(qiáng)大優(yōu)勢(shì),但PMMA終生無(wú)法降解、不利于成骨或新生骨長(zhǎng)入是其缺陷所在。不難看出,CPC、CaS和PMMA作為骨組織植入材料的獨(dú)立個(gè)體,都與達(dá)到最理想狀態(tài)的骨組織生物材料的標(biāo)準(zhǔn)具有一定的差距。我們?cè)O(shè)想：如果能夠?qū)PC和PMMA復(fù)合成功,使復(fù)合型骨水泥(CPC/PMMA)兼顧C(jī)PC和PMMA的獨(dú)立優(yōu)勢(shì),甚至達(dá)到1+12的效果：中等速度降解,與原骨骼結(jié)合牢固、具有骨引導(dǎo)活性并允許新生骨組織的長(zhǎng)入、可載入抗生素和相關(guān)活性因子或活性抑制因子成份進(jìn)入骨缺損區(qū)域或骨組織壞死區(qū)域發(fā)揮作用,且隨著CPC的緩慢降解同時(shí)獲得PMMA強(qiáng)大抗壓、抗拉伸及抗折的力學(xué)性能,滿足機(jī)體負(fù)重區(qū)域或非負(fù)重區(qū)域均可植入該復(fù)合型骨水泥材料以達(dá)到最佳治療模式的需求。目的1.探討磷酸鈣(CPC)和聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)按不同比例混合而制備新型復(fù)合型骨水泥(CPC/PMMA)的方法及生物力學(xué)性能。2.探討復(fù)合型骨水泥材料CPC/PMMA生物安全性、組織相容性。3.探索復(fù)合型骨水泥材料CPC/PMMA移植入SD大鼠脛骨臨界性骨缺損處,觀察測(cè)量其降解及骨缺損修復(fù)情況。4.篩選出CPC/PMMA最佳配比濃度,滿足機(jī)體負(fù)重區(qū)域或非負(fù)重區(qū)域均可植入該復(fù)合型骨水泥材料以達(dá)到最佳治療模式的需要。方法1.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA的制備與分組制備CPC(100%)組、PMMA (100%)組、CPC/PMMA (3/1,75%)組、CPC/PMMA (2/1,67%)組、CPC/PMMA (1/1,50%)組、CPC/PMMA (1/2,33%)組、CPC/PMMA (1/5,16.7%)組、CPC/PMMA (1/10,9.1%)組、CPC/PMMA (1/15,6.25%)組、CPC/PMMA (1/20,4.8%)組骨水泥試件。2.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA生物安全性檢測(cè)2.1細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)2.1.1各組骨水泥浸提液的制備將無(wú)菌條件下制成的CPC、PMMA、CPC+PMMA復(fù)合骨水泥各組：CPC/PMMA (75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA (50%)組、CPC/PMMA(33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA(6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組材料試件分別置于培養(yǎng)基中,3 cm2/ml培養(yǎng)基37℃中120 h,制備CPC、PMMA、復(fù)合骨水泥(CPC+PMMA)各組浸提液。2.1.2成骨前體細(xì)胞(MC3T3-E1,小鼠來(lái)源)的體外培養(yǎng)遵照細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)與原則。2.2全身亞急性毒性實(shí)驗(yàn)本課題相關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,我們都遵循實(shí)驗(yàn)動(dòng)物保護(hù)原則。將雌雄各半的昆明小鼠隨機(jī)分組,體重25g-30g、5只/組,并進(jìn)行標(biāo)記,利用電子天平測(cè)量各組小鼠的體重。各組小鼠按50ml/kg注射骨水泥浸提液(腹腔注射),Control組注射生理鹽水。注射后24h、7d、14d觀察各組小鼠的一般狀態(tài)(皮膚、被毛、眼、粘膜變化)、存活情況(呼吸、循環(huán)、行為等),并測(cè)量體重及組織臟器變化情況。2.3熱源實(shí)驗(yàn)無(wú)菌條件下制備CPC(100%)組、CPC/PMMA (75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA (50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組、PMMA (100%)組浸提液。鼠尾靜脈注射骨水泥浸提液、3m1浸提液/只(對(duì)照組注射生理鹽水)。分別注射后1h、2h、3h、24h測(cè)定SD大鼠的肛溫變化值。每只SD大鼠測(cè)3次取平均值。2.4致敏實(shí)驗(yàn)：于SD大鼠小腿內(nèi)側(cè)注入骨水泥浸提液、0.1ml/點(diǎn)(對(duì)照組注射生理鹽水)。分別注射后15min、30min、1h、24h觀察SD大鼠注射點(diǎn)的紅斑、水腫、硬結(jié)及焦痂等形成情況。3.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA理化性能的檢測(cè)3.1初級(jí)性能檢測(cè)：3.1.1抗壓強(qiáng)度、拉伸強(qiáng)度及三點(diǎn)彎實(shí)驗(yàn)：將CPC(100%)組、CPC/PMMA(75%)組、CPC/PMMA(67%)組、CPC/PMMA(50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA(9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組、PMMA(100%)組骨水泥在常溫下調(diào)和均勻后注入不銹鋼模具中塑形,制成圓柱體(直徑5mm,高度10mm-50mm不等),我們稱之為“骨水泥試件”。將骨水泥試件分別放置于ELF3510-AT萬(wàn)能材料實(shí)驗(yàn)機(jī)(BOSES公司,美國(guó))上,預(yù)先制作的夾具以精確測(cè)定加載的力學(xué)參數(shù),進(jìn)行三點(diǎn)彎實(shí)驗(yàn)；于Instron(英斯特朗)萬(wàn)能材料實(shí)驗(yàn)機(jī)(美國(guó))上,進(jìn)行抗壓強(qiáng)度、拉伸強(qiáng)度的測(cè)試。3.1.2凝固溫度檢測(cè)3.2高級(jí)性能檢測(cè)3.2.1固化時(shí)間檢測(cè)3.2.2電鏡掃描形態(tài)學(xué)觀察3.2.3物相組成份析檢測(cè)4.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA的組織相容性實(shí)驗(yàn)4.1細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)：顯微鏡下觀察12孔板中骨水泥試件周圍的細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)與狀態(tài)。4.2骨水泥試件植入臨界性骨缺損、肌袋組織中的動(dòng)物模型建立。4.3骨水泥試件植入術(shù)后動(dòng)物模型的X線檢查(術(shù)后4周、12周、15周)。4.4骨水泥試件失重率的測(cè)試。4.5 SD大鼠脛骨臨界性骨缺損骨材料移植模型術(shù)后的組織形態(tài)學(xué)觀察及新生骨測(cè)量。結(jié)果1.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA的制備將CPC和PMMA骨水泥的同相粉末按質(zhì)量比3：1,2：1,1：1,1：2,1：5,1：10,1：15,1：20均勻混合得到不同比例的混合骨水泥固相系列：CPC/PMMA(75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA(50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組,根據(jù)本課題實(shí)驗(yàn)的需要,分別制備出與檢測(cè)要求相符合的骨水泥試件。2.1細(xì)胞毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為6個(gè)級(jí)別：0級(jí)為≥100%,1級(jí)為75%-99%,2級(jí)為50%-74%,3級(jí)為26%-49%,4級(jí)為1%-25%,5級(jí)為0。無(wú)毒性即為0級(jí),高毒性為5級(jí)。與空白對(duì)照組比較,骨水泥浸提液CPC/PMMA (16.7%)組,CPC/PMMA (9.10%)組,CPC/PMMA (6.25%)組,CPC/PMMA (4.80%)組和PMMA組有細(xì)胞毒性。2.2全身亞急性毒性實(shí)驗(yàn)各組SD大鼠機(jī)體狀態(tài)指標(biāo)變化無(wú)顯著性差異。2.3熱源實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)各組SD大鼠體溫變化無(wú)顯著性差異。2.4致敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：PMMA單體組的SD大鼠皮膚注射區(qū)域出現(xiàn)明顯的點(diǎn)狀紅斑和水腫,而在其他各組沒(méi)有此種現(xiàn)象出現(xiàn)。2.5溶血實(shí)驗(yàn)溶血率(%)=(實(shí)驗(yàn)組吸光度-陰性對(duì)照組吸光度)/(陽(yáng)性對(duì)照組吸光度-陰性對(duì)照組吸光度)×100%。結(jié)果評(píng)價(jià)：如果溶血率小于5%,可判定合格,即所檢測(cè)的材料不會(huì)引起溶血反應(yīng)。2.6病理學(xué)檢測(cè)血液常規(guī)檢包括測(cè)定：紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積和平均紅細(xì)胞體積。血液生化檢測(cè)包括測(cè)定：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶、尿素氮、總蛋白、血糖、總膽固醇、肌酐、甘油三酯等指標(biāo)。2.7病理組織學(xué)檢測(cè)：進(jìn)行小鼠尸檢,檢測(cè)肌袋、肝、脾、腎臟器的濕重,再進(jìn)行甲醛固定后石蠟切片、HE染色鏡下觀察其組織形態(tài)學(xué)。3.1抗壓強(qiáng)度、抗拉伸強(qiáng)度及三點(diǎn)彎實(shí)驗(yàn)的抗折強(qiáng)度結(jié)果顯示：CPC(100%)組,CPC/PMMA (75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA (50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組和PMMA (100%)組的抗壓強(qiáng)度、抗拉伸強(qiáng)度及抗折強(qiáng)度均有顯著性差異(P0.05)。3.2凝固溫度CPC(100%)組為對(duì)照組,其凝固溫度與室溫接近約為27℃,CPC/PMMA(75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA (50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA(4.8%)組、PMMA (100%)組的凝固溫度有顯著性差異(P0.05),各組復(fù)合型骨水泥凝固溫度介于40℃-80℃之間,而PMMA組凝固溫度最高達(dá)78℃左右。3.3固化時(shí)間CPC(100%)組固化時(shí)間較長(zhǎng)、約11min, PMMA (100%)組固化時(shí)間較短、約2min,復(fù)合型骨水泥組的固化時(shí)間介于2min-6min之間,以PMMA (100%)組為對(duì)照組,CPC/PMMA (75%)組、CPC/PMMA (67%)組、CPC/PMMA (50%)組、CPC/PMMA (33%)組、CPC/PMMA (16.7%)組、CPC/PMMA (9.1%)組、CPC/PMMA (6.25%)組、CPC/PMMA (4.8%)組和CPC(100%)組為試驗(yàn)組,各試驗(yàn)組的固化時(shí)間均有顯著性差異(P0.05)。3.4電鏡掃描形態(tài)學(xué)觀察(×500倍)：各組骨水泥經(jīng)過(guò)PMMA單體液調(diào)和后顆粒呈球狀、部分參雜晶體顆粒,CPC(100%)組顆粒間的孔徑分布松散、孔徑距離在100μm-400μm之間,PMMA(100%)組和復(fù)合骨水泥CPC/PMMA (4.8%)組的球狀顆粒排布緊密、顆粒間孔徑距離在50 μm-100μm之間,CPC/PMMA (75%)組,CPC/PMMA (67%)組和CPC/PMMA (50%)組的孔徑介于CPC(100%)組和PMMA (100%)組之間、約100 μm-200μm。3.5物相組成份析測(cè)試通過(guò)與國(guó)際衍射數(shù)據(jù)中心的粉末衍射標(biāo)準(zhǔn)卡對(duì)照顯示,PMMA骨水泥為無(wú)結(jié)晶衍射峰出現(xiàn)的非晶態(tài)物質(zhì),僅有硫酸鋇的結(jié)晶衍射峰呈現(xiàn)；而CPC則正常顯示出以羥基磷灰石為主的結(jié)晶衍射峰,混合后的復(fù)合型骨水泥隨著PMMA的不斷增加,原來(lái)低結(jié)晶度的CPC的結(jié)晶性能略有降低,但CPC與PMMA的混合并未明顯影響終產(chǎn)物羥基磷灰石的衍射峰,提示：無(wú)新的結(jié)晶相出現(xiàn)在反應(yīng)物中,即PMMA并不參與CPC的固化反應(yīng)。4.1細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)顯微鏡下觀察12孔板中骨水泥試件與成骨前體細(xì)胞(MC3T3-EI)共培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)情況。4.2骨水泥試件植入SD大鼠脛骨臨界性骨缺損動(dòng)物模型建立。4.3.1骨水泥試件植入SD大鼠脛骨臨界性骨缺損術(shù)后4周,動(dòng)物模型的X線檢查。影像學(xué)檢查結(jié)果提示：骨水泥明顯存在于各組脛骨臨界性骨缺損填充處,術(shù)后4周各組尚未見(jiàn)到骨水泥有顯著性降解。4.3.2骨水泥試件植入術(shù)后12周,動(dòng)物模型的X線觀察CPC組骨材料降解情況較術(shù)后4周骨降解略明顯,尤其是脛骨骨缺損邊緣處的骨水泥、與周圍骨組織間出現(xiàn)模糊陰影；PMMA組術(shù)后12周依然沒(méi)有明顯降解,骨水泥邊緣整齊、周圍骨質(zhì)殘存透亮影。4.3.3骨水泥試件植入SD大鼠脛骨臨界性骨缺損術(shù)后15周X線觀察CPC組骨材料降解情況較術(shù)后12周骨降解明顯,脛骨骨缺損處的骨水泥陰影模糊增強(qiáng)、與周圍骨組織連接緊密；PMMA組術(shù)后15周沒(méi)有明顯降解,骨水泥邊緣整齊、周圍骨質(zhì)的透亮影消失。4.4組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)1.空白對(duì)照組(無(wú)骨水泥填充),可見(jiàn)骨缺損處大量纖維結(jié)締組織結(jié)構(gòu),新骨細(xì)胞生長(zhǎng)連接后形成的骨皮質(zhì)較薄弱、易斷裂,不易修復(fù)骨缺損。2.CPC(100%)組：CPC大部分降解,可見(jiàn)在其周邊大量新生骨長(zhǎng)入并與周圍骨組織結(jié)合緊密,髓腔呈現(xiàn)再通趨勢(shì)。3. PMMA組：PMMA骨水泥無(wú)降解,可見(jiàn)在其周邊有少量骨長(zhǎng)入,纖維結(jié)締組織較多,未見(jiàn)骨壞死等現(xiàn)象。CPC/PMMA復(fù)合骨水泥組(以75%組為代表)：復(fù)合骨水泥部分降解,可見(jiàn)在其周邊大量新骨形成沿復(fù)合骨水泥表面生長(zhǎng)并與周圍骨組織連接形成“骨橋樣結(jié)構(gòu)”,形成的骨皮質(zhì)連續(xù)且與原骨骼結(jié)合牢固,髓腔也呈現(xiàn)再通趨勢(shì)。結(jié)論1.采用骨水泥CPC+PMMA為原料,物理?xiàng)l件下將兩者按照不同質(zhì)量比混合,以PMMA單體液調(diào)和,制備了新型復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA,制備過(guò)程簡(jiǎn)便可靠,PMMA的介入并不影響CPC的特性,復(fù)合骨水泥材料隨著PMMA含量的逐漸增高,其機(jī)械性抗壓強(qiáng)度、抗拉伸強(qiáng)度和抗折強(qiáng)度也隨之增高,而體內(nèi)降解速度逐漸減慢,PMMA含量超過(guò)50%幾乎無(wú)法降解。2.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA (75%、67%、50%)屬于無(wú)細(xì)胞毒性的生物材料,具有良好的細(xì)胞相容性。3.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA無(wú)血液毒性,不引發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng),不具有全身亞急性毒性,無(wú)溶血性,具有良好的生物安全性,復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA (75%、67%、50%)組符合骨組織替代材料的基本條件。4.復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA修復(fù)SD大鼠脛骨臨界性骨缺損的效果較理想,可以認(rèn)為75%-50%濃度范圍的復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA是一種具有骨引導(dǎo)活性、適用于負(fù)重或非負(fù)重區(qū)域骨移植的良好的生物性骨組織替代材料。
【關(guān)鍵詞】：磷酸鈣 聚甲基丙烯酸甲酯 骨水泥 生物學(xué)
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08;R687
【目錄】：

• 摘要3-12
• ABSTRACT12-27
• 前言27-35
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 第一部分 復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA的制備與材料性能檢測(cè)35-60
• 1 材料與方法35-42
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料35-36
• 1.2 CPC與PMMA復(fù)合型骨水泥的制備36-38
• 1.3 CPC與PMMA復(fù)合型骨水泥理化性能檢測(cè)38-41
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法41-42
• 2 結(jié)果42-52
• 2.1 抗壓實(shí)驗(yàn)42-43
• 2.2 拉伸實(shí)驗(yàn)43-45
• 2.3 三點(diǎn)彎實(shí)驗(yàn)45-46
• 2.4 凝固溫度46-48
• 2.5 固化時(shí)間48-49
• 2.6 微孔孔徑結(jié)構(gòu)觀察與測(cè)量49-50
• 2.7 X射線衍射分析50-51
• 2.8 失重率測(cè)試51-52
• 3 討論52-56
• 參考文獻(xiàn)56-60
• 第二部分 復(fù)合型骨水泥CPC/PMMA生物安全性檢測(cè)60-83
• 1 材料與方法61-69
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料61-62
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法和步驟62-69
• 1.2.1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)62-64
• 1.2.2 全身亞急性毒性實(shí)驗(yàn)64-65
• 1.2.3 熱源實(shí)驗(yàn)65-66
• 1.2.4 致敏實(shí)驗(yàn)66-67
• 1.2.5 溶血實(shí)驗(yàn)67-68
• 1.2.6 病理學(xué)檢測(cè)68
• 1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理68-69
• 2 結(jié)果69-78
• 2.1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)(MTT實(shí)驗(yàn))69-71
• 2.2 全身亞急性毒性實(shí)驗(yàn)71-76
• 2.3 熱源實(shí)驗(yàn)76-77
• 2.4 致敏實(shí)驗(yàn)77
• 2.5 溶血實(shí)驗(yàn)77-78
• 3 討論78-81
• 3.1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)79-80
• 3.2 全身亞急性毒性實(shí)驗(yàn)80
• 3.3 熱源實(shí)驗(yàn)與致敏實(shí)驗(yàn)80-81
• 3.4 溶血實(shí)驗(yàn)81
• 參考文獻(xiàn)81-83
• 第三部分 CPC/PMMA復(fù)合型骨水泥修復(fù)SD大鼠脛骨臨界性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究83-109
• 1 材料與方法85-89
• 1.1 主要儀器和實(shí)驗(yàn)材料85-86
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物86
• 1.3 試劑的配制86
• 1.4 實(shí)驗(yàn)分組86
• 1.5 建立骨水泥試件植入SD大鼠脛骨臨界性骨缺損動(dòng)物模型及手術(shù)方法86-88
• 1.6 標(biāo)本采集與處理88-89
• 1.7 數(shù)據(jù)處理89
• 2 結(jié)果89-95
• 2.1 動(dòng)物一般情況89
• 2.2 骨水泥試件植入術(shù)后動(dòng)物模型的X線檢查(術(shù)后4周,術(shù)后15周)89-95
• 3 討論95-104
• 3.1 新型骨材料在骨缺損修復(fù)中的研究現(xiàn)狀95-97
• 3.2 臨界性骨缺損動(dòng)物模型建立的可行性97-98
• 3.3 CPC和PMMA體內(nèi)對(duì)骨骼的影響98-99
• 3.4 CPC/PMMA復(fù)合型骨水泥在臨界性骨缺損動(dòng)物模型中的促成骨能力99-100
• 3.5 結(jié)論100-104
• 參考文獻(xiàn)104-109
• 全文總結(jié)109-110
• 綜述110-122
• 參考文獻(xiàn)117-122
• 中英文對(duì)照縮略詞表122-124
• 攻讀學(xué)位期間成果124-126
• 致謝126-128
• 研究生畢業(yè)論文統(tǒng)計(jì)學(xué)審稿證明128

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本文編號(hào)：1011028