隨著全球森林資源貿(mào)易量的急劇增加,木材尤其是熱帶木材物種已迅速成為《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約》(CITES)近年來(lái)關(guān)注的焦點(diǎn)。開展木材識(shí)別技術(shù)研究,實(shí)現(xiàn)其科學(xué)與準(zhǔn)確識(shí)別,是保護(hù)瀕危木材資源的關(guān)鍵技術(shù)基礎(chǔ)。僅依靠傳統(tǒng)木材解剖技術(shù),一般只能識(shí)別木材到“屬”或“類”,無(wú)法實(shí)現(xiàn)“種”的識(shí)別。最新發(fā)展的木材DNA條形碼識(shí)別技術(shù)為解決這一科學(xué)難題提供了可能。盡管植物DNA提取與分析技術(shù)已日趨成熟,但對(duì)于經(jīng)過(guò)干燥加工或長(zhǎng)期存儲(chǔ)的木材,則很難獲得高質(zhì)量的DNA。本論文針對(duì)干燥處理或長(zhǎng)期存儲(chǔ)的木材組織,通過(guò)突破DNA高效提取技術(shù)瓶頸,并優(yōu)選確定DNA條形碼,以實(shí)現(xiàn)瀕危木材“種”的識(shí)別。本研究通過(guò)優(yōu)化溫浴時(shí)間、木粉量與DNA裂解液體積比、裂解液化學(xué)成分等技術(shù)參數(shù),改進(jìn)了木材DNA提取技術(shù);并定量比較改進(jìn)的CTAB法與改進(jìn)的Qiagen試劑盒法,優(yōu)選了木材DNA提取方案,初步建立了木材DNA提取技術(shù)體系。利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),對(duì)多條短DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增;通過(guò)BLAST序列比對(duì)及構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,優(yōu)選確定了適用于木材識(shí)別的DNA條形碼類型及片段長(zhǎng)度,并分析了干燥處理及存儲(chǔ)時(shí)間等因素對(duì)木材DNA的影響。...

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及評(píng)述
    1.2 研究目標(biāo)和主要研究?jī)?nèi)容
        1.2.1 關(guān)鍵的科學(xué)問(wèn)題與研究目標(biāo)
        1.2.2 主要研究?jī)?nèi)容
    1.3 研究技術(shù)路線
第二章 木材DNA提取方法建立
    2.1 材料和方法
        2.1.1 樣品制備
        2.1.2 DNA提取
        2.1.3 DNA定量檢測(cè)
        2.1.4 PCR擴(kuò)增
        2.1.5 組織化學(xué)分析
        2.1.6 數(shù)理統(tǒng)計(jì)
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 木材DNA提取方法優(yōu)化
        2.2.2 木材DNA提取
        2.2.3 PCR擴(kuò)增
        2.2.4 改進(jìn)CTAB法與改進(jìn)Qiagen試劑盒法比較
        2.2.5 木材組織細(xì)胞核和造粉體分布
    2.3 小結(jié)
第三章 干燥處理木材的DNA條形碼識(shí)別
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 光學(xué)顯微分析
        3.1.3 木粉制備
        3.1.4 DNA提取
        3.1.5 DNA定量數(shù)理統(tǒng)計(jì)
        3.1.6 引物設(shè)計(jì)
        3.1.7 PCR擴(kuò)增
        3.1.8 PCR產(chǎn)物的純化、克隆、測(cè)序
        3.1.9 序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 白木香屬木材構(gòu)造特征
        3.2.2 DNA提取與PCR擴(kuò)增
        3.2.3 序列比對(duì)與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        3.2.4 DNA條形碼的篩選與評(píng)價(jià)
    3.3 小結(jié)
第四章 長(zhǎng)期存儲(chǔ)木材的DNA條形碼識(shí)別
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 胡楊木材構(gòu)造特征
        4.2.2 長(zhǎng)期存儲(chǔ)及考古胡楊木材DNA定量分析
        4.2.3 PCR擴(kuò)增
        4.2.4 序列比對(duì)
        4.2.5 系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建
    4.3 小結(jié)
第五章 瀕危黃檀屬木材的DNA條形碼識(shí)別
    5.1 材料與方法
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.2 結(jié)果與討論
        5.2.1 黃檀屬木材構(gòu)造特征
        5.2.2 DNA提取與PCR擴(kuò)增
        5.2.3 序列比對(duì)與系統(tǒng)進(jìn)化分析
        5.2.4 DNA條形碼的篩選與評(píng)價(jià)
    5.3 小結(jié)
第六章 結(jié)論與討論
    6.1 結(jié)論
        6.1.1 構(gòu)建木材DNA提取技術(shù)體系
        6.1.2 干燥處理對(duì)木材DNA的影響
        6.1.3 存儲(chǔ)時(shí)間對(duì)木材DNA的影響
        6.1.4 優(yōu)選適用于木材識(shí)別的DNA條形碼
        6.1.5 基于系統(tǒng)進(jìn)化樹實(shí)現(xiàn)瀕危木材“種”的準(zhǔn)確識(shí)別
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望與建議
參考文獻(xiàn)
在讀期間的學(xué)術(shù)研究
致謝



本文編號(hào)：4044499