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膽堿對(duì)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2017-05-27 18:18

  本文關(guān)鍵詞:膽堿對(duì)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:本論文通過(guò)5個(gè)試驗(yàn)、分4個(gè)章節(jié)研究了膽堿對(duì)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機(jī)制。 試驗(yàn)一通過(guò)研究日糧膽堿水平對(duì)生長(zhǎng)前期和生長(zhǎng)后期北京鴨生長(zhǎng)性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響,確定了北京鴨膽堿需要量。生長(zhǎng)前期試驗(yàn)研究了膽堿對(duì)1-21日齡北京鴨生長(zhǎng)性能和胴體品質(zhì)的影響,試驗(yàn)采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),將384只1日齡健康雄性Z2型北京鴨隨機(jī)分成8組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8只北京鴨;A(chǔ)日糧為玉米-玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧,添加膽堿后形成8個(gè)日糧膽堿水平:302、496、778、990、1182、1414、1625、1832mg/kg.結(jié)果表明,21日齡北京鴨日增重和日采食量隨膽堿水平的提高顯著升高(P0.05),在990mg/kg達(dá)到最大,二者分別從32.8g/d和46.9g/d提高到47.3g/d和69.4g/d,提高了44.2%和47.9%;北京鴨的腹脂率和胸肌率隨日糧膽堿水平的提高呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì),差異極顯著(P0.05),腿肌率變化不大(P0.05);以21日齡北京鴨日增重、日采食量和腹脂率為評(píng)定指標(biāo),采用直線折線模型獲得1-21日齡北京鴨膽堿需要量分別為810mg/kg(P=0.0116,R.=0.832).823mg/kg(P:0.019,R2=0.792)和1048mg/kg(P=0.0020,R.=0.916).生長(zhǎng)后期試驗(yàn)研究了膽堿對(duì)21~42日齡北京鴨生長(zhǎng)性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響。采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),選用體重相近的21日齡雄性Z2型北京鴨90只,隨機(jī)分成6個(gè)處理組,每個(gè)處理組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)3只鴨。基礎(chǔ)日糧為玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧,添加膽堿后形成6個(gè)日糧膽堿水平:0、342、779、1285、1662、1962mg/kg.結(jié)果表明,日糧添加膽堿顯著提高北京鴨日增重、日采食量和肝臟磷脂含量(P0.05),顯著降低肝臟總脂肪和甘油三酯(TG)含量(P0.05)。肝臟總脂質(zhì)和甘油三酯含量在膽堿缺乏組(0mg/kg)時(shí)最大,與1285mg/kg膽堿組相比,二者分別提高10.09%和15.79%。日糧添加膽堿顯著提高42日齡北京鴨的腹脂率以及降低腿肌率和肝體率(P0.05)。以日增重、日采食量、腹脂率、肝臟磷脂和總脂質(zhì)為評(píng)定指標(biāo),采用直線折線模型估算21-42日齡北京鴨的膽堿需要量分別為980mg/kg(P=0.0086,R2=0.958).950mg/kg(P=0.0052,R.=0.970).1010mg/kg(P=0.0084,R.=0.959).888mg/kg(P=0.0428,R.=0.792)和1130mg/kg(P=0.0456,RL2=0.872).綜上所述,與生長(zhǎng)需要膽堿量相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過(guò)多的脂肪沉積,肝臟磷脂含量可作為評(píng)價(jià)肉鴨膽堿營(yíng)養(yǎng)狀況新的敏感指標(biāo)。 試驗(yàn)二在試驗(yàn)一的基礎(chǔ)上,選取4個(gè)膽堿組:302、496、778、990ng/kg,重點(diǎn)研究膽堿缺乏對(duì)北京鴨骨骼發(fā)育和血液相關(guān)代謝指標(biāo)的影響。結(jié)果表明,膽堿缺乏北京鴨表現(xiàn)為精神萎靡、腿骨無(wú)力、脛跖骨關(guān)節(jié)腫大、弓形腿、滑腱癥,脛骨短粗,其中以弓形腿為明顯外觀特征,這種特征隨膽堿水平的提高而逐漸減弱,在990]mg/kg時(shí)基本消失;弓形腿北京鴨被解剖后,其腿部有明顯滑腱癥;膽堿缺乏顯著降低了北京鴨脛骨重、脛骨長(zhǎng)、脛骨寬和骨干長(zhǎng)(P0.05);日糧膽堿水平對(duì)血漿高半胱氨酸(Hcy)、堿性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TrACP)水平有顯著影響(P0.05),而對(duì)血漿羥脯氨酸(HOP)、胱氨酸(Cys).Ca和P水平?jīng)]有影響。綜上所述,玉米-玉米淀粉-大豆分離蛋白型日糧可成功構(gòu)建膽堿缺乏模型,北京鴨膽堿缺乏癥狀主要以弓形腿為主;膽堿缺乏后血漿Hcy水平升高,抑制了北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育,同時(shí)抑制了成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活動(dòng),骨周轉(zhuǎn)代謝減弱,進(jìn)一步降低了脛骨重量和脛骨長(zhǎng)度,加劇了脛骨發(fā)育不良。 試驗(yàn)三在試驗(yàn)一基礎(chǔ)上,研究日糧膽堿水平對(duì)21日齡北京鴨血漿和肝臟脂質(zhì)代謝的影響。結(jié)果表明,日糧中添加膽堿顯著提高了血漿TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-CHO),極低密度脂蛋白(VLDL)口游離脂肪酸(FFA)含量(P0.05),降低了血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性(P0.05);血漿TG濃度由0.62mmol/L (302mg/kg)升高到0.80mmol/L (1414mg/kg), VLDL濃度由0.63mmol/L (302mg/kg)升高到1.13mmol/L (1414mg/kg),分別提高29.0%和79.4%,而血漿GPT的活性從38.40U/L (302mg/kg)降低到27.75U/L (1414mg/kg),降低27.8%;21日齡北京鴨肝體率、總脂質(zhì)和甘油三酯濃度隨膽堿水平升高有顯著降低的趨勢(shì)(P0.05),而肝臟磷脂含量則相反,與302mg/kg組相比,在1182mg/kg時(shí),肝臟總脂質(zhì)和TG含量分別降低22.6%和19.0%,肝臟磷脂含量提高35.1%;日糧中添加膽堿顯著提高了肝臟脂蛋白酯酶(LPL)、肝酯酶(HL)和總酯酶(TL)活性(P0.05);肝臟組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),1414mg/kg膽堿組肝臟細(xì)胞大小一致,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,肝細(xì)胞呈多邊形,細(xì)胞核清晰可見,而缺乏膽堿組(302mg/kg)肝臟脂肪空泡增多,肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的油滴,肝細(xì)胞受損;以肝臟總脂質(zhì)、TG和總磷脂為評(píng)定指標(biāo),采用折線模型獲得北京鴨膽堿需要量分別為833mg/kg (P=0.0028, R2=0.905),1311mg/kg (P=0.0039,R2=0.891)和1230mg/kg (P=0.0015, R2=0.926);與試驗(yàn)一以生長(zhǎng)性能為評(píng)定指標(biāo)估算的需要量相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過(guò)多脂肪沉積。為了確保滿足北京鴨所有代謝功能的膽堿營(yíng)養(yǎng)需要,故推薦1-21日齡北京鴨膽堿需要量以1300mg/kg為宜。 試驗(yàn)四應(yīng)用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)研究了膽堿調(diào)控北京鴨脂肪代謝的分子機(jī)制和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。試驗(yàn)設(shè)膽堿缺乏組(302mg/kg)和膽堿添加組(1414mg/kg),分別從兩組中選取接近平均體重的試驗(yàn)鴨各3只,提取肝臟總RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序并分析。結(jié)果表明,北京鴨6個(gè)肝臟樣品rnRNA測(cè)序序列分別在5.4到6.7千萬(wàn)之間,共獲得36.5千萬(wàn)的高質(zhì)量干凈序列,其中原始序列的89.72%為高質(zhì)量序列,可為后續(xù)分析;經(jīng)過(guò)覆蓋度評(píng)價(jià)和RNA-seq數(shù)據(jù)驗(yàn)證后發(fā)現(xiàn),90%的Clean reads比對(duì)到參考基因組外顯子上,且RNA-seq測(cè)序數(shù)據(jù)與qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果趨勢(shì)一致;北京鴨膽堿缺乏和對(duì)照組肝臟表達(dá)譜比對(duì)后共篩選出363條差異表達(dá)基因(上調(diào)233,下調(diào)130),這些差異基因大部分與脂肪代謝、能量平衡、膽堿代謝、磷脂代謝、免疫應(yīng)激以及氧化還原有關(guān);通過(guò)GO功能富集分析和KEGG Pathway分析發(fā)現(xiàn),差異表達(dá)基因主要富集在細(xì)胞膜完整性、細(xì)胞質(zhì)、轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞核上以及參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑、氧化還原、電子轉(zhuǎn)移、DNA連接、蛋白質(zhì)結(jié)合和ATP連接等生物學(xué)過(guò)程,日糧膽堿水平顯著影響了PPARa信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、脂肪消化吸收通路和甘油脂質(zhì)代謝通路等。膽堿缺乏顯著影響了PPAR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的基因表達(dá),其中PPARa、RXR、SCD、CYP7A1、DBI基因表達(dá)量下調(diào),而FABP基因、ACBP基因和HMGCS1基因表達(dá)量上調(diào),表明膽堿缺乏后降低了肝臟脂肪的分解和β-氧化相關(guān)基因的表達(dá),加劇脂肪肝形成。 綜上所述,膽堿具有促進(jìn)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和抗脂肪肝的作用,膽堿缺乏后北京鴨肝臟脂肪顯著升高,其作用機(jī)制可能是通過(guò)降低PPARa信號(hào)傳導(dǎo)通路中與脂肪分解和氧化相關(guān)基因的表達(dá),加劇脂肪肝形成。與生長(zhǎng)所需膽堿相比,北京鴨需要更多的膽堿阻止肝臟過(guò)多的脂肪沉積,肝臟磷脂含量可作為評(píng)價(jià)肉鴨膽堿營(yíng)養(yǎng)狀況新的敏感指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】:北京鴨 膽堿 脂肪代謝 調(diào)控機(jī)制 轉(zhuǎn)錄組
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S834
【目錄】:
  • 摘要6-9
  • ABSTRACT9-12
  • 目錄12-14
  • 縮略詞14-15
  • 插圖與附表清單15-17
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述17-36
  • 1 研究的目的意義17
  • 2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀17-34
  • 3 研究?jī)?nèi)容和技術(shù)路線34-36
  • 第二章 試驗(yàn)研究36-98
  • 試驗(yàn)一 北京鴨膽堿需要量的研究36-53
  • 摘要36-37
  • 前言37
  • (一) 膽堿對(duì)生長(zhǎng)前期北京鴨生長(zhǎng)性能和胴體品質(zhì)的影響37-45
  • 1 材料與方法37-39
  • 2 結(jié)果與分析39-42
  • 3 討論42-44
  • 4 小結(jié)44-45
  • (二) 膽堿對(duì)生長(zhǎng)后期北京鴨生長(zhǎng)性能、胴體品質(zhì)和肝臟脂質(zhì)含量的影響45-53
  • 1 材料與方法45-47
  • 2 結(jié)果與分析47-50
  • 3 討論50-52
  • 4 小結(jié)52-53
  • 試驗(yàn)二 膽堿缺乏對(duì)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和相關(guān)代謝指標(biāo)的影響53-63
  • 摘要53
  • 前言53
  • 1 材料與方法53-56
  • 2 結(jié)果與分析56-60
  • 3 討論60-62
  • 4 小結(jié)62-63
  • 試驗(yàn)三 日糧膽堿水平對(duì)北京鴨肝臟和血漿脂質(zhì)代謝的影響63-74
  • 摘要63
  • 前言63-64
  • 1 材料與方法64-65
  • 2 結(jié)果與分析65-71
  • 3 討論71-73
  • 4 小結(jié)73-74
  • 試驗(yàn)四 膽堿調(diào)控北京鴨脂肪代謝的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究74-98
  • 摘要74
  • 前言74-75
  • 1 材料與方法75-78
  • 2 測(cè)序數(shù)據(jù)結(jié)果分析78-93
  • 3 討論93-97
  • 4 小結(jié)97-98
  • 第三章 結(jié)論與建議98-99
  • 1 主要結(jié)論98
  • 2 創(chuàng)新點(diǎn)98
  • 3 有待于進(jìn)一步研究和解決的問(wèn)題98-99
  • 參考文獻(xiàn)99-111
  • 附錄111-131
  • 致謝131-132
  • 作者簡(jiǎn)歷132-134

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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7 張文旭;王寶維;葛文華;張名愛;李文立;;膽堿對(duì)鵝體內(nèi)脂質(zhì)代謝及肝臟FAS基因mRNA表達(dá)的影響[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年13期


  本文關(guān)鍵詞:膽堿對(duì)北京鴨生長(zhǎng)發(fā)育和脂肪代謝的影響及其調(diào)控機(jī)制,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):400838

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