茶樹(shù)(Camellia sinensis)是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。在自然環(huán)境中,茶樹(shù)的葉片和枝梢會(huì)受到各種非生物因素和生物因素脅迫,從而影響茶葉產(chǎn)量。炭疽菌(Colletotrichum spp.)宿主廣泛,是造成茶樹(shù)病害的重要病原菌之一。通過(guò)對(duì)茶樹(shù)與炭疽菌互作機(jī)制研究,有利于明確茶樹(shù)應(yīng)對(duì)生物脅迫的響應(yīng)機(jī)制,能夠?yàn)檫M(jìn)一步明確茶樹(shù)抗病機(jī)理提供研究基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的研究了茶樹(shù)中存在的主要炭疽菌的生物學(xué)特性和致病性,通過(guò)接種實(shí)驗(yàn)、組學(xué)研究等手段探究茶樹(shù)與炭疽菌的互作過(guò)程。主要研究結(jié)論如下:(1)明確了茶樹(shù)中炭疽菌的優(yōu)勢(shì)菌種,對(duì)比了優(yōu)勢(shì)菌種的生物學(xué)特性和致病性強(qiáng)弱。利用多基因(ITS、ACT、GAPDH、TUB2、CAL和GS)遺傳發(fā)育分析和形態(tài)學(xué)觀察相結(jié)合的方式,分離到38個(gè)炭疽菌菌株,分別屬于Colletotrichum cameliae和C.fructicola。兩者形態(tài)差異明顯,在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí),C.camelliae菌絲致密,C.fructicola菌絲較稀疏,且C.fructicola的產(chǎn)孢量遠(yuǎn)高于C.camelliae。與C.fructicola相比,C.camellia...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語(yǔ)表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 植物病原菌脅迫響應(yīng)機(jī)制
        1.1.1 植物的物理防御機(jī)制
            1.1.1.1 被動(dòng)物理防御機(jī)制
            1.1.1.2 主動(dòng)物理防御機(jī)制
        1.1.2 植物的化學(xué)防御機(jī)制
    1.2 植物生物脅迫響應(yīng)中的激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
        1.2.1 水楊酸介導(dǎo)的信號(hào)途徑
        1.2.2 茉莉酸和乙烯介導(dǎo)的信號(hào)途徑
    1.3 炭疽菌屬真菌研究
        1.3.1 炭疽菌與宿主互作中的發(fā)展歷程和基因表達(dá)調(diào)控
        1.3.2 茶樹(shù)中的炭疽菌研究。
    1.4 本研究目的及意義
        1.4.1 研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
第二章 茶樹(shù)炭疽菌分離鑒定及生物學(xué)特性研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 菌種收集與分離
        2.1.2 形態(tài)學(xué)鑒定
        2.1.3 分子鑒定
        2.1.4 多位點(diǎn)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析
        2.1.5 致病性檢測(cè)
        2.1.6 溫度、pH對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響
        2.1.7 室內(nèi)抑菌實(shí)驗(yàn)
        2.1.8 數(shù)據(jù)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 炭疽菌分離和鑒定
        2.2.2 溫度對(duì)炭疽菌生長(zhǎng)的影響
        2.2.3 pH對(duì)菌落生長(zhǎng)的影響
        2.2.4 炭疽菌致病性檢測(cè)
        2.2.5 室內(nèi)抑菌實(shí)驗(yàn)
    2.3 討論
第三章 茶樹(shù)炭疽菌侵染過(guò)程的組織學(xué)觀察
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 接種實(shí)驗(yàn)與真菌組織學(xué)觀察
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 C.camelliae和 C.fructicola接種茶樹(shù)葉片的差異比較
        3.2.2 C.camelliae與茶樹(shù)互作時(shí)的組織學(xué)染色觀察
        3.2.3 C.camelliae與茶樹(shù)互作的熒光染色觀察
    3.3 討論
第四章 茶樹(shù)與炭疽菌互作過(guò)程中轉(zhuǎn)錄組與代謝組分析及真菌侵染變化分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            4.1.2.1 接種實(shí)驗(yàn)與取樣
            4.1.2.2 茶樹(shù)總RNA提取
            4.1.2.3 文庫(kù)建立與測(cè)序
            4.1.2.4 數(shù)據(jù)處理
            4.1.2.5 參考基因組序列比對(duì)與新基因預(yù)測(cè)
            4.1.2.6 差異表達(dá)分析與富集分析
            4.1.2.7 qRT-PCR驗(yàn)證
            4.1.2.8 真菌轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)獲得
            4.1.2.9 代謝組測(cè)定與分析
            4.1.2.10 數(shù)據(jù)分析
            4.1.2.11 胼胝質(zhì)沉淀染色
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 茶樹(shù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)質(zhì)量分析
            4.2.1.1 總RNA提取質(zhì)量分析
            4.2.1.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)質(zhì)量分析
            4.2.1.3 新基因預(yù)測(cè)及注釋
            4.2.1.4 主成分分析
        4.2.2 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)差異分析與富集分析
            4.2.2.1 差異表達(dá)基因分析
            4.2.2.2 差異基因富集分析
        4.2.3 炭疽菌侵染過(guò)程中的基因表達(dá)譜分析
        4.2.4 qRT-PCR驗(yàn)證
        4.2.5 代謝組樣本主成分分析
        4.2.6 代謝組數(shù)據(jù)差異分析和KEGG分析
        4.2.7 炭疽菌入侵誘導(dǎo)茶樹(shù)胼胝質(zhì)的合成
        4.2.8 JA/ET信號(hào)途徑在侵染后期起重要作用
    4.3 討論
        4.3.1 胼胝質(zhì)沉淀在侵染早期出現(xiàn)抵御病原菌入侵
        4.3.2 JA/ET信號(hào)通路在發(fā)病階段起重要作用
        4.3.3 炭疽菌在互作過(guò)程中的基因表達(dá)變化
第五章 茶樹(shù)與炭疽菌互作過(guò)程中的激素變化
    5.1 材料與方法
        5.1.1 激素提取
        5.1.2 分析測(cè)定
        5.1.3 qRT-PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)情況
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 水楊酸在茶樹(shù)與炭疽菌互作過(guò)程中的含量變化
        5.2.2 茉莉酸在茶樹(shù)與炭疽菌互作過(guò)程中的含量變化
        5.2.3 水楊酸與茉莉酸相關(guān)基因在茶樹(shù)與炭疽菌互作過(guò)程中的的表達(dá)變化
    5.3 討論
第六章 總結(jié)與展望
    6.1 全文主要結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3874112