靈芝是擔(dān)子菌綱多孔科靈芝屬真菌,是我國(guó)傳統(tǒng)的補(bǔ)益藥。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,靈芝多糖作為靈芝中主要的活性成分之一,具有調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、抗腫瘤、保肝護(hù)肝、抗氧化和強(qiáng)心等作用。但靈芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)屬于大分子多糖,在應(yīng)用時(shí)存在體內(nèi)代謝較快,作用時(shí)間短、靶向性弱、易聚集等不足。因此,為了提高靈芝多糖靶向性或延長(zhǎng)其作用時(shí)間,對(duì)其新劑型的開(kāi)發(fā)顯得尤為重要。脂質(zhì)體是一種微小囊泡,它具有類(lèi)似生物膜結(jié)構(gòu)的磷脂雙分子層。脂質(zhì)體不僅能夠有效遞送藥物,而且能作為疫苗遞送系統(tǒng)。脂質(zhì)立方液晶納米粒具有兩親性脂質(zhì)分散在水溶液中自組裝成含雙連續(xù)水區(qū)和脂質(zhì)區(qū)的閉合脂質(zhì)雙層“蜂窩狀”結(jié)構(gòu),能夠包封各種不同極性和劑量的藥物,具有多樣化的藥物包裹性,具有很多應(yīng)用功能,如保護(hù)藥物活性、控制藥物釋放、靶向給藥以及阻止藥物分子間發(fā)生聚集等。脂質(zhì)立方液晶納米粒因其獨(dú)特的內(nèi)部結(jié)構(gòu)能夠有效地運(yùn)載藥物或抗原。將靈芝多糖包封于脂質(zhì)體和脂質(zhì)立方液晶納米粒中,不僅可以利用脂質(zhì)體和脂質(zhì)立方液晶納米粒的良好藥物載體優(yōu)勢(shì)幫助靈芝多糖有效遞送,還可以利用二者優(yōu)點(diǎn),彌補(bǔ)二者不足,從而更有效地...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)及縮略語(yǔ)
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 疫苗佐劑
        1.1 佐劑在疫苗中的作用
        1.2 疫苗的免疫應(yīng)答
        1.3 佐劑的免疫應(yīng)答
    2 納米粒作為疫苗或藥物遞送系統(tǒng)的研究
        2.1 脂質(zhì)體
        2.2 脂質(zhì)立方液晶納米粒
        2.3 聚乳酸-羥基乙酸共聚物
        2.4 聚谷氨酸
    3 中藥多糖的免疫調(diào)節(jié)作用
        3.1 中藥多糖對(duì)免疫器官的影響
        3.2 中藥多糖對(duì)免疫細(xì)胞的影響
        3.3 中藥多糖對(duì)細(xì)胞因子的影響
    4 本研究的目的和意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 靈芝多糖脂質(zhì)體的制備及制備條件的優(yōu)化
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)藥物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 靈芝多糖脂質(zhì)體的制備
        2.2 靈芝多糖脂質(zhì)體包封率的測(cè)定
        2.3 靈芝多糖脂質(zhì)體制備工藝的優(yōu)化
        2.4 靈芝多糖脂質(zhì)體粒徑的測(cè)定和形態(tài)觀(guān)察
    3 結(jié)果
        3.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果
        3.2 BBD試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分析
        3.3 響應(yīng)面結(jié)果分析
        3.4 GLPL粒徑以及電鏡下的形態(tài)
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖和分化的影響
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖的測(cè)定
        2.2 脾臟淋巴細(xì)胞分化的檢測(cè)
        2.3 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 藥物單獨(dú)刺激脾臟淋巴細(xì)胞增殖的變化
        3.2 藥物協(xié)同LPS刺激脾B淋巴細(xì)胞增殖的變化
        3.3 藥物協(xié)同PHA刺激脾T淋巴細(xì)胞增殖的變化
        3.4 對(duì)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分化的作用
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的誘導(dǎo)、分離與培養(yǎng)
        2.2 腹腔巨噬細(xì)胞活性檢測(cè)
        2.3 腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力測(cè)定
        2.4 腹腔巨噬細(xì)胞表面分子MHCⅡ表達(dá)的測(cè)定
        2.5 NO含量以及iNOS活性的測(cè)定
        2.6 細(xì)胞因子含量測(cè)定
        2.7 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞活性的影響
        3.2 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬作用的影響
        3.3 GLPL對(duì)巨噬細(xì)胞表面表達(dá)分子MHCⅡ表達(dá)的影響
        3.4 GLPL對(duì)細(xì)胞因子水平的影響
        3.5 GLPL對(duì)巨噬細(xì)胞NO產(chǎn)量的影響
        3.6 GLPL對(duì)巨噬細(xì)胞iNOS活性的影響
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第五章 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)OVA免疫小鼠的免疫增強(qiáng)作用
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 粒徑穩(wěn)定性的測(cè)定
        2.2 抗原包封率穩(wěn)定性檢測(cè)
        2.3 動(dòng)物分組及免疫程序
        2.4 淋巴結(jié)中樹(shù)突狀細(xì)胞(DCs)表面分子的測(cè)定
        2.5 淋巴細(xì)胞增殖的測(cè)定
        2.6 小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞分化的測(cè)定
        2.7 血清中OVA特異性抗體及抗體亞型的測(cè)定
        2.8 細(xì)胞因子的測(cè)定
        2.9 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 OVA包封率的變化
        3.2 粒徑及PDI的變化
        3.3 淋巴結(jié)中DCs的成熟
        3.4 脾臟淋巴細(xì)胞增殖的變化
        3.5 小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的分化
        3.6 OVA特異性IgG及其亞型的變化
        3.7 細(xì)胞因子水平的變化
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第六章 靈芝多糖脂質(zhì)體對(duì)PCV-2苗免疫小鼠的免疫增強(qiáng)作用
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 疫苗配制
        2.2 動(dòng)物分組及處理
        2.3 ELISA法測(cè)定PCV-2特異性IgG的濃度
        2.4 ELISA法測(cè)定IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3的濃度
        2.5 血清細(xì)胞因子含量測(cè)定
        2.6 脾臟組織學(xué)分析
        2.7 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 GLPL對(duì)血清中PCV-2特異性IgG及抗體亞型含量的影響
        3.2 GLPL對(duì)血清中IL-4、IFN-γ、IL-17、IL-12p70和TNF-α含量的影響
        3.3 脾臟組織學(xué)變化
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第七章 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒的制備方法優(yōu)選及質(zhì)量評(píng)價(jià)
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)藥物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒的制備
        2.2 乙醇分散法中分散介質(zhì)的優(yōu)化
        2.3 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒包封率的測(cè)定
        2.4 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒粒徑和Zeta電位的測(cè)定
        2.5 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒的形態(tài)觀(guān)察
        2.6 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒小角X散射測(cè)定
    3 結(jié)果
        3.1 兩種制備方法對(duì)GLPC包封率的影響
        3.2 乙醇分散法中不同分散介質(zhì)對(duì)GLPC包封率和穩(wěn)定性的影響
        3.3 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒粒徑及Zeta電勢(shì)
        3.4 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒表面形態(tài)
        3.5 GLPC小角X散射分析
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第八章 靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒對(duì)PCV-2苗免疫小鼠的免疫增強(qiáng)作用
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試驗(yàn)藥物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
    2 方法
        2.1 疫苗制備
        2.2 動(dòng)物分組及處理
        2.3 血清中PCV-2特異性IgG含量的測(cè)定
        2.4 血清中IgGl、IgG2a、IgG2b和IgG3濃度的測(cè)定
        2.5 血清中細(xì)胞因子的測(cè)定
        2.6 淋巴結(jié)中記憶T細(xì)胞反應(yīng)的檢測(cè)
        2.7 檢測(cè)淋巴結(jié)中抗原含量的檢測(cè)
        2.8 淋巴結(jié)中樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs)表面分子的測(cè)定
        2.9 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 血清中PCV-2特異性抗體和抗體亞型的變化
        3.2 GLPC對(duì)血清中IL-4、IFN-γ、IL-17、IL-12p70和TNF-α含量的影響
        3.3 淋巴結(jié)中抗原量變化
        3.4 淋巴結(jié)中DCs的成熟
        3.5 淋巴結(jié)中記憶T細(xì)胞的變化
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第九章 修飾后靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒對(duì)OVA免疫小鼠的免疫增強(qiáng)作用
    1 材料與儀器
        1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2 方法
        2.1 兩種陽(yáng)離子修飾靈芝多糖脂質(zhì)立方液晶納米粒的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)
        2.2 兩種修飾脂質(zhì)立方液晶納米粒對(duì)小鼠免疫OVA的免疫增強(qiáng)作用
        2.3 脾臟組織轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
        2.4 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 不同修飾脂質(zhì)立方液晶納米粒的粒徑、電勢(shì)、OVA吸附率及SAXS分析
        3.2 兩種修飾脂質(zhì)立方液晶納米粒對(duì)小鼠免疫應(yīng)答的影響
        3.3 小鼠脾臟基因表達(dá)情況
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表和完成的論文
致謝



本文編號(hào)：3855587