青海省是我國頂層戰(zhàn)略部署“一帶一路”和“三江源生態(tài)保護”項目中的重點區(qū)域,隨著經(jīng)濟帶和保護區(qū)的發(fā)展,人員物資的流動,蜱及蜱媒病嚴重威脅著人和動物的健康,研究該地區(qū)蜱種及蜱攜帶病原的多樣性和病原基因的多態(tài)性,評估蜱傳病原對生態(tài)環(huán)境和公共衛(wèi)生安全影響的風險因素,為青海省及周邊國家制定防控策略提供數(shù)據(jù)支撐,對深入了解我國蜱種及蜱傳疫病有著深遠的意義。本研究在青海省選取22個縣市作為采樣點,采用布旗法和人工誘捕法共采集1104只自然界游離的饑餓成蜱;通過傳統(tǒng)形態(tài)學鑒定并結(jié)合16S rRNA、COI和ITS2基因的分子學鑒定得出有3屬7種蜱,分別為青海血蜱(454/1104)、丹氏血蜱(42/1104)、西藏血蜱(2/1104)、阿壩革蜱(263/1104)、草原革蜱(246/1104)、森林革蜱(94/1104)和草原硬蜱(3/1104)。采用PCR和RLB技術(shù)對鑒定的蜱種進行無漿體(羊無漿體、邊緣無漿體、牛無漿體、嗜吞噬細胞無漿體)、立克次體、伯氏疏螺旋體、梨形蟲和蜱傳新發(fā)病原(山羊無漿體、Colpodella spp.病原)的分子檢測。PCR檢測結(jié)果顯示:羊無漿體的感染率為5.6%、牛無漿...

【文章頁數(shù)】：134 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要 abstract 第一章 引言
1.1 蜱分類概述
1.2 蜱傳病原概述
    1.2.1 無漿體
    1.2.2 立克次體
    1.2.3 伯氏疏螺旋體
    1.2.4 梨形蟲
    1.2.5 Colpodella spp.病原
    1.2.6 蜱傳病原常用檢測方法的研究進展
    1.2.7 研究背景、目的與意義 第二章 青海地區(qū)的蜱種多樣性的調(diào)查
2.1 材料
    2.1.1 蜱蟲樣品
    2.1.2 試劑
    2.1.3 耗材
    2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 方法
    2.2.1 采集地點的選擇
    2.2.2 蜱蟲的采集
    2.2.3 蜱蟲的形態(tài)學鑒定
    2.2.4 蜱蟲的分子學鑒定
    2.2.5 PCR陽性產(chǎn)物純化與回收
    2.2.6 目的基因片段的克隆與測序
    2.2.7 序列和數(shù)據(jù)分析
2.3 實驗結(jié)果
    2.3.1 蜱蟲采集結(jié)果
    2.3.2 蜱蟲形態(tài)鑒定結(jié)果
    2.3.3 蜱種分子鑒定結(jié)果
2.4 討論 第三章 青海地區(qū)的蜱種攜帶病原的檢測
3.1 材料
    3.1.1 DNA樣品
    3.1.2 實驗標準菌株
    3.1.3 試劑
    3.1.4 儀器設(shè)備
3.2 方法
    3.2.1 引物和探針的設(shè)計和合成
    3.2.2 羊無漿體的檢測
    3.2.3 邊緣無漿體的檢測
    3.2.4 牛無漿體、嗜吞噬細胞無漿體的檢測
    3.2.5 蜱傳立克次體的檢測
    3.2.6 蜱傳伯氏疏螺旋體的檢測
    3.2.7 蜱傳梨形蟲的檢測
    3.2.8 山羊無漿體的檢測
    3.2.9 Colpodella spp.病原的檢測
    3.2.10 PCR陽性產(chǎn)物純化與回收
    3.2.11 目的基因片段的克隆與測序
    3.2.12 序列和數(shù)據(jù)分析
    3.2.13 反向線狀印跡雜交技術(shù)檢測
3.3 結(jié)果
    3.3.1 羊無漿體的檢測
    3.3.2 邊緣無漿體的檢測
    3.3.3 牛無漿體的PCR檢測
    3.3.4 嗜吞噬細胞無漿體的檢測
    3.3.5 蜱傳立克次體的檢測
    3.3.6 伯氏疏螺旋體的檢測
    3.3.7 梨形蟲的檢測結(jié)果
    3.3.8 新發(fā)蜱傳病原山羊無漿體的檢測
    3.3.9 新發(fā)蜱傳病原Colpodella spp.的檢測
3.4 討論
    3.4.1 無漿體
    3.4.2 立克次體
    3.4.3 伯氏疏螺旋體
    3.4.4 梨形蟲
    3.4.5 新發(fā)蜱傳病原 第四章 青海地區(qū)的蜱種攜帶病原的風險評估
4.1 材料
    4.1.1 青海地區(qū)蜱種信息的數(shù)據(jù)
    4.1.2 青海地區(qū)蜱種攜帶病原的數(shù)據(jù)
    4.1.3 青海地區(qū)蜱種采集地點的數(shù)據(jù)
4.2 方法
4.3 結(jié)果
    4.3.1 羊無漿體的風險評估分析
    4.3.2 牛無漿體的風險評估分析
    4.3.3 嗜吞噬細胞無漿體的風險評估分析
    4.3.4 立克次體的風險評估分析
    4.3.5 伯氏疏螺旋體的風險評估分析
    4.3.6 梨形蟲的風險評估分析
    4.3.7 山羊無漿體的風險評估分析
    4.3.8 Colpodella spp.病原的風險評估分析
4.4 討論 第五章 羊無漿體MSP1a基因多態(tài)性分析
5.1 材料
    5.1.1 蜱蟲樣品
    5.1.2 羊基因組樣品
    5.1.3 菌株
5.2 方法
    5.2.1 引物的設(shè)計和合成
    5.2.2 全國羊樣品羊無漿體的檢測
    5.2.3 蜱體內(nèi)和全國羊基因組中羊無漿體MSP1a基因的擴增
    5.2.4 羊無漿體MSP1a基因PCR陽性產(chǎn)物純化與回收
    5.2.5 羊無漿體MSP1a基因片段的克隆與測序
    5.2.6 序列和數(shù)據(jù)分析
5.3 結(jié)果
    5.3.1 蜱樣品羊無漿體MSP1a基因多態(tài)性的分析
    5.3.2 全國羊樣品羊無漿體的檢測結(jié)果
    5.3.3 全國羊樣品羊無漿體MSP1a基因多態(tài)性的分析
5.4 討論 第六章 全文總結(jié) 附表 參考文獻 致謝 作者簡介



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