青蒿（Artemisia annua L.）是我國傳統(tǒng)中藥。青蒿素是青蒿中最重要的藥用成分�；谇噍锼氐穆�(lián)合療法（Artemisinin-based combination therapy,ACT）是世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的治療瘧疾的首選療法,但青蒿素在野生青蒿中的含量很低,因此,提高青蒿中青蒿素的含量成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)外施茉莉酸（Jasmonate,JA）和脫落酸（Abscisic acid,ABA）等植物激素可以提高青蒿中青蒿素的含量,但是JA和ABA調(diào)控青蒿素生物合成的分子機(jī)制尚不明確。目前青蒿中雖有少數(shù)關(guān)于激素響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子包括JA響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子AaORA（Octadecanoid-derivatie Responsive AP2-domain protein）參與調(diào)控青蒿素生物合成的報(bào)道,但是其分子作用機(jī)制并不清楚。TCP（TEOSINTE BRANCHED 1/CYCLOIDEA/PROLIFERATING CELL FACTOR）類蛋白是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子,在植物次生代謝中具有重要作用。在擬南芥中,TCP類轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控黃酮類物質(zhì)的合成,以及葉綠素和類胡蘿卜素的... 

【文章頁數(shù)】：171 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 青蒿和青蒿素簡介
    1.2 青蒿素生物合成途徑的解析及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控
    1.3 茉莉酸在植物次生代謝中的作用
        1.3.1 茉莉酸影響長春花中長春花堿的生物合成
        1.3.2 茉莉酸影響煙草中尼古丁的生物合成
        1.3.3 茉莉酸影響丹參中丹參酮的生物合成
        1.3.4 茉莉酸影響青蒿中青蒿素的生物合成
    1.4 TCP類轉(zhuǎn)錄因子
        1.4.1 TCP類轉(zhuǎn)錄因子在植物生長發(fā)育中的研究
        1.4.2 TCP類轉(zhuǎn)錄因子在植物激素信號(hào)中的研究
        1.4.3 TCP類轉(zhuǎn)錄因子在植物生物鐘信號(hào)中的研究
        1.4.4 TCP類轉(zhuǎn)錄因子在植物防御中的研究
        1.4.5 TCP類轉(zhuǎn)錄因子在植物次生代謝調(diào)控中的研究
    1.5 本研究的目的與技術(shù)路線
第二章 AaTCP14-AaORA復(fù)合體參與JA調(diào)控的青蒿素生物合成
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果和討論
        2.3.1 AaORA間接激活青蒿素合成關(guān)鍵酶基因
        2.3.2 AaORA互作蛋白篩選以及候選蛋白Aa TCP14 分析
        2.3.3 AaORA和 AaTCP14 蛋白互作分析
        2.3.4 AaTCP14和Aa ORA具有相似的表達(dá)模式,并且Aa TCP14 蛋白定位在細(xì)胞核中
        2.3.5 過表達(dá)或沉默AaTCP14 增加或減少青蒿素含量
        2.3.6 AaTCP14 可以直接結(jié)合和激活DBR2和ALDH1 的啟動(dòng)子
        2.3.7 AaTCP14和Aa ORA協(xié)同增加青蒿素的生物合成,并且AaORA的功能依賴于AaTCP
        2.3.8 AaJAZ8 負(fù)向調(diào)控青蒿素的生物合成
        2.3.9 AaJAZ8與AaORA和 Aa TCP14 在體外體內(nèi)都相互作用
        2.3.9 AaJAZ8 抑制Aa TCP14和AaORA的互作
        2.3.10 AaJAZ8 抑制AaTCP14-AaORA復(fù)合體的轉(zhuǎn)錄激活活性
        2.3.11 討論和小結(jié)
第三章 AaMYC2-AaGSW1-AaTCP15/AaORA轉(zhuǎn)錄級(jí)聯(lián)正向調(diào)控青蒿素的生物合成
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果和討論
        3.3.1 青蒿AaTCPs家族基因表達(dá)譜分析與候選AaTCP15 進(jìn)化、序列分析
        3.3.2 AaTCP15 表達(dá)模式和亞細(xì)胞定位分析
        3.3.3 過表達(dá)或沉默AaTCP15 增加或減少青蒿素含量
        3.3.4 AaTCP15 直接結(jié)合和激活DBR2和ALDH1 啟動(dòng)子
        3.3.5 AaTCP15與Aa ORA互作并且協(xié)同調(diào)控DBR2 啟動(dòng)子的活性
        3.3.6 AaMYC2、Aa GSW1、AaORA、AaERF1和AabZIP1 激活A(yù)aTCP15 的表達(dá)
        3.3.7 討論和小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 研究總結(jié)
    4.2 研究創(chuàng)新點(diǎn)
    4.3 后續(xù)工作展望
參考文獻(xiàn)
附錄
附表
致謝
攻讀博士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
攻讀博士期間已授權(quán)和公開的發(fā)明專利


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]丹參4-（5′-二磷酸胞苷）-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶的cDNA全長克隆及其誘導(dǎo)表達(dá)分析[J]. 王學(xué)勇,崔光紅,黃璐琦,高偉,袁媛.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2008(12)
[2]茉莉酸甲酯對(duì)丹參毛狀根中丹參酮類成分積累和釋放的影響[J]. 王學(xué)勇,崔光紅,黃璐琦,邱德有.  中國中藥雜志. 2007(04)



本文編號(hào)：3697055