近年來,由于盲目過量地施用化肥,造成了土壤質(zhì)量的下降,不利于農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此使用安全高效、對(duì)環(huán)境友好的微生物有機(jī)肥來替代化肥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliqueficiens）SQR9是本實(shí)驗(yàn)室從健康黃瓜根際篩選得到的一株根際益生菌,能夠在植物根際形成強(qiáng)健的生物膜并有效定殖,兼有促生和生防的效果,在微生物有機(jī)肥中已得到廣泛應(yīng)用。由于生物膜的形成是促進(jìn)植物益生菌根際定殖的關(guān)鍵因素,研究菌株SQR9生物膜形成的具體調(diào)控機(jī)制,有助于增強(qiáng)其在根際的競(jìng)爭(zhēng)定殖和肥料的應(yīng)用效果,為我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中化肥減施、生物肥料替代和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供理論指導(dǎo)。目前,關(guān)于芽孢桿菌生物膜形成的調(diào)控機(jī)制在模式菌株枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）中研究的比較透徹。大量研究揭示了全局性調(diào)控蛋白SpoOA是如何通過多種代謝途徑和轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控生物膜胞外基質(zhì)合成基因的表達(dá),但位于調(diào)控蛋白SpoOA上游的調(diào)控途徑被報(bào)道的較少。另外在枯草芽孢桿菌中,生物膜細(xì)胞群體內(nèi)存在一種細(xì)胞之間嗜食同類的現(xiàn)象,被叫做Cannibalism,能夠促進(jìn)生物膜的形成,而其他類的... 

【文章頁數(shù)】：140 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語及專有詞匯檢索表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 基于根際有益芽孢稈菌的微生物有機(jī)肥研究概況
        1.1 微生物有機(jī)肥的概念和特點(diǎn)
        1.2 微生物有機(jī)肥的作用機(jī)理
        1.3 微生物有機(jī)肥的應(yīng)用現(xiàn)狀與發(fā)展
    2 根際有益芽孢桿菌的生物膜形成與根際定殖
        2.1 細(xì)菌生物膜的研究概況
        2.2 細(xì)菌生物膜的檢測(cè)方法
        2.3 芽孢桿菌生物膜形成的分子機(jī)制研究
        2.4 生物膜形成與根際定殖研究
    3 本研究的目的、意義及技術(shù)路線
        3.1 本研究的目的及意義
        3.2 本研究的技術(shù)路線
    參考文獻(xiàn)
第二章 利用解淀粉芽孢桿菌SQR9的突變體文庫篩選影響生物膜形成的基因
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 生物膜形成變化的突變體菌株初篩以及初篩菌株抗性驗(yàn)證
        2.2 生物膜形成變化的突變體菌株復(fù)篩
        2.3 生物膜形成變化的突變體菌株轉(zhuǎn)座子插入位點(diǎn)分析
        2.4 目的基因在SQR9基因組上的敲除及生物膜表型測(cè)定
        2.5 突變體中質(zhì)粒pUBXC的消除
        2.6 野生型SQR9與突變體△ftsE的生長曲線測(cè)定
        2.7 互補(bǔ)菌株的構(gòu)建
        2.8 ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FtsEX影響生物膜的形成
        2.9 ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FtsEX在SQR9中的定位觀察
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 肽聚糖水解酶CwlO對(duì)菌株SQR9生物膜形成的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 基因cwlO缺失突變體的構(gòu)建
        2.2 肽聚糖水解酶CwlO過表達(dá)對(duì)細(xì)胞的毒害作用
        2.3 突變體AcwlO對(duì)生物膜形成的影響
        2.4 野生型SQR9與突變體△cwlO的生長曲線測(cè)定
        2.5 SQR9以及突變體△ftsE和△cwlO的黃瓜根際定殖研究
        2.6 突變體△cwlO形成的生物膜中細(xì)胞形態(tài)的變化
        2.7 胞外DNA對(duì)SQR9生物膜形成的影響
        2.8 野生型SQR9與突變體△cwlO胞外DNA的比較
        2.9 SQR9中其他肽聚糖水解酶的探索
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 FtsEX-CwlO調(diào)控菌株SQR9生物膜形成的機(jī)理研究
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 野生型與突變體的生物膜形成和菌落形態(tài)的比較
        2.2 野生型與突變體的胞外基質(zhì)觀察
        2.3 野生型與突變體分泌胞外多糖的測(cè)定
        2.4 生物膜相關(guān)基因的定量
        2.5 生物膜相關(guān)膜結(jié)合激酶突變體的生物膜比較
        2.6 FtsEX/CwlO與膜結(jié)合激酶的互作分析
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 新型活性物質(zhì)Bacillunoic acid A/B介導(dǎo)SQR9生物膜形成過程中的Cannibalism
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 SQR9生物膜中裂解細(xì)胞的觀察
        2.2 SQR9及其不同突變體生物膜中活菌和死菌的染色觀察
        2.3 SQR9及不同突變體胞外DNA的測(cè)定
        2.4 菌株SQR9的操縱子bnaA-B的啟動(dòng)子分析
        2.5 生物膜形成過程中毒素物質(zhì)Bacillunoic acid A/B對(duì)操縱子bnaA-B啟動(dòng)子的誘導(dǎo)
        2.6 生物膜形成過程中操縱子bnaA-B啟動(dòng)子的差異誘導(dǎo)
        2.7 Cannibalism對(duì)SQR9生物膜形成的影響
    3 討論
    4 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論及展望
    一 全文結(jié)論
    二 展望
創(chuàng)新點(diǎn)
博士期間發(fā)表及待發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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