發(fā)布時間：2022-08-02 20:16

　　1型鴨肝炎病毒（Duck Hepatitis A virus type 1,DHAV-1）是引起雛鴨病毒性肝炎的重要病原,對雛鴨致死率高,而對成年鴨感染無明顯臨床癥狀,但系統(tǒng)評估其對成年鴨致病性、體內(nèi)分布及誘導(dǎo)免疫發(fā)生特性等數(shù)據(jù)較為缺乏,圍繞這些科學(xué)問題開展系列研究,主要結(jié)果如下:1 1型鴨肝炎強毒感染誘發(fā)成年鴨急性和慢性肝炎DHAV-1強毒感染160日齡成年鴨,無臨床癥狀。qRT-PCR檢測血液病毒持續(xù)感染196 d,引起病毒血癥的發(fā)生。DHAV-1感染后2-10 d,肝臟病毒RNA和3D蛋白陽性,病毒快速復(fù)制增殖含量達到10~7.18.18 copies/g;肝臟病理檢測結(jié)果顯示肝細(xì)胞嗜酸性變性并有炎性細(xì)胞浸潤;血清肝功能指標(biāo)檢測顯示ALT、AST和Tbil含量升高,具有急性肝炎的特征。肝臟內(nèi)病毒持續(xù)感染252 d,且在10-252 d肝臟纖維組織增生且伴有肝細(xì)胞壞死、脂肪變性、空泡形成和大量炎性細(xì)胞浸潤等病變;感染后140 d AST>ALT,且白蛋白和白球蛋白比持續(xù)降低,提示肝功能持續(xù)損傷,具有慢性肝炎的特征。血液和肝臟模式識別受體（PRRs）、白介素（ILs）、干擾素（... 

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
常用英文縮寫詞匯
第一章 文獻綜述
    1.1 1型鴨肝炎概述
        1.1.1 病毒分類
        1.1.2 病原學(xué)和基因組結(jié)構(gòu)
        1.1.3 流行特點
        1.1.4 體內(nèi)分布特點
        1.1.5 致病特點
        1.1.6 防治措施
    1.2 鴨抗病毒免疫研究概述
        1.2.1 鴨抗病毒先天性免疫
        1.2.2 鴨抗病毒適應(yīng)性免疫
        1.2.3 DHAV-1 感染誘導(dǎo)鴨免疫應(yīng)答研究進展
    1.3 選題目的及意義
第二章 1型鴨肝炎強毒感染誘發(fā)成年鴨急性和慢性肝炎
    2.1 實驗材料
        2.1.1 病毒
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 試劑與設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 試驗設(shè)計
        2.2.2 樣品采集和處理
        2.2.3 RNA的提取
        2.2.4 c DNA的制備
        2.2.5 一步法實時熒光定量檢測樣品DHAV-1 RNA拷貝數(shù)
        2.2.6 相對熒光定量檢測肝臟和血液免疫相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄水平
        2.2.7 DHAV-1 誘導(dǎo)血清特異性抗體IgG、IgM和 IgA1 產(chǎn)生規(guī)律
        2.2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測肝臟DHAV-1 特異性CD4+和CD8+T 細(xì)胞
        2.2.9 組織病理學(xué)檢測
        2.2.10 免疫組織化學(xué)法檢測肝臟內(nèi)DHAV-13D蛋白的分布
        2.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 DHAV-1 感染成年鴨的臨床和剖檢癥狀
        2.3.2 DHAV-1 在肝臟和血液的感染和增殖規(guī)律
        2.3.3 DHAV-1 感染誘發(fā)急性和慢性肝炎
        2.3.4 DHAV-1 誘導(dǎo)血清特異性Ig G、Ig M和 Ig A1 抗體的產(chǎn)生規(guī)律
        2.3.5 DHAV-1 誘導(dǎo)肝臟內(nèi)特異性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)
        2.3.6 DHAV-1 誘導(dǎo)血液和肝臟先天性免疫應(yīng)答反應(yīng)
        2.3.7 DHAV-1 與血液和肝臟免疫應(yīng)答的相互作用
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 1型鴨肝炎強毒腎臟分布特性與持續(xù)性感染的形成
    3.1 實驗材料
        3.1.1 病毒
        3.1.2 實驗動物
        3.1.3 試劑與設(shè)備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 實驗設(shè)計
        3.2.2 樣品采集和處理
        3.2.3 RNA的提取
        3.2.4 c DNA的制備
        3.2.5 一步法實時熒光定量檢測DHAV-1 RNA拷貝數(shù)
        3.2.6 相對熒光定量檢測腎臟免疫相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄水平
        3.2.7 組織病理學(xué)檢測
        3.2.8 免疫組織化學(xué)法檢測DHAV-1 在腎臟的分布特點
        3.2.9 免疫組織化學(xué)法檢測腎臟特異性CD4/CD8+T 細(xì)胞的動態(tài)分布
        3.2.10 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 DHAV-1 在成年鴨腎臟的感染和分布特點
        3.3.2 DHAV-1 感染引起腎臟的病理損傷
        3.3.3 DHAV-1 誘導(dǎo)腎臟T細(xì)胞免疫應(yīng)答特性
        3.3.4 DHAV-1 誘導(dǎo)腎臟先天性免疫應(yīng)答反應(yīng)特性
        3.3.5 DHAV-1 與腎臟免疫相關(guān)因子的相互作用關(guān)系
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 1型鴨肝炎強毒對淋巴器官的組織嗜性
    4.1 實驗材料
        4.1.1 病毒
        4.1.2 實驗動物
        4.1.3 試劑與設(shè)備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 實驗設(shè)計
        4.2.2 樣品采集和處理
        4.2.3 RNA的提取
        4.2.4 c DNA的制備
        4.2.5 實時熒光定量檢測DHAV-1 RNA拷貝數(shù)
        4.2.6 相對熒光定量檢測淋巴器官免疫相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄水平
        4.2.7 免疫組織化學(xué)法檢測DHAV-1 在淋巴器官的分布
        4.2.8 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 DHAV-1 在淋巴組織的感染特點
        4.3.2 DHAV-1 誘導(dǎo)模式識別受體的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.3 DHAV-1 誘導(dǎo)干擾素的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.4 DHAV-1 誘導(dǎo)白介素的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.5 DHAV-1 誘導(dǎo)MHC和 BAFF的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.6 DHAV-1 誘導(dǎo)趨化因子和β-防御素的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.7 DHAV-1 與淋巴器官免疫相關(guān)因子的相互作用關(guān)系
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 1型鴨肝炎強毒感染消化系統(tǒng)特點及誘導(dǎo)黏膜免疫
    5.1 實驗材料
        5.1.1 病毒
        5.1.2 實驗動物
        5.1.3 試劑與設(shè)備
    5.2 實驗方法
        5.2.1 實驗設(shè)計
        5.2.2 樣品采集和處理
        5.2.3 RNA的提取
        5.2.4 熒光定量檢測DHAV-1 RNA拷貝數(shù)
        5.2.5 間接ELISA檢測膽汁特異性IgG、IgM和 IgA
        5.2.6 間接ELISA檢測分泌液特異性IgG、IgM和 IgA
        5.2.7 免疫組織化學(xué)法檢測IgA+細(xì)胞
        5.2.8 數(shù)據(jù)分析
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 DHAV-1 在胰腺、食管和腸道的感染和分布規(guī)律
        5.3.2 DHAV-1 誘導(dǎo)膽汁特異性抗體IgG、IgM和 IgA的產(chǎn)生規(guī)律
        5.3.3 DHAV-1 誘導(dǎo)食管特異性抗體IgG、IgM和 IgA的分泌規(guī)律
        5.3.4 DHAV-1 誘導(dǎo)腸道特異性抗體IgG、IgM和 IgA的分泌規(guī)律
        5.3.5 DHAV-1 誘導(dǎo)食管IgA+細(xì)胞的分布
        5.3.6 DHAV-1 誘導(dǎo)腸道IgA+細(xì)胞的分布
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第六章 1型鴨肝炎強毒感染生殖系統(tǒng)特點及誘導(dǎo)黏膜免疫
    6.1 實驗材料
        6.1.1 病毒
        6.1.2 實驗動物
        6.1.3 試劑與設(shè)備
    6.2 實驗方法
        6.2.1 實驗設(shè)計
        6.2.2 樣品采集和處理
        6.2.3 RNA的提取
        6.2.4 熒光定量檢測DHAV-1 RNA拷貝數(shù)
        6.2.5 間接ELISA檢測生殖系統(tǒng)分泌液特異性IgG、IgM和 IgA
        6.2.6 免疫組化法檢測生殖道IgA+細(xì)胞
        6.2.7 數(shù)據(jù)分析
    6.3 結(jié)果與分析
        6.3.1 DHAV-1 在生殖系統(tǒng)的感染和分布規(guī)律
        6.3.2 DHAV-1 誘導(dǎo)生殖系統(tǒng)分泌液特異性IgG的產(chǎn)生
        6.3.3 DHAV-1 誘導(dǎo)生殖系統(tǒng)分泌液特異性IgM的產(chǎn)生
        6.3.4 DHAV-1 誘導(dǎo)生殖系統(tǒng)分泌液特異性IgA的產(chǎn)生
        6.3.5 DHAV-1 誘導(dǎo)生殖道IgA+細(xì)胞的分布
    6.4 討論
    6.5 小結(jié)
結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
作者簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]1型鴨肝炎病毒強毒株在雛鴨體內(nèi)分布情況研究[J]. 趙麗麗,劉海燕,牛銀杰,祝明皓,劉勝旺,陳洪巖.  實驗動物科學(xué). 2015(03)
[4]感染鴨乙型肝炎病毒鴨外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞水平變化[J]. 聶云天,劉伯陽,王琪.  實用肝臟病雜志. 2015(03)
[5]鴨坦布蘇病毒感染對鴨T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響[J]. 陳翠騰,蘇榮茂,黃瑜,傅光華,程龍飛,陳紅梅,萬春和,傅秋玲,施少華,林建生.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(11)
[6]丙型肝炎病毒感染者的早期腎損傷監(jiān)測[J]. 姚玉華,李美忠,史偉峰,姜慶波.  徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2012 (09)
[7]鴨甲型病毒性肝炎的研究進展[J]. 任麗倩,李晶,畢玉海,陳璨,張大丙,劉文軍.  生物工程學(xué)報. 2012(07)
[8]雛鴨感染鴨病毒性肝炎的組織病理學(xué)觀察[J]. 伍莉,朱周福.  中國獸醫(yī)雜志. 2011(05)
[9]雞SIgA的純化鑒定及免疫小鼠效果的觀察[J]. 王文強,龍塔,黃小東,岳峰,賈文科,王選年.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(10)
[10]鴨膽汁中高純度分泌型免疫球蛋白A制備[J]. 楊曉燕,周霞,汪銘書,齊雪峰,程安春.  大理學(xué)院學(xué)報. 2009(08)

博士論文
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[2]急性肝壞死時腸道SIgA變化機制的研究[D]. 劉冬妍.中國醫(yī)科大學(xué) 2006

碩士論文
[1]鴨甲肝病毒1和3型一步法雙重RT-PCR檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 文興建.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]鴨病毒性肝炎弱毒活疫苗臨床免疫試驗研究[D]. 何慶雄.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]MDRV與H9AIV協(xié)同感染對番鴨細(xì)胞免疫機能的影響[D]. 高春亮.福建農(nóng)林大學(xué) 2010
[4]鴨肝炎病毒感染櫻桃谷雛鴨和中鴨后免疫病理學(xué)的動態(tài)研究[D]. 趙曉娜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]鴨肝炎病毒人工感染雛鴨病理發(fā)展規(guī)律及免疫組化與免疫熒光檢測病原侵染規(guī)律的研究[D]. 陳海軍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[6]鴨肝炎病毒免疫種鴨抗體消長規(guī)律及其雛鴨母源抗體變化的研究[D]. 樊景鳳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2000



本文編號：3669175