單端孢霉烯族毒素在接種及誘抗馬鈴薯塊莖中的積累及T-2毒素對塊莖誘抗的蛋白組學(xué)分析
發(fā)布時間:2022-07-22 15:00
干腐病是馬鈴薯塊莖貯藏期間的重要病害,多種鐮刀菌與該病有關(guān),其中F.sulphureum,F.sambucinum和F.solani是我國西北地區(qū)的主要病原物。干腐病不僅導(dǎo)致塊莖貯藏期間的巨大經(jīng)濟損失,而且會在塊莖體內(nèi)積累大量的真菌毒素,其中以單端孢霉烯族類毒素的積累量最大。本文以感病和抗病馬鈴薯品種(隴薯3號和隴薯6號)為材料,采用超高壓液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)技術(shù)分析了感病塊莖組織中的單端孢霉烯族毒素;研究了馬鈴薯品種、鐮刀菌菌種和貯藏溫度對單端孢霉烯族類毒素積累的影響;探討了硅酸鈉、殼聚糖和β-氨基丁酸3種誘抗劑處理對干腐病及單端孢霉烯族毒素的控制效果;通過蛋白組學(xué)等方法闡明了T-2毒素在誘導(dǎo)塊莖抗干腐病的誘抗機理。結(jié)果表明:1.開發(fā)的UHPLC-MS/MS方法適合于同時測定F.sulphureum損傷接種塊莖中4種單端孢霉烯族毒素(A型:T-2,DAS;B型:3ADON,Fus-X)的定性和定量測定。該法線性回歸系數(shù)R≥0.9995、回收率113.28-77.97%、精密度RSD≤5.89、檢出限(LOD)0.002-0.005μg/g;檢出量(LOQ)...
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
SUMMARY
縮寫詞 Abbreviation
第一章 文獻綜述及立題依據(jù)
1. 馬鈴薯塊莖干腐病的發(fā)生及單端孢霉烯族毒素的積累
1.1 馬鈴薯塊莖的干腐病
1.2 單端孢霉烯族毒素的檢測與毒性
1.3 單端孢霉烯族素的代謝及影響因素
2. 誘抗劑處理對果蔬采后病害的控制及其作用機理
2.1 殼聚糖
2.2 硅酸鈉
2.3 β-氨基丁酸
3 ITRAQ技術(shù)及其在果蔬采后研究中的應(yīng)用
3.1 iTRAQ技術(shù)概述
3.2 iTRAQ技術(shù)在果蔬采后研究中的應(yīng)用
4 本研究內(nèi)容與技術(shù)路線
4.1 當(dāng)前研究存在的問題與不足
4.2 本研究的主要內(nèi)容
4.3 技術(shù)路線
第二章 干腐病馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯族毒素的檢測
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料與試劑
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 溶液的配制
2.4 樣品的處理
2.5 UHPLC-MS/MS檢測分析
2.6 方法的驗證
2.7 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 提取與凈化
3.2 選擇性
3.3 準(zhǔn)確度和精密度
3.4 線性和檢測限
3.5 樣品分析
4.討論
5 小結(jié)
第三章 馬鈴薯品種、鐮刀菌菌種和貯藏溫度對塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族毒素積累的影響
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 樣品分析
2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計
3 結(jié)果與分析
3.1 不同馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對塊莖切片病斑直徑的影響
3.2. 貯藏溫度對塊莖切片病斑直徑的影響
3.3 馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對單端孢霉烯族毒素積累的影響
3.4 貯藏溫度對單端孢霉烯族毒素積累的影響
3.5 單端孢霉烯族毒素在干腐病塊莖病部及周圍健康組織中的分布
4. 討論
5 小結(jié)
第四章 三種誘抗劑處理對馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 誘抗劑處理對損傷接種塊莖病斑直徑的影響
3.2 培養(yǎng)時間對損傷接種塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族類毒素積累的影響
3.3 誘抗劑處理對損傷接種的塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族類毒素積累影響
4 討論
5 小結(jié)
第五章 蛋白組學(xué)方法分析T-2 毒素處理對馬鈴薯塊莖誘導(dǎo)抗性機理
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 T-2 處理對馬鈴薯塊莖切片接種F. sulphureum病斑直徑的影響
3.2 樣品總蛋白提取效果比較
3.3 蛋白質(zhì)定量與SDS-PAGE鑒定結(jié)果
3.4 iTRAQ鑒定蛋白基本信息
3.5 iTRAQ鑒定差異蛋白分析
4 討論
4.1 T-2 毒素處理對塊莖切片病斑直徑的影響
4.2 馬鈴薯塊莖蛋白提取方法比較
4.3 T-2 毒素處理對防衛(wèi)脅迫相關(guān)蛋白質(zhì)積累的影響
4.4 T-2 毒素處理對蛋白質(zhì)合成、定向及貯藏相關(guān)蛋白質(zhì)積累的關(guān)系
4.5 T-2 毒素處理對能量代謝相關(guān)蛋白質(zhì)積累的影響
5 小結(jié)
全文總結(jié)與創(chuàng)新點
1 主要結(jié)論
2 本文創(chuàng)新點
參考文獻
附表
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]低質(zhì)量濃度T-2處理對馬鈴薯塊莖苯丙烷代謝活性的誘導(dǎo)[J]. 趙瑩,薛華麗,畢陽,唐亞梅,沈科萍. 食品科學(xué). 2015(06)
[2]絕對和相對定量的等量異位標(biāo)簽技術(shù)(iTRAQ)在中醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 羅丁,樊小農(nóng),石學(xué)敏. 遼寧中醫(yī)雜志. 2014(08)
[3]硫色鐮刀菌(Fusarium sulphureum)體外產(chǎn)毒條件的篩選[J]. 唐亞梅,薛華麗,畢陽,趙瑩,沈科萍,王毅. 食品科學(xué). 2014(11)
[4]β-氨基丁酸結(jié)合殼聚糖處理對蘋果采后青霉病的防治效果與機理[J]. 張維,周會玲,袁仲玉,張春云,溫曉紅. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(10)
[5]植物UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶生化特性和功能研究進展[J]. 姬向楠,何非,段長青,王軍. 食品科學(xué). 2013(09)
[6]納升級反相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析錦燈籠提取物中的蛋白質(zhì)[J]. 于海洋,晏嘉澤,郭明,靳艷. 色譜. 2013(04)
[7]不同愈傷時間對低溫貯藏期間馬鈴薯塊莖采后病害及品質(zhì)的影響[J]. 包改紅,畢陽,李永才,吳覺天,寇宗紅,葛永紅,王毅,王蒂. 食品工業(yè)科技. 2013(11)
[8]固相萃取-超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測大鼠血漿中T-2毒素及其主要代謝產(chǎn)物[J]. 趙燕華,林妮妮,郭磊,陳佳,劉萬卉,謝劍煒. 分析化學(xué). 2012(12)
[9]麻竹葉片蛋白質(zhì)雙向電泳體系的建立[J]. 楊惠琴,喬桂榮,蔣晶,劉明英,姜彥成,卓仁英. 竹子研究匯刊. 2012(03)
[10]天山雪蓮UDP葡萄糖-類黃酮-3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及功能分析[J]. 唐亞萍,原慧,覃建兵. 生物工程學(xué)報. 2012(06)
博士論文
[1]殼聚糖和硅酸鈉對馬鈴薯塊莖干腐病的控制及其機理研究[D]. 李永才.蘭州大學(xué) 2007
碩士論文
[1]基于蛋白質(zhì)組學(xué)的BTH處理對厚皮甜瓜果實成熟衰老的調(diào)控機理研究[D]. 李欣.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]蠟梅脫氫抗壞血酸還原酶基因的克隆與功能初步分析[D]. 林靜.西南大學(xué) 2010
本文編號:3664825
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
SUMMARY
縮寫詞 Abbreviation
第一章 文獻綜述及立題依據(jù)
1. 馬鈴薯塊莖干腐病的發(fā)生及單端孢霉烯族毒素的積累
1.1 馬鈴薯塊莖的干腐病
1.2 單端孢霉烯族毒素的檢測與毒性
1.3 單端孢霉烯族素的代謝及影響因素
2. 誘抗劑處理對果蔬采后病害的控制及其作用機理
2.1 殼聚糖
2.2 硅酸鈉
2.3 β-氨基丁酸
3 ITRAQ技術(shù)及其在果蔬采后研究中的應(yīng)用
3.1 iTRAQ技術(shù)概述
3.2 iTRAQ技術(shù)在果蔬采后研究中的應(yīng)用
4 本研究內(nèi)容與技術(shù)路線
4.1 當(dāng)前研究存在的問題與不足
4.2 本研究的主要內(nèi)容
4.3 技術(shù)路線
第二章 干腐病馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯族毒素的檢測
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料與試劑
2.2 儀器與設(shè)備
2.3 溶液的配制
2.4 樣品的處理
2.5 UHPLC-MS/MS檢測分析
2.6 方法的驗證
2.7 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 提取與凈化
3.2 選擇性
3.3 準(zhǔn)確度和精密度
3.4 線性和檢測限
3.5 樣品分析
4.討論
5 小結(jié)
第三章 馬鈴薯品種、鐮刀菌菌種和貯藏溫度對塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族毒素積累的影響
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 樣品分析
2.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計
3 結(jié)果與分析
3.1 不同馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對塊莖切片病斑直徑的影響
3.2. 貯藏溫度對塊莖切片病斑直徑的影響
3.3 馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對單端孢霉烯族毒素積累的影響
3.4 貯藏溫度對單端孢霉烯族毒素積累的影響
3.5 單端孢霉烯族毒素在干腐病塊莖病部及周圍健康組織中的分布
4. 討論
5 小結(jié)
第四章 三種誘抗劑處理對馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 誘抗劑處理對損傷接種塊莖病斑直徑的影響
3.2 培養(yǎng)時間對損傷接種塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族類毒素積累的影響
3.3 誘抗劑處理對損傷接種的塊莖體內(nèi)單端孢霉烯族類毒素積累影響
4 討論
5 小結(jié)
第五章 蛋白組學(xué)方法分析T-2 毒素處理對馬鈴薯塊莖誘導(dǎo)抗性機理
1 引言
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 方法
2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
3.1 T-2 處理對馬鈴薯塊莖切片接種F. sulphureum病斑直徑的影響
3.2 樣品總蛋白提取效果比較
3.3 蛋白質(zhì)定量與SDS-PAGE鑒定結(jié)果
3.4 iTRAQ鑒定蛋白基本信息
3.5 iTRAQ鑒定差異蛋白分析
4 討論
4.1 T-2 毒素處理對塊莖切片病斑直徑的影響
4.2 馬鈴薯塊莖蛋白提取方法比較
4.3 T-2 毒素處理對防衛(wèi)脅迫相關(guān)蛋白質(zhì)積累的影響
4.4 T-2 毒素處理對蛋白質(zhì)合成、定向及貯藏相關(guān)蛋白質(zhì)積累的關(guān)系
4.5 T-2 毒素處理對能量代謝相關(guān)蛋白質(zhì)積累的影響
5 小結(jié)
全文總結(jié)與創(chuàng)新點
1 主要結(jié)論
2 本文創(chuàng)新點
參考文獻
附表
致謝
作者簡介
導(dǎo)師簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]低質(zhì)量濃度T-2處理對馬鈴薯塊莖苯丙烷代謝活性的誘導(dǎo)[J]. 趙瑩,薛華麗,畢陽,唐亞梅,沈科萍. 食品科學(xué). 2015(06)
[2]絕對和相對定量的等量異位標(biāo)簽技術(shù)(iTRAQ)在中醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 羅丁,樊小農(nóng),石學(xué)敏. 遼寧中醫(yī)雜志. 2014(08)
[3]硫色鐮刀菌(Fusarium sulphureum)體外產(chǎn)毒條件的篩選[J]. 唐亞梅,薛華麗,畢陽,趙瑩,沈科萍,王毅. 食品科學(xué). 2014(11)
[4]β-氨基丁酸結(jié)合殼聚糖處理對蘋果采后青霉病的防治效果與機理[J]. 張維,周會玲,袁仲玉,張春云,溫曉紅. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(10)
[5]植物UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶生化特性和功能研究進展[J]. 姬向楠,何非,段長青,王軍. 食品科學(xué). 2013(09)
[6]納升級反相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析錦燈籠提取物中的蛋白質(zhì)[J]. 于海洋,晏嘉澤,郭明,靳艷. 色譜. 2013(04)
[7]不同愈傷時間對低溫貯藏期間馬鈴薯塊莖采后病害及品質(zhì)的影響[J]. 包改紅,畢陽,李永才,吳覺天,寇宗紅,葛永紅,王毅,王蒂. 食品工業(yè)科技. 2013(11)
[8]固相萃取-超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測大鼠血漿中T-2毒素及其主要代謝產(chǎn)物[J]. 趙燕華,林妮妮,郭磊,陳佳,劉萬卉,謝劍煒. 分析化學(xué). 2012(12)
[9]麻竹葉片蛋白質(zhì)雙向電泳體系的建立[J]. 楊惠琴,喬桂榮,蔣晶,劉明英,姜彥成,卓仁英. 竹子研究匯刊. 2012(03)
[10]天山雪蓮UDP葡萄糖-類黃酮-3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及功能分析[J]. 唐亞萍,原慧,覃建兵. 生物工程學(xué)報. 2012(06)
博士論文
[1]殼聚糖和硅酸鈉對馬鈴薯塊莖干腐病的控制及其機理研究[D]. 李永才.蘭州大學(xué) 2007
碩士論文
[1]基于蛋白質(zhì)組學(xué)的BTH處理對厚皮甜瓜果實成熟衰老的調(diào)控機理研究[D]. 李欣.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]蠟梅脫氫抗壞血酸還原酶基因的克隆與功能初步分析[D]. 林靜.西南大學(xué) 2010
本文編號:3664825
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