干腐病是馬鈴薯塊莖貯藏期間的重要病害,多種鐮刀菌與該病有關,其中F.sulphureum,F.sambucinum和F.solani是我國西北地區(qū)的主要病原物。干腐病不僅導致塊莖貯藏期間的巨大經濟損失,而且會在塊莖體內積累大量的真菌毒素,其中以單端孢霉烯族類毒素的積累量最大。本文以感病和抗病馬鈴薯品種（隴薯3號和隴薯6號）為材料,采用超高壓液相色譜-三重四級桿質譜（UPLC-MS/MS）技術分析了感病塊莖組織中的單端孢霉烯族毒素;研究了馬鈴薯品種、鐮刀菌菌種和貯藏溫度對單端孢霉烯族類毒素積累的影響;探討了硅酸鈉、殼聚糖和β-氨基丁酸3種誘抗劑處理對干腐病及單端孢霉烯族毒素的控制效果;通過蛋白組學等方法闡明了T-2毒素在誘導塊莖抗干腐病的誘抗機理。結果表明:1.開發(fā)的UHPLC-MS/MS方法適合于同時測定F.sulphureum損傷接種塊莖中4種單端孢霉烯族毒素（A型:T-2,DAS;B型:3ADON,Fus-X）的定性和定量測定。該法線性回歸系數(shù)R≥0.9995、回收率113.28-77.97%、精密度RSD≤5.89、檢出限（LOD）0.002-0.005μg/g;檢出量（LOQ）... 

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮寫詞 Abbreviation
第一章 文獻綜述及立題依據
    1. 馬鈴薯塊莖干腐病的發(fā)生及單端孢霉烯族毒素的積累
        1.1 馬鈴薯塊莖的干腐病
        1.2 單端孢霉烯族毒素的檢測與毒性
        1.3 單端孢霉烯族素的代謝及影響因素
    2. 誘抗劑處理對果蔬采后病害的控制及其作用機理
        2.1 殼聚糖
        2.2 硅酸鈉
        2.3 β-氨基丁酸
    3 ITRAQ技術及其在果蔬采后研究中的應用
        3.1 iTRAQ技術概述
        3.2 iTRAQ技術在果蔬采后研究中的應用
    4 本研究內容與技術路線
        4.1 當前研究存在的問題與不足
        4.2 本研究的主要內容
        4.3 技術路線
第二章 干腐病馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯族毒素的檢測
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料與試劑
        2.2 儀器與設備
        2.3 溶液的配制
        2.4 樣品的處理
        2.5 UHPLC-MS/MS檢測分析
        2.6 方法的驗證
        2.7 統(tǒng)計分析
    3 結果與分析
        3.1 提取與凈化
        3.2 選擇性
        3.3 準確度和精密度
        3.4 線性和檢測限
        3.5 樣品分析
    4.討論
    5 小結
第三章 馬鈴薯品種、鐮刀菌菌種和貯藏溫度對塊莖體內單端孢霉烯族毒素積累的影響
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 樣品分析
        2.4 數(shù)據處理與統(tǒng)計
    3 結果與分析
        3.1 不同馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對塊莖切片病斑直徑的影響
        3.2. 貯藏溫度對塊莖切片病斑直徑的影響
        3.3 馬鈴薯品種和鐮刀菌菌種對單端孢霉烯族毒素積累的影響
        3.4 貯藏溫度對單端孢霉烯族毒素積累的影響
        3.5 單端孢霉烯族毒素在干腐病塊莖病部及周圍健康組織中的分布
    4. 討論
    5 小結
第四章 三種誘抗劑處理對馬鈴薯塊莖中單端孢霉烯
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 數(shù)據處理與統(tǒng)計分析
    3 結果與分析
        3.1 誘抗劑處理對損傷接種塊莖病斑直徑的影響
        3.2 培養(yǎng)時間對損傷接種塊莖體內單端孢霉烯族類毒素積累的影響
        3.3 誘抗劑處理對損傷接種的塊莖體內單端孢霉烯族類毒素積累影響
    4 討論
    5 小結
第五章 蛋白組學方法分析T-2 毒素處理對馬鈴薯塊莖誘導抗性機理
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 數(shù)據統(tǒng)計分析
    3 結果與分析
        3.1 T-2 處理對馬鈴薯塊莖切片接種F. sulphureum病斑直徑的影響
        3.2 樣品總蛋白提取效果比較
        3.3 蛋白質定量與SDS-PAGE鑒定結果
        3.4 iTRAQ鑒定蛋白基本信息
        3.5 iTRAQ鑒定差異蛋白分析
    4 討論
        4.1 T-2 毒素處理對塊莖切片病斑直徑的影響
        4.2 馬鈴薯塊莖蛋白提取方法比較
        4.3 T-2 毒素處理對防衛(wèi)脅迫相關蛋白質積累的影響
        4.4 T-2 毒素處理對蛋白質合成、定向及貯藏相關蛋白質積累的關系
        4.5 T-2 毒素處理對能量代謝相關蛋白質積累的影響
    5 小結
全文總結與創(chuàng)新點
    1 主要結論
    2 本文創(chuàng)新點
參考文獻
附表
致謝
作者簡介
導師簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]低質量濃度T-2處理對馬鈴薯塊莖苯丙烷代謝活性的誘導[J]. 趙瑩,薛華麗,畢陽,唐亞梅,沈科萍.  食品科學. 2015(06)
[2]絕對和相對定量的等量異位標簽技術（iTRAQ）在中醫(yī)藥領域的應用[J]. 羅丁,樊小農,石學敏.  遼寧中醫(yī)雜志. 2014(08)
[3]硫色鐮刀菌（Fusarium sulphureum）體外產毒條件的篩選[J]. 唐亞梅,薛華麗,畢陽,趙瑩,沈科萍,王毅.  食品科學. 2014(11)
[4]β-氨基丁酸結合殼聚糖處理對蘋果采后青霉病的防治效果與機理[J]. 張維,周會玲,袁仲玉,張春云,溫曉紅.  西北農林科技大學學報(自然科學版). 2013(10)
[5]植物UDP-糖基轉移酶生化特性和功能研究進展[J]. 姬向楠,何非,段長青,王軍.  食品科學. 2013(09)
[6]納升級反相液相色譜-串聯(lián)質譜法分析錦燈籠提取物中的蛋白質[J]. 于海洋,晏嘉澤,郭明,靳艷.  色譜. 2013(04)
[7]不同愈傷時間對低溫貯藏期間馬鈴薯塊莖采后病害及品質的影響[J]. 包改紅,畢陽,李永才,吳覺天,寇宗紅,葛永紅,王毅,王蒂.  食品工業(yè)科技. 2013(11)
[8]固相萃取-超高效液相色譜-質譜聯(lián)用技術檢測大鼠血漿中T-2毒素及其主要代謝產物[J]. 趙燕華,林妮妮,郭磊,陳佳,劉萬卉,謝劍煒.  分析化學. 2012(12)
[9]麻竹葉片蛋白質雙向電泳體系的建立[J]. 楊惠琴,喬桂榮,蔣晶,劉明英,姜彥成,卓仁英.  竹子研究匯刊. 2012(03)
[10]天山雪蓮UDP葡萄糖-類黃酮-3-O-葡萄糖基轉移酶基因的克隆及功能分析[J]. 唐亞萍,原慧,覃建兵.  生物工程學報. 2012(06)

博士論文
[1]殼聚糖和硅酸鈉對馬鈴薯塊莖干腐病的控制及其機理研究[D]. 李永才.蘭州大學 2007

碩士論文
[1]基于蛋白質組學的BTH處理對厚皮甜瓜果實成熟衰老的調控機理研究[D]. 李欣.甘肅農業(yè)大學 2014
[2]蠟梅脫氫抗壞血酸還原酶基因的克隆與功能初步分析[D]. 林靜.西南大學 2010



本文編號：3664825