滇重樓種源篩選與皂苷合成及相關(guān)基因鑒別
發(fā)布時(shí)間:2022-01-09 14:37
滇重樓(Paris polyphylla var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.)為延齡草科(Trilliaceae)重樓屬(Paris)多年生草本,是云南白藥等大型藥廠的重要原料。目前云南的滇重樓野生資源因過度采挖而被列入瀕危天然藥物,加上種源混雜、品質(zhì)良莠不齊、生長(zhǎng)速度慢等問題,遠(yuǎn)不能滿足醫(yī)藥市場(chǎng)的需求。因此篩選優(yōu)良種源,研究滇重樓皂苷累積規(guī)律,鑒別皂苷合成的相關(guān)基因,通過基因調(diào)控提高滇重樓皂苷含量,對(duì)促進(jìn)滇重樓產(chǎn)業(yè)發(fā)展、保護(hù)滇重樓野生資源、增加山區(qū)農(nóng)林經(jīng)濟(jì)收入及促進(jìn)農(nóng)林生態(tài)系統(tǒng)的良性循環(huán)等經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益方面均具有重要意義。本研究收集了云南普洱景東、玉溪澄江、大理劍川、麗江永勝、楚雄大姚、文山丘北、曲靖馬龍、昭通鎮(zhèn)雄等8個(gè)地理種源的滇重樓,篩選出了總皂苷含量最高且生長(zhǎng)速度較快的普洱景東種源作為生產(chǎn)和研究對(duì)象。通過測(cè)定其重樓皂苷含量,研究了不同組織器官、不同季節(jié)、不同地理種源滇重樓皂苷差異;在其含量最低、最高季節(jié)對(duì)其不同組織器官采樣進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,比對(duì)篩選出參與皂苷合成的關(guān)鍵候選基因,隨機(jī)對(duì)其中20個(gè)基因進(jìn)行了熒光定量PCR檢測(cè),并與皂苷含量進(jìn)行相關(guān)性...
【文章來源】:中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:163 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
皂苷的類型
第一章緒論12酶、鯊烯環(huán)氧酶、香葉二磷酸合成酶、鯊烯合成酶、環(huán)氧化鯊烯環(huán)化酶、羥化酶、2,6-O-β-糖苷酶、3-O-糖基轉(zhuǎn)移酶等(DavidLNetal.,2005)。圖1-2甾體皂苷合成通路(尹艷,2016)Fig.1-2SynthesisPathwayofSteroidalSaponins(Yinyan,2016)1.5.2三萜皂苷合成研究三萜皂苷又稱酸性皂苷,多數(shù)在甙元上帶有羧基,碳原子數(shù)為30個(gè),三萜類衍生物,三萜皂苷在五加科、石竹科、豆科、桔梗科等科屬中廣泛分布,其組成和含量與植
第一章緒論13物的遺傳、組織類型、生理狀況、環(huán)境因子和生長(zhǎng)年齡密切相關(guān)(陳莉,2004)。甲羥戊酸通路是三萜皂苷合成的必由通路(HenryMetal.,1992),如圖1-3。圖1-3三萜皂苷的生物合成通路Fig.1-3BiosyntheticPathwayofTriterpeneSaponins人參皂苷合成研究較清楚,根據(jù)人參皂苷元骨架可分為齊墩果烷型和達(dá)瑪烷型兩種(Dongetal.,2010;黎陽(yáng)等,2009),目前已從人參中分離得到的人參皂苷單體達(dá)到了90多種(AikjiangLetal.,2009)。人參皂苷合成的前體為2,3-氧化角鯊烯,其主要代謝方向有兩條:一條是皂苷類物質(zhì)代謝通路達(dá)瑪烷型皂苷(dammarane-typeginsenosides),最終生成齊墩果烷型皂苷(oleanane-typeginsenosides);另一條為植物甾醇類物質(zhì)合成通路(金士琨,2014)。張濤(2016)克隆人參CYP716A52v2和CYP716A53v2基因,并構(gòu)建了生態(tài)因子與皂苷含量、關(guān)鍵酶基因表達(dá)的相關(guān)關(guān)系。孫鳳陽(yáng)等(2013)從植物細(xì)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]文冠果地理種源變異及優(yōu)良種源篩選[J]. 于丹,畢泉鑫,趙陽(yáng),崔藝凡,句嬌,傅光輝,范思琪,陳夢(mèng)園,王利兵. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(02)
[2]不同生長(zhǎng)年限的6種重樓屬植物根莖中9種皂苷含量動(dòng)態(tài)累積比較[J]. 王林娜,胡培,楊光義,孫良學(xué),曹克紅,余輝亮. 中國(guó)藥師. 2018(12)
[3]三七皂苷合成及調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 李澤東,趙榮華,張兆傳,俞捷,顧雯,賀森,曹冠華. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(14)
[4]商陸水溶性浸出物、商陸皂苷甲含量變異規(guī)律與優(yōu)良種源篩選[J]. 周愷麟,呂偉旗,湯晟凌. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(04)
[5]不同生長(zhǎng)年限滇重樓營(yíng)養(yǎng)器官中皂苷的組織化學(xué)定位研究[J]. 劉濤,劉冬梅,楊生超,謝世清. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2017(10)
[6]當(dāng)歸不同藥用部位活性成分含量的分析研究[J]. 黃榮. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥. 2017(18)
[7]貴州不同居群滇重樓引種后種質(zhì)變化研究[J]. 吳平,周單單,段雪瀅,潘偉,沈昱翔. 綠色科技. 2017(15)
[8]轉(zhuǎn)錄組的測(cè)序方法及應(yīng)用研究概述[J]. 姚娜,劉秀明,董園園,王南,孟璐璐,李海燕. 北方園藝. 2017(12)
[9]紅外光譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)不同采收期滇重樓的定性定量分析[J]. 吳喆,張霽,金航,王元忠,張金渝. 光譜學(xué)與光譜分析. 2017(06)
[10]贛中地區(qū)麻櫟優(yōu)良種源初步篩選[J]. 陳康,渠勇建,周敏,張露華,成向榮. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(17)
博士論文
[1]山葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)錄組分析及白藜蘆醇調(diào)控機(jī)理研究[D]. 殷向靜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]紅花天冬氨酸代謝途徑關(guān)鍵酶基因的挖掘及功能鑒定[D]. 王艷芳.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析研究印楝和苦楝中檸檬苦素類化合物的合成[D]. 王煜煒.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2016
[4]杜仲種仁轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及FAD3基因的鑒定與功能研究[D]. 馮延芝.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2016
[5]人參2,3-氧化角鯊烯代謝途徑中關(guān)鍵酶的表達(dá)調(diào)控研究[D]. 金士琨.吉林大學(xué) 2014
[6]滇重樓甾體皂甙類有效成分超高壓提取及偏諾皂甙合成研究[D]. 張勁松.吉林大學(xué) 2007
碩士論文
[1]重樓不同部位藥用成分分析及SQS基因的原核表達(dá)分析[D]. 劉佳.中南民族大學(xué) 2015
[2]栽培滇重樓的分子鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)[D]. 劉曉萌.云南中醫(yī)學(xué)院 2014
[3]三七、西洋參中三萜皂苷合成關(guān)鍵酶基因的克隆及表達(dá)模式分析[D]. 牛云云.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2013
[4]重樓屬植物遺傳多樣性研究與品質(zhì)評(píng)價(jià)分析[D]. 辛本華.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]滇重樓鯊烯合酶和環(huán)阿屯醇合酶的基因克隆與序列分析[D]. 王進(jìn)波.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]三七皂苷生物合成途徑SS、DS基因的克隆和調(diào)控研究[D]. 石磊.昆明理工大學(xué) 2012
本文編號(hào):3578904
【文章來源】:中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:163 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
皂苷的類型
第一章緒論12酶、鯊烯環(huán)氧酶、香葉二磷酸合成酶、鯊烯合成酶、環(huán)氧化鯊烯環(huán)化酶、羥化酶、2,6-O-β-糖苷酶、3-O-糖基轉(zhuǎn)移酶等(DavidLNetal.,2005)。圖1-2甾體皂苷合成通路(尹艷,2016)Fig.1-2SynthesisPathwayofSteroidalSaponins(Yinyan,2016)1.5.2三萜皂苷合成研究三萜皂苷又稱酸性皂苷,多數(shù)在甙元上帶有羧基,碳原子數(shù)為30個(gè),三萜類衍生物,三萜皂苷在五加科、石竹科、豆科、桔梗科等科屬中廣泛分布,其組成和含量與植
第一章緒論13物的遺傳、組織類型、生理狀況、環(huán)境因子和生長(zhǎng)年齡密切相關(guān)(陳莉,2004)。甲羥戊酸通路是三萜皂苷合成的必由通路(HenryMetal.,1992),如圖1-3。圖1-3三萜皂苷的生物合成通路Fig.1-3BiosyntheticPathwayofTriterpeneSaponins人參皂苷合成研究較清楚,根據(jù)人參皂苷元骨架可分為齊墩果烷型和達(dá)瑪烷型兩種(Dongetal.,2010;黎陽(yáng)等,2009),目前已從人參中分離得到的人參皂苷單體達(dá)到了90多種(AikjiangLetal.,2009)。人參皂苷合成的前體為2,3-氧化角鯊烯,其主要代謝方向有兩條:一條是皂苷類物質(zhì)代謝通路達(dá)瑪烷型皂苷(dammarane-typeginsenosides),最終生成齊墩果烷型皂苷(oleanane-typeginsenosides);另一條為植物甾醇類物質(zhì)合成通路(金士琨,2014)。張濤(2016)克隆人參CYP716A52v2和CYP716A53v2基因,并構(gòu)建了生態(tài)因子與皂苷含量、關(guān)鍵酶基因表達(dá)的相關(guān)關(guān)系。孫鳳陽(yáng)等(2013)從植物細(xì)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]文冠果地理種源變異及優(yōu)良種源篩選[J]. 于丹,畢泉鑫,趙陽(yáng),崔藝凡,句嬌,傅光輝,范思琪,陳夢(mèng)園,王利兵. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(02)
[2]不同生長(zhǎng)年限的6種重樓屬植物根莖中9種皂苷含量動(dòng)態(tài)累積比較[J]. 王林娜,胡培,楊光義,孫良學(xué),曹克紅,余輝亮. 中國(guó)藥師. 2018(12)
[3]三七皂苷合成及調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 李澤東,趙榮華,張兆傳,俞捷,顧雯,賀森,曹冠華. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(14)
[4]商陸水溶性浸出物、商陸皂苷甲含量變異規(guī)律與優(yōu)良種源篩選[J]. 周愷麟,呂偉旗,湯晟凌. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(04)
[5]不同生長(zhǎng)年限滇重樓營(yíng)養(yǎng)器官中皂苷的組織化學(xué)定位研究[J]. 劉濤,劉冬梅,楊生超,謝世清. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2017(10)
[6]當(dāng)歸不同藥用部位活性成分含量的分析研究[J]. 黃榮. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥. 2017(18)
[7]貴州不同居群滇重樓引種后種質(zhì)變化研究[J]. 吳平,周單單,段雪瀅,潘偉,沈昱翔. 綠色科技. 2017(15)
[8]轉(zhuǎn)錄組的測(cè)序方法及應(yīng)用研究概述[J]. 姚娜,劉秀明,董園園,王南,孟璐璐,李海燕. 北方園藝. 2017(12)
[9]紅外光譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)不同采收期滇重樓的定性定量分析[J]. 吳喆,張霽,金航,王元忠,張金渝. 光譜學(xué)與光譜分析. 2017(06)
[10]贛中地區(qū)麻櫟優(yōu)良種源初步篩選[J]. 陳康,渠勇建,周敏,張露華,成向榮. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2017(17)
博士論文
[1]山葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)錄組分析及白藜蘆醇調(diào)控機(jī)理研究[D]. 殷向靜.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]紅花天冬氨酸代謝途徑關(guān)鍵酶基因的挖掘及功能鑒定[D]. 王艷芳.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]基于轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析研究印楝和苦楝中檸檬苦素類化合物的合成[D]. 王煜煒.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2016
[4]杜仲種仁轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及FAD3基因的鑒定與功能研究[D]. 馮延芝.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2016
[5]人參2,3-氧化角鯊烯代謝途徑中關(guān)鍵酶的表達(dá)調(diào)控研究[D]. 金士琨.吉林大學(xué) 2014
[6]滇重樓甾體皂甙類有效成分超高壓提取及偏諾皂甙合成研究[D]. 張勁松.吉林大學(xué) 2007
碩士論文
[1]重樓不同部位藥用成分分析及SQS基因的原核表達(dá)分析[D]. 劉佳.中南民族大學(xué) 2015
[2]栽培滇重樓的分子鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)[D]. 劉曉萌.云南中醫(yī)學(xué)院 2014
[3]三七、西洋參中三萜皂苷合成關(guān)鍵酶基因的克隆及表達(dá)模式分析[D]. 牛云云.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2013
[4]重樓屬植物遺傳多樣性研究與品質(zhì)評(píng)價(jià)分析[D]. 辛本華.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]滇重樓鯊烯合酶和環(huán)阿屯醇合酶的基因克隆與序列分析[D]. 王進(jìn)波.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]三七皂苷生物合成途徑SS、DS基因的克隆和調(diào)控研究[D]. 石磊.昆明理工大學(xué) 2012
本文編號(hào):3578904
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