豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是急性、高度傳染性豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea,PED）的致病原,可感染所有日齡的豬,并在哺乳仔豬中引起較高的死亡率。本研究主要對PEDV編碼的結構或非結構蛋白進行表達純化,并以此為檢測抗原建立敏感有效的血清學檢測方法,對感染或免疫PEDV后不同日齡豬體內的抗體消長規(guī)律進行監(jiān)測;同時以制備的抗PEDV的單抗為基礎,對PEDV入侵機制進行初步研究。根據(jù)PEDV G2毒株（GenBank accession no.KU558701）基因序列設計特異性引物,以其cDNA為模板分別擴增PEDVS1、E、ORF3C、非結構蛋白nsp1、nsp2 以及nsp3 中 Ac（Acidic domain）、ADRP（ADP-ribose-1-monophosphatase domain）功能域,克隆到真核或原核表達載體中,構建重組表達質粒,利用真核或原核表達系統(tǒng)表達相應蛋白,并進行層析純化,經SDS-PAGE檢測、Westernblot鑒定正確后,作為免疫原,免疫新西蘭大白兔,... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：129 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－３ＳＤＳ－ＰＡＧＥ檢測ＯＲＦ３Ｃ重組蛋白（Ａ）和Ｅ重組蛋白（Ｂ）的表迗??

Ｍ．?Ｍａｒｋｅｒ；?１．未誘導菌；２．誘導菌Ｉ；?３．未誘導菌ＩＩ；?４．誘導菌ＩＩ；??５．菌ＩＩ裂解上清；６．菌ＩＩ裂解沉淀??圖１－６ＳＤＳ－ＰＡＧＥ檢測ＡＤＲＰ重組蛋白的表達??Ｆｉｇ．?１?－６?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｔｈ

Ｍ．?Ｍａｒｋｅｒ；?１．流穿液；２．含２０?ｍＭ咪哩的洗滌液；３．含４０?ｍＭ咪哩的洗滌液；??４、５均是含８０?ｍＭ咪唑的洗滌液；６、７、８均是含５００ｍＭ咮唑的洗脫液??圖１－７重組蛋白ＡＤＲＰ的純化??Ｆｉｇ．?１－７?Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豬Delta冠狀病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬流行性腹瀉病毒多重RT-PCR檢測方法的建立及應用[J]. 韋學雷,梁青青,曹貝貝,張君濤,韓麗,蘭培英,胡慧.  中國獸醫(yī)學報. 2018(01)
[2]我國部分省份豬流行性腹瀉的流行病學監(jiān)測[J]. 張志,董雅琴,劉爽,吳發(fā)興,邵衛(wèi)星,李曉成.  中國動物檢疫. 2014(10)
[3]廣西豬流行性腹瀉流行病學調查[J]. 杜堅,蔣玉雯,白安斌,梁家幸,梁保忠,黃安國,姚瑞英,陳西寧.  動物科學與動物醫(yī)學. 2004(06)



本文編號：3488884