黃曲霉毒素是一種由曲霉屬分泌的強致癌、致突變物質(zhì),對生物安全和人類健康有巨大危害�；ㄉ哂小暗厣祥_花、地下結(jié)果”的特點,花生莢果與土壤直接接觸,極易受到黃曲霉毒素的污染,因此,對花生黃曲霉毒素污染的防控十分重要,急需找到安全有效的防控方法。生物防控因其成本較低、效果良好、對環(huán)境無二次污染而受到越來越多的關(guān)注。利用不產(chǎn)毒黃曲霉菌通過競爭抑制作用降低谷物中黃曲霉毒素含量被證明是一種有效的辦法。本研究將利用形態(tài)學鑒定結(jié)合PCR-RFLP（PCR-限制性片段長度多態(tài)性分析）技術(shù)從我國花生主產(chǎn)區(qū)河南當?shù)赝寥乐泻Y選出不產(chǎn)毒黃曲霉菌作為生防菌,應用固定化微生物技術(shù)制備溫度響應型固定化微球菌劑,并在其基礎(chǔ)上制備炭基雙層微球菌劑,對炭基微球菌劑的吸濕特性及在土壤中釋放機制進行了分析,通過田間實驗和盆栽實驗評估了生防菌劑在花生黃曲霉毒素污染上的防控效果。本文主要研究內(nèi)容如下:（1）篩選了不產(chǎn)毒黃曲霉菌作為生防菌并對其特性進行了評估利用形態(tài)學鑒定結(jié)合PCR-RFLP方法從從我國花生主產(chǎn)區(qū)河南當?shù)赝寥乐泻Y選出一株具有很強拮抗能力和定殖能力的不產(chǎn)毒黃曲霉菌,在大豆培養(yǎng)基和花生仁上對產(chǎn)毒菌產(chǎn)生的AFB_1... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 黃曲霉菌與黃曲霉毒素
        1.1.1 黃曲霉菌概述及其分布
        1.1.2 黃曲霉毒素概況
    1.2 花生黃曲霉毒素污染現(xiàn)狀
        1.2.1 花生黃曲霉毒素的污染途徑
        1.2.2 花生黃曲霉毒素污染的影響因素
    1.3 花生黃曲霉毒素污染的防控現(xiàn)狀
        1.3.1 田間綜合防控
        1.3.2 物理防控
        1.3.3 化學防控
        1.3.4 生物防控
    1.4 固定化微生物技術(shù)研究現(xiàn)狀
        1.4.1 固定化微生物的材料
        1.4.2 固定化微生物的方法
        1.4.3 固定化微生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)上的應用
    1.5 本項研究目的和意義
    1.6 主要研究內(nèi)容
    1.7 技術(shù)路線
第2章 不產(chǎn)毒黃曲霉菌的篩選及特性研究
    2.1 實驗材料和儀器
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌株分離與純化
        2.2.2 菌落形態(tài)篩選
        2.2.3 DNA提取與擴增
        2.2.4 afl R基因的PCR-RFLP分析
        2.2.5 菌株產(chǎn)毒分析
        2.2.6 菌絲生長及菌株拮抗能力
        2.2.7 甲霜靈對菌株活性影響
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 菌株形態(tài)
        2.3.2 基因序列分析
        2.3.3 PCR-限制性片段長度多態(tài)性分析(PCR-RFLP)
        2.3.4 菌株產(chǎn)毒分析
        2.3.5 菌絲生長及拮抗情況
        2.3.6 甲霜靈對不產(chǎn)毒黃曲霉活性的影響
    2.4 本章小結(jié)
第3章 溫度響應型智能菌劑的制備及控釋特性研究
    3.1 實驗材料和儀器
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 生防菌固定化微球制備條件的優(yōu)化方法
        3.2.1 固定化微球的制備
        3.2.2 固定化微球配方的優(yōu)化
        3.2.3 固定化微球性能的測定
    3.3 溫度響應型智能菌劑的制備及性質(zhì)測定方法
        3.3.1 溫度響應型固定化微球的制備
        3.3.2 溫敏水凝膠的最低臨界溫度(LCST)的測定
        3.3.3 溫度響應型固定化微球的表征
        3.3.4 溫度響應型固定化微球的性質(zhì)
        3.3.5 生防菌的釋放特性
        3.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    3.4 固定化微球最佳制備條件的確定
        3.4.1 單因素實驗
        3.4.2 正交實驗
    3.5 溫度響應型智能菌劑的特性分析
        3.5.1 壁材溶液的溫度敏感性
        3.5.2 溫度響應型固定化微球的基本理化特性
        3.5.3 溫度響應型固定化微球的表征
        3.5.4 溫度響應型固定化微球的性質(zhì)分析
        3.5.5 生防菌的釋放特性
    3.6 本章小結(jié)
第4章 炭基雙層固定化微球菌劑的制備及控釋特性研究
    4.1 實驗材料和儀器
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 雙層固定化微球的制備
        4.2.2 雙層固定化微球的性質(zhì)
        4.2.3 雙層固定化微球中生防菌在溶液中的釋放
        4.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 雙層固定化微球的基本理化特性
        4.3.2 雙層固定化微球的性質(zhì)
        4.3.3 溶液中生防菌的釋放特性
    4.4 本章小結(jié)
第5章 炭基生防菌劑吸濕特性及其在土壤中釋放機制研究
    5.1 實驗材料與方法
        5.1.1 實驗材料
        5.1.2 平衡含水量的測定
        5.1.3 平衡含水量的模型分析
        5.1.4 炭基菌劑在土壤中的釋放機制
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 吸濕特性
        5.2.2 平衡含水量的模型分析
        5.2.3 炭基菌劑土壤中的釋放機制
    5.3 本章小結(jié)
第6章 花生黃曲霉毒素生物防控的應用研究
    6.1 實驗材料和儀器
        6.1.1 實驗材料
        6.1.2 培養(yǎng)基
        6.1.3 主要試劑
        6.1.4 主要儀器
    6.2 盆栽實驗
    6.3 田間實驗
        6.3.1 實驗地塊
        6.3.2 生防菌劑的制備
        6.3.3 生防菌劑的施加
        6.3.4 土壤p H的測定
        6.3.5 土壤微生物檢測
        6.3.6 花生樣品的采集與檢測
        6.3.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
    6.4 盆栽實驗結(jié)果與分析
        6.4.1 施用菌劑對土壤中微生物數(shù)量的影響
        6.4.2 施用菌劑對土壤中不產(chǎn)毒黃曲霉菌的定殖和花生中黃曲霉毒素含量的影響
    6.5 田間實驗結(jié)果與分析
        6.5.1 土壤中生防菌株定殖分析
        6.5.2 花生的產(chǎn)量
        6.5.3 花生中黃曲霉毒素含量的分析
    6.6 本章小結(jié)
第7章 結(jié)論與展望
    7.1 主要結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 展望
參考文獻
作者簡介及在學期間研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3405368