發(fā)布時(shí)間：2017-04-27 09:12

  本文關(guān)鍵詞：哈爾濱地區(qū)部分豬場沙門菌耐藥性調(diào)查與防治，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：抗生素對于動(dòng)物與人類細(xì)菌性疾病的預(yù)防與治療具有重要作用。但隨著抗生素的廣泛使用,隨之而來的耐藥性問題,也給人類與動(dòng)物的健康帶來非常大的困擾。近年來,我國養(yǎng)豬業(yè)集約化、規(guī)�；杆侔l(fā)展,然而,由于一些豬場,用藥不科學(xué)、不規(guī)范,使得豬源性細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生也越來越嚴(yán)重,尤其是豬場常見菌沙門菌存在廣泛的耐藥性,使得臨床上對細(xì)菌性疾病的防治效果越來越差,耐藥性問題已成為豬場臨床抗菌治療的主要威脅,嚴(yán)重影響著豬類產(chǎn)品質(zhì)量,進(jìn)而威脅著人類的健康。合理使用抗生素來降低藥物的耐藥性,以及采取各種措施來清除耐藥性的影響越來越重要。本課題是為了探明哈爾濱地區(qū)部分豬場沙門菌的耐藥情況,為本地區(qū)豬場合理預(yù)防沙門菌病及其它細(xì)菌提供參考,并為有效減少沙門菌耐藥性的產(chǎn)生提出相應(yīng)方案。本研究從該哈爾濱地區(qū)10個(gè)豬場采集病料。進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和沙門菌的培養(yǎng)分離鑒定。對培養(yǎng)的細(xì)菌和分離的35株沙門菌采用微量稀釋法測定了氨曲南、厄他培南、亞胺培南、美羅培南、哌拉西林、氨芐西林、多黏菌素、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢毗肟、頭孢西丁、妥布霉素、環(huán)丙沙星、阿米卡星、慶大霉素、四環(huán)素、替吉環(huán)素、呋喃妥因18種抗生素的最小抑菌濃度,并判定其耐藥性：檢測了喹諾酮類、β-內(nèi)酰胺類、四環(huán)素類和大環(huán)內(nèi)酯類等14個(gè)耐藥基因。并且根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)和耐藥基因檢測結(jié)果,進(jìn)行了預(yù)防試驗(yàn)。研究結(jié)果表明：1.總菌對12種抗生素有很強(qiáng)的耐藥性,最敏感藥物為喹諾酮類環(huán)丙沙星：總菌存在多重耐藥現(xiàn)象。從總菌質(zhì)粒DNA中檢出β-內(nèi)酰胺類blaCTX-M, blaNDM-1;四環(huán)素類tetA、 tetB;大環(huán)內(nèi)酯類ermB、ermC、ermF和轉(zhuǎn)座子耐藥基因intI共8個(gè)。2.分離的35株沙門菌對18種抗生素均有不同程度耐藥,對氨芐西林全部耐藥.慶大霉素耐藥率92%；對替吉環(huán)素耐藥率最低,環(huán)丙沙星次之。多重耐藥的菌株集中在耐6～10種藥物之間。占多重耐藥菌株的94%。3.沙門菌中檢測出tetA、tetB、ermB、ermC、ermF、blaCTX-M、intl和blaNDM-1共8個(gè)與總菌相同的耐藥基因。檢出含tetA陽性菌株最多,檢出含blaNDM-1陽性菌株最少；檢出3個(gè)耐藥基因的菌株數(shù)最多；檢測出1個(gè)和6個(gè)耐藥基因的菌株的最少。均為1株。4.豬場使用乳酸環(huán)丙沙星與替吉環(huán)素以后,總發(fā)病率比2011年降低56.5%,比2012年降低70.7%：沙門菌病發(fā)病率比2011年降低85.2%,比2012年降低88.1%。綜上所述,哈爾濱地區(qū)部分豬場細(xì)菌及分離的沙門菌對多種抗生素具有耐藥性,有大量多重耐藥性和多種耐藥基因存在。根據(jù)結(jié)果,制定了豬場預(yù)防用藥方案,取得了良好的預(yù)防效果。此結(jié)果不僅為當(dāng)?shù)刎i場合理使用抗菌藥物,為降低沙門菌耐藥性的產(chǎn)生和傳遞提供了參考,也為有效控制細(xì)菌性疾病的發(fā)生奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：抗生素 耐藥性 耐藥基因 沙門菌 豬
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S852.61
【目錄】：

• 摘要10-11
• 英文摘要11-13
• 1 引言13-23
• 1.1 沙門菌病13-16
• 1.1.1 病原學(xué)13-15
• 1.1.2 流行病學(xué)15-16
• 1.1.3 豬沙門菌病16
• 1.2 病原菌的耐藥機(jī)理16-18
• 1.2.1 動(dòng)物病原菌的耐藥現(xiàn)狀16-17
• 1.2.2 細(xì)菌的耐藥機(jī)制17-18
• 1.3 沙門菌的耐藥機(jī)理18-22
• 1.3.1 沙門菌的耐藥現(xiàn)狀19
• 1.3.2 沙門菌的耐藥機(jī)制研究進(jìn)展19-22
• 1.4 本研究的目的和意義22-23
• 2 材料與方法23-33
• 2.1 試驗(yàn)動(dòng)物及樣品處理23
• 2.1.1 樣品來源23
• 2.1.2 參考菌株23
• 2.2 流行病學(xué)調(diào)查23
• 2.2.1 背景調(diào)查23
• 2.2.2 豬場流行病學(xué)調(diào)查23
• 2.3 主要試劑與儀器23-25
• 2.3.1 主要試劑23-24
• 2.3.2 主要儀器24-25
• 2.4 細(xì)菌的分離培養(yǎng)25
• 2.4.1 細(xì)菌的培養(yǎng)25
• 2.4.2 沙門菌的分離25
• 2.5 沙門菌的篩選25-26
• 2.5.1 革蘭氏染色25
• 2.5.2 氧化酶試驗(yàn)25-26
• 2.5.3 發(fā)酵試驗(yàn)26
• 2.6 沙門菌的鑒定26-27
• 2.6.1 生化試驗(yàn)26
• 2.6.2 沙門菌分離株的血清學(xué)試驗(yàn)26
• 2.6.3 人工感染及毒力的試驗(yàn)26
• 2.6.4 沙門菌分離株的16sPCR鑒定26-27
• 2.6.5 沙門菌血清群的鑒定27
• 2.7 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)27-30
• 2.7.1 質(zhì)控菌與抗菌藥物27-28
• 2.7.2 最小抑菌濃度測定28-29
• 2.7.3 抗藥譜的建立29
• 2.7.4 多重耐藥指數(shù)的測定29-30
• 2.8 耐藥基因的檢測30-31
• 2.8.1 質(zhì)粒DNA的提取30
• 2.8.2 目的基因PCR擴(kuò)增30
• 2.8.3 基因的克隆、鑒定及序列測定30-31
• 2.9 耐藥基因的轉(zhuǎn)移31-32
• 2.10 預(yù)防試驗(yàn)32
• 2.11 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)32-33
• 3 結(jié)果與分析33-51
• 3.1 豬場流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果33-34
• 3.2 臨床健康豬直腸沙門菌的分離鑒定結(jié)果34-35
• 3.2.1 沙門菌分離培養(yǎng)34
• 3.2.2 沙門菌分離株生化試驗(yàn)鑒定結(jié)果34
• 3.2.3 毒力試驗(yàn)結(jié)果34-35
• 3.2.4 沙門菌分離株P(guān)CR鑒定結(jié)果35
• 3.3 規(guī)模豬場臨床健康豬沙門菌帶菌情況35-37
• 3.3.1 沙門菌檢出率35-36
• 3.3.2 沙門菌血清型分布36-37
• 3.4 耐藥性檢測結(jié)果37-40
• 3.4.1 總菌的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-38
• 3.4.2 沙門菌的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-40
• 3.5 耐藥基因的檢測結(jié)果40-50
• 3.5.1 細(xì)菌耐藥基因檢測結(jié)果40-44
• 3.5.2 沙門菌耐藥基因檢測結(jié)果44-50
• 3.6 耐藥基因的轉(zhuǎn)移50
• 3.7 預(yù)防效果50-51
• 4 討論51-60
• 4.1 哈爾濱地區(qū)部分豬場沙門菌病流行病學(xué)分析51-52
• 4.2 豬源性細(xì)菌耐藥性的分析52-55
• 4.2.1 豬源性細(xì)菌對頭孢菌素類抗生素耐藥性的分析53
• 4.2.2 豬源性細(xì)菌對碳青霉烯類抗生素耐藥性的分析53
• 4.2.3 豬源性細(xì)菌對四環(huán)素類抗生素耐藥性的分析53
• 4.2.4 豬源性細(xì)菌對喹諾酮類抗生素耐藥性的分析53-54
• 4.2.5 豬源性細(xì)菌對氨基糖甙類抗生素耐藥性的分析54-55
• 4.3 豬源性沙門菌耐藥基因的分析55-57
• 4.3.1 豬源性沙門菌對四環(huán)素類抗生素的耐藥基因分析55
• 4.3.2 豬源性沙門菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥基因分析55-56
• 4.3.3 豬源性沙門菌對喹諾酮類抗生素的耐藥基因分析56
• 4.3.4 豬源性沙門菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥基因分析56
• 4.3.5 豬源性沙門菌多重耐藥性與Ⅰ類整合子的關(guān)系56-57
• 4.4 預(yù)防效果分析57
• 4.5 防治耐藥性產(chǎn)生的措施57-60
• 4.5.1 建設(shè)良好的環(huán)境57
• 4.5.2 合理使用疫苗免預(yù)防程序57-58
• 4.5.3 加強(qiáng)對細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測58
• 4.5.4 研究消除耐藥質(zhì)粒技術(shù)58
• 4.5.5 抗沙門菌藥物的合理使用58-59
• 4.5.6 合理使用抗生素替代品59-60
• 5 結(jié)論60-61
• 致謝61-62
• 參考文獻(xiàn)62-69
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與專利69

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本文編號(hào)：330335