巴貝斯蟲病是由頂復(fù)門孢子蟲綱梨形蟲目的100多種巴貝斯蟲引起的,目前已報(bào)道能感染人的巴貝斯蟲主要有B.microti、B.crassa、B.sp.MOI、B.divergens、B.duncani和B.venatorum六種,其中B.microti最為常見。人的巴貝斯蟲病常伴有高寄生蟲血癥,嚴(yán)重時(shí)會導(dǎo)致人死亡,該病無商業(yè)化疫苗,亦無可治愈藥物,臨床上常用阿奇霉素和阿托伐醌聯(lián)合用藥,但失敗率高并伴隨嚴(yán)重的不良反應(yīng)。全基因組信息表明巴貝斯蟲缺乏傳統(tǒng)的三羧酸循環(huán)（TCA cycle）,主要依靠無氧糖代謝產(chǎn)生ATP,因此乳酸脫氫酶（LDH）是該類寄生蟲能量供應(yīng)的關(guān)鍵糖酵解酶,有望成為一個(gè)藥物靶標(biāo)阻斷蟲體的能量供應(yīng),從而抑制寄生蟲的紅細(xì)胞內(nèi)增殖。本研究以田鼠巴貝斯蟲和東方巴貝斯蟲LDH為研究對象,通過解析其蛋白晶體結(jié)構(gòu),探討其LDH催化功能域及關(guān)鍵活性位點(diǎn),并闡明其催化反應(yīng)的分子機(jī)制及關(guān)鍵功能開關(guān)位點(diǎn),主要結(jié)果如下:（1）巴貝斯蟲LDH生物學(xué)功能鑒定。通過體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)棉酚和草氨酸鹽均在微摩爾范圍對B.microti有明顯抑制作用,小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)棉酚在體內(nèi)也能抑制蟲體生長。以B.mic... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

巴貝斯蟲的宿主特異性

巴貝斯蟲乳酸脫氫酶晶體結(jié)構(gòu)解析及催化分子機(jī)制研究3季節(jié)密切相關(guān)(圖1-2)(Estrada-PenaanddelaFuente2014,RodgersandMather2007)。在中國，田鼠巴貝斯蟲病無明顯季節(jié)性，地域分布廣泛，感染宿主會出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀，甚至導(dǎo)致死亡，一般宿主則多為隱性感染，成為傳播源(Brennanetal2016,FangandMcCullough2016,趙國平2018)。(Zhouetal.Parasites&Vectors2014,7:509)圖1-2我國蜱蟲及嚙齒動物宿主的分布Figure1-2DistributionofticksandrodentsinChina巴貝斯蟲生活史主要分為三個(gè)階段：①在哺乳動物紅細(xì)胞內(nèi)的裂殖生殖；②在蜱蟲腸道內(nèi)的配子生殖；③在蜱蟲唾液腺里的孢子生殖。巴貝斯蟲陽性蜱叮咬宿主時(shí)不斷將子孢子釋放到宿主體內(nèi)中，子孢子入侵宿主紅細(xì)胞后開始新一輪的裂殖生殖。此外，蟲體進(jìn)入蜱體內(nèi)發(fā)育繁殖后轉(zhuǎn)入蜱的卵巢，經(jīng)卵傳播傳給下一代，由蜱的幼蟲、若蟲或成蟲進(jìn)行傳播(圖1-3)(MehlhornandShein1984)；一般情況下，蜱蟲叮咬感染巴貝斯病臨床癥狀出現(xiàn)在第1至4周之間；對于輸血傳播的巴貝斯蟲病，時(shí)間可以延長到9周，在極端情況下甚至可以延長到6個(gè)月。巴貝斯蟲致病機(jī)理為蟲體在紅細(xì)胞內(nèi)繁殖，破壞紅細(xì)胞，導(dǎo)致溶血性貧血，并引起黃疸(MakindeandBobade1994)。研究表明巴貝斯蟲蟲體本身具有酶的作用，可使動物血液中出現(xiàn)大量擴(kuò)增血管的活性物質(zhì)(如激肽釋放酶、血管活性肽等)，引起動物的低血壓性休克綜合征，巴貝斯蟲還可激活感染動物的凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致血管擴(kuò)張、瘀血，引起組織和器官缺氧，損害感染動物的器官組織(CullenandLevine1987,Vasil"evaetal2008)。巴貝斯蟲感染常見的并發(fā)癥有急性呼吸窘迫綜合癥(ARDS)，且與本病的死亡率密切相關(guān)(Pupinetal2019)。此外，感染巴貝斯蟲的小鼠可引起淋巴細(xì)胞亞群的變化，從而產(chǎn)生免?

庖呦窒螅歡?鎪勞齪螅??逑?藎?血液稀薄如水，血凝不全，皮下組織、肌間結(jié)締組織和脂肪均呈黃色膠樣水腫狀(Poisneletal2013)。巴貝斯蟲病的并發(fā)癥包括呼吸窘迫綜合征、心力衰竭、中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥等，甚至在極端情況下死亡(Haapasaloetal2010)。此外，全血計(jì)數(shù)顯示因紅細(xì)胞過度溶解而引起各項(xiàng)指標(biāo)紊亂，包括紅細(xì)胞壓積低、血紅蛋白濃度低、血小板減少和網(wǎng)狀紅細(xì)胞增多；生化檢查顯示轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、間接膽紅素和乳酸脫氫酶活性增加(Haselbarthetal2007,Yu-Chunetal2018)。(WhiteandSuvorova,TrendsParasitol.2018)圖1-3巴貝斯蟲生活史Figure1-3LifecycleofBabesiaspp.該病病原學(xué)檢測方法主要是血涂片鏡檢(姬姆薩染色)觀察到外周血中有典型的蟲體為確診主要依據(jù)，此方法操作簡便，但需對不同血液原蟲的形態(tài)進(jìn)行鑒別診斷(Moltmannetal1983)。血清學(xué)檢測方法主要有間接免疫熒光法(IFA)、ELISA、乳膠凝集(LAT)和免疫膠體金(ICGT)等方法檢測，特異性較高，方便操作(Chisholmetal1978,Levinetal2016,Luoetal2012)；分子生物學(xué)檢測方法主要有RLB(反向線性斑

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3256972