黃連解毒湯（Huang-lian-Jie-du decoction,HLJDD）是清熱解毒的代表方劑,可用于治療胃腸道疾病。潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis,UC）是一種以結(jié)直腸黏膜及黏膜下層炎癥和潰瘍性病變?yōu)橹鞯难装Y性腸病。為探討HLJDD對急性UC的治療效果及其作用機(jī)制,本研究評價了HLJDD對小鼠急性UC模型的療效,并從分子水平對其部分作用機(jī)制進(jìn)行了研究。進(jìn)一步通過體內(nèi)藥效學(xué)實驗篩選了HLJDD抗?jié)冇行Р课?并探討了HLJDD及其有效部位對UC模型小鼠腸道菌群的影響。在此基礎(chǔ)上,結(jié)合代謝組學(xué)技術(shù)與分子模擬對接技術(shù),深入探討了HLJDD及其有效部位抗?jié)冏饔脵C(jī)制。方法及結(jié)果:（1）給予BABL/c小鼠3.5%葡聚糖硫酸鈉飲水使其連續(xù)自由飲用7天以建立小鼠急性UC模型,造模的同時每天分別灌胃高（9.2 g/kg）、中（4.6 g/kg）、低（2.3 g/kg）劑量的HLJDD進(jìn)行治療,并以柳氮磺胺吡啶（0.45 g/kg）為陽性對照藥物。試驗期間對各組小鼠臨床癥狀進(jìn)行疾病活動指數(shù)（Disease activity index,DAI）評分。實驗結(jié)束后,取各組小鼠血... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

HLJDD改善DSS誘導(dǎo)的小鼠急性UCFigure2-1HLJDDinterventionrelievesDSS-inducedUCinmice.

黃連解毒湯治療小鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎療效的評價及其作用機(jī)制研究31白組相比，模型組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)評分顯著升高（圖2-2B）。不同劑量HLJDD干預(yù)治療組小鼠結(jié)腸黏膜上皮僅有少量破損，腸絨毛大體結(jié)構(gòu)清晰可見，僅見黏膜層不同程度的炎性細(xì)胞浸潤（圖2-2A）。結(jié)果表明，與模型組相比，HLJDD干預(yù)治療可顯著降低結(jié)腸組織病理學(xué)評分（圖2-2B），且HLJDD-M組效果最佳（p<0.001）。說明HLJDD對DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸粘膜損傷具有顯著的保護(hù)作用。圖2-2HLJDD改善UC小鼠結(jié)腸病理學(xué)損傷Figure2-2HLJDDattenuatescolonicpathologicaldamageinacuteUCmice.注：A：各組小鼠結(jié)腸組織HE染色照片（200×）；B：組織病理學(xué)評分。數(shù)據(jù)以mean±SD表示，n=3。與空白組相比：###p<0.001；與模型組相比：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；ns表示無顯著性差異。Note:(A)Representativeimagesshowingcolonpathologicdamageswithhematoxylinandeosin(H&E)staining,(200×magnification).(B)Histologicalscoresofcolons.Dataareexpressedasthemean±SD,n=3pregroup.###p<0.001vs.NCgroup;*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001vs.modelgroup.3.3HLJDD對急性UC小鼠血漿細(xì)胞因子的作用取各組小鼠血漿進(jìn)行細(xì)胞因子檢測，結(jié)果表明，與空白組相比，模型組小鼠血漿IL-1β，TNF-α含量極顯著升高（p<0.001），IL-10含量極顯著降低（p<0.001）（圖2-3A-C），說明模型組小鼠體內(nèi)存在顯著的炎癥反應(yīng)。與模型組相比，不同劑量HLJDD干預(yù)治療均可顯著降低UC小鼠血漿IL-1β，TNF-α含量（p<0.001），HLJDD-H和HLJDD-M治療均可顯著升高血漿IL-10含量（p<0.01）（圖2-3），表明HLJDD具有顯著的抗炎活性，可通過抑制炎癥反應(yīng)治療DSS誘導(dǎo)的小鼠

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆博士學(xué)位論文32UC。圖2-3HLJDD對UC小鼠血漿細(xì)胞因子的影響Figure2-3EffectsofHLJDDonplasmacytokinesinUCmice注：各組小鼠血漿中IL-1β（A），TNF-α（B）和IL-10（C）含量水平。數(shù)據(jù)以mean±SD表示，n=5。與空白組相比：###p<0.001；與模型組相比：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；ns表示無顯著性差異。Note:TreatmentwithHLJDDdown-regulatedplasmaIL-1β(A),TNF-α(B),andup-regulatedIL-10(C)levelsinUCmice.Dataareexpressedasthemean±SD,n=5pergroup.###p<0.001vs.NCgroup;**p<0.01,***p<0.001vs.modelgroup.ns:nosignificant.3.4HLJDD對急性UC小鼠結(jié)腸氧化應(yīng)激參數(shù)的影響各組小鼠結(jié)腸組織勻漿抗氧化能力檢測結(jié)果表明，造模后模型組小鼠結(jié)腸組織勻漿氧化應(yīng)激產(chǎn)物NO，MDA含量顯著升高（p<0.001）（圖2-4A，B），抗氧化劑GSH含量及抗氧化酶SOD活力顯著降低（p<0.001）（圖2-4C，D），說明模型組小鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激水平顯著升高。給予不同劑量的HLJDD干預(yù)治療均可顯著升高抗氧化劑GSH含量及抗氧化酶SOD活力（p<0.01），顯著降低NO含量水平（p<0.05）（圖2-4A，C，D）。此外，不同劑量HLJDD治療組小鼠MDA含量水平均有降低趨勢，但僅HLJDD-M治療組差異顯著（p<0.001）（圖2-4）。該結(jié)果表明，HLJDD可通過抗氧化作用緩解DSS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激對小鼠腸道的損傷。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]黃連解毒湯中13種活性成分的HPLC檢測及其有效部位的篩選[J]. 楊麗宏,袁子文,紀(jì)鵬,張曉松,華永麗,魏彥明.  中草藥. 2019(16)
[2]VSL#3 can prevent ulcerative colitis-associated carcinogenesis in mice[J]. Chun-Sai-Er Wang,Wen-Bin Li,Hong-Ying Wang,Yi-Ming Ma,Xin-Hua Zhao,Hong Yang,Jia-Ming Qian,Jing-Nan Li.  World Journal of Gastroenterology. 2018(37)
[3]漢黃芩苷通過抑制PI3K/Akt/Nrf2/ARE通路逆轉(zhuǎn)SGC7901/cDDP細(xì)胞耐藥性[J]. 王麗君,王世廣,鄧同興.  生理學(xué)報. 2018(04)
[4]Relationship between intestinal microbiota and ulcerative colitis: Mechanisms and clinical application of probiotics and fecal microbiota transplantation[J]. Zhao-hua Shen,Chang-xin Zhu,Yong-Sheng Quan,Zhen-Yu Yang,Shuai Wu,Wei-Wei Luo,Bei Tan,xiao-Yan Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2018(01)
[5]中藥多成分藥代動力學(xué)研究:思路與方法[J]. 李川.  中國中藥雜志. 2017(04)
[6]Molecular mechanism of action of anti-tumor necrosis factor antibodies in inflammatory bowel diseases[J]. Ulrike Billmeier,Walburga Dieterich,Markus F Neurath,Raja Atreya.  World Journal of Gastroenterology. 2016(42)
[7]Overview of cytokines and nitric oxide involvement in immuno-pathogenesis of inflammatory bowel diseases[J]. Imene Soufli,Ryma Toumi,Hayet Rafa,Chafia Touil-Boukoffa.  World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics. 2016(03)
[8]Fecal microbiota transplantation broadening its application beyond intestinal disorders[J]. Meng-Que Xu,Hai-Long Cao,Wei-Qiang Wang,Shan Wang,Xiao-Cang Cao,Fang Yan,Bang-Mao Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2015(01)
[9]黃連解毒湯源出《肘后備急方》考辨[J]. 梅全喜.  時珍國醫(yī)國藥. 2013(11)
[10]Fluctuations in butyrate-producing bacteria in ulcerative colitis patients of North India[J]. Reena Kumari,Vineet Ahuja,Jaishree Paul.  World Journal of Gastroenterology. 2013(22)

碩士論文
[1]葛根芩連湯合異功散加味治療潰瘍性結(jié)腸炎大腸濕熱證的臨床研究[D]. 保繼瓊.甘肅中醫(yī)藥大學(xué) 2016



本文編號：3245054