發(fā)布時間：2021-06-10 15:42

　　土壤中的磷主要是以無機正磷酸鹽（Pi）的形式被植物吸收與利用。然而,土壤中能被植物直接吸收利用的有效磷很低,這也成為限制著植物的生長發(fā)育的主要因素之一。因此植物進化出一系列適應低磷脅迫的生理機制,其中就包括在缺磷條件下的植物葉綠體中,磷脂釋放無機態(tài)的磷,各種糖脂和硫脂[硫代異鼠李糖甘油二脂（sulfoquinovosyldiacylglycerol,SQDG）]會替代磷脂功能,以便適應缺磷環(huán)境。SQDG的合成途徑在擬南芥中已經得到證實:第一步:尿苷二磷酸葡萄糖（UDP-glucose,UDPG）與亞硫酸鹽合成尿苷二磷酸硫代異鼠李糖（UDP-sulfoquinovose,UDP-SQ）:第二步:UDP-SQ中磺基喹諾酮部分轉移到二酰甘油合成SQDG。第一步是在尿苷二磷酸硫代異鼠李糖合酶（SQD1）催化作用下進行,第二步由硫代異鼠李糖甘油二脂合酶（SQD2）催化反應。然而到目前為止,水稻中SQD1的生理功能還未有具體報道。本論文通過擬南芥尿苷二磷酸硫代異鼠李糖合酶基因AtSQD1在水稻基因組庫中找到了一個同源基因OsSQD1,利用OsSQD1的組織定位、基因完全缺失突變體、基因沉默RNAi... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：165 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１植物對碟素的利用（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔａｌ．，?１９９８）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｌａｎｔ?ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｏｉｌ?Ｐ?（Ｓｃｈａｃｈｔｍａｎ?ｅｔ?ａｌ．，?１９９８）??

圖１－３擬南芥、水稻、蘋果和毛果楊中ＰＨＴ家族進化樹分析（ＳｕｎｅｔａＬ２０１７）??Ｆｉｇ?１－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｅｓ?ｏｆ?ＰＨＴ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ?ｔｈａｌｉａｎａ?（Ａｔ），?Ｏｔｙｚａ?ｓａｌｉｖａ?（Ｏｓ），??Ｍａｉｎｓ?ｄｏｍｅｓｔｉｃａ?（Ｍｄ），?ａｎｄ?Ｐｏｐｕｌｕｓ?ｔｒｉｃｈｏｃａｒｐａ?（Ｐｔｒ）??３植物硫素營養(yǎng)的研究進展??

?缺磷響應基因０Ｓ５ＱＤＪ影響水稻生長發(fā)育和磷素吸收與利用的功能研宄???１．８．１表達載體的構建??根據附錄二中的方法提取水稻野生型總ＤＮＡ，在ＮＣＢＩ網站數據庫中查找并確??定使用仏風從）／翻譯起始位點ＡＴＧ前２０２７ｂｐ的啟動子，并利用ＤＮＡＭＡＮ軟件分析??其中的酶切位點。表達載體選擇１３００ＧＮ載體（圖３－１），其中可用的酶切位點為所ｗ／ＩＩＩ??和母７７Ｉ。使用Ｐｒｉｍｅｒ５．０軟件設計引物，上游引物序列為５?’??ＡＴＡＡＧＣＴＴＧＧＧＴＧＡＴＴＧＴＧＡＧＴＧＡＧＴ３?’?，?下游引物為?５?’??ＡＴＧＧＴＡＣＣＣＡＧＧＣＧＡＡＧＧＧＣＴＧＡＡＡＣ３，，弓丨物合成由金斯瑞公司完成，并使用該??引物以基因組ＤＮＡ為模板擴增目的片段。將ＰＣＲ獲得的啟動子序列連接到??克隆載體ｐＥＡＳＹ－ｂｌｕｎｔ上，酶切驗證且測序通過后，用限制性內切酶（／／／ｍ／ＩＩＩ和Ｋ／ｗＩ）??酶切，并用Ｔ４連接酶酶連的方法連接到表達載體１３００ＧＮ上。重組載體需經再次酶??切驗證，待測序通過后，可保菌待用，并電轉入農桿菌中，測序代用。ＰＣＲ產物的純??化和回收及大腸桿菌感受態(tài)的制備及質粒轉化分別見附錄五和附錄六，農桿菌感受態(tài)??的制備與轉化見附錄九，大腸桿菌和農桿菌的質粒提取見附錄十。??３５Ｓ??Ａｉ？ａｌ（?？？３７）?＼??（ｌｏｕｓｓ）?＼??ＡｉＭｌＩ?（１０２２０）?．?＼?￡？？ＲＩ?（？）??Ａ＇ｍａｌ?（！〇２２＜？）?＇ｖ＇?＼?ＮＯＳ??ＡｐａＵ?（９９２２）?｜?＼?ｊ?（２６３）??Ｈｙｇ?ＡｐａＵ?（８４０）??．？Ｖ？ａＵ（９６２〇）?（Ｕ６５）??．－Ｕｗｌ?（９＊４３）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物對磷缺乏的適應機理[J]. 王燕云,郭劍,陳小蘭.  云南民族大學學報(自然科學版). 2008(01)
[2]植物磷轉運蛋白基因及其表達調控的研究進展[J]. 王萍,陳愛群,余玲,徐國華.  植物營養(yǎng)與肥料學報. 2006(04)
[3]植物Pht1家族磷轉運子的分子生物學研究進展[J]. 楊存義,劉靈,沈宏,嚴小龍.  分子植物育種. 2006(02)
[4]植物根構型特性與磷吸收效率[J]. 嚴小龍,廖紅,戈振揚,羅錫文.  植物學通報. 2000(06)



本文編號：3222655