目的:棉花是重要的經(jīng)濟(jì)作物,中國是世界上最大的棉花生產(chǎn)和消費(fèi)國。新疆是我國最大的植棉省區(qū),棉花產(chǎn)業(yè)不僅是新疆農(nóng)民主要經(jīng)濟(jì)收入來源和新疆的經(jīng)濟(jì)支柱產(chǎn)業(yè),也與新疆穩(wěn)定和長治久安密切相關(guān)。黃萎病是棉花的主要病害,由于常年連作,新疆棉花黃萎病病害逐年加重,嚴(yán)重影響了棉花的產(chǎn)量和品質(zhì),制約著新疆棉花產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。棉花黃萎病是由大麗輪枝菌（Verticillium dahliae）引起的維管束病害,由于V.dahliae具有穩(wěn)定存在的微菌核結(jié)構(gòu),及其與寄主協(xié)同進(jìn)化過程中生理小種不斷地發(fā)生變異,導(dǎo)致棉花黃萎病難于進(jìn)行防控。由于V.dahliae致病分子機(jī)制的復(fù)雜性,人們對其研究仍處于探索階段。本研究通過對不同抗性棉花品種根系分泌物誘導(dǎo)后的V.dahliae轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行分析與比較,分離鑒定V.dahliae生長發(fā)育、早期侵染及其致病過程中發(fā)揮重要作用的基因并對其功能進(jìn)行研究,為揭示V.dahliae與宿主植物互作機(jī)制及致病分子機(jī)制奠定基礎(chǔ),以及為制定更好的策略對棉花黃萎病進(jìn)行防治提供依據(jù)。方法:（1）收集感病品種新陸早8號、耐病品種中植棉2號和抗病品種海7124的根系分泌物分別培養(yǎng)Vd991,分別收... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

V.dahliae侵染過程及侵染結(jié)構(gòu)--附著枝和侵染釘Figure1.1ObservationofrootcolonizationprocessandthespecificinfectionstructurehyphopodiumandpenetrationpegofVerticilliumdahliae.（Zhaoetal.，2016；金蕓等，2017）

轉(zhuǎn)錄組建庫測序原理圖

棉花不同抗性品種根系分泌物對黃萎病菌（V.dahliae）基因表達(dá)的影響17并耐病和抗病材料進(jìn)行后續(xù)根系分泌物的收集實(shí)驗(yàn)。l圖2.2新陸早8號、中植棉2號和海7124接種Vd991后的病害癥狀Figure2.2DiseasesymptomsofVd991infectiononXinluzao8,Zhongzhimian2andHai7124.圖示為接種20d后的照片。a：新陸早8號的病狀，b：中植棉2號的病狀，c：海7124的病狀，d：病情指數(shù)。用Duncan’smultiplerangetest分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不同大寫字母表示差異極顯著（p<0.01）。Thephotographwastakenat20dayspost-inoculation.a:DiseasesymptomsofVd991infectiononXinluzao8.b:DiseasesymptomsofVd991infectiononZhongzhimian2.c:DiseasesymptomsofVd991infectiononHai7124.d.DiseaseindexofVd991onXinluzao8(X),Zhongzhimian2(Z)andHai7124(H).Differentcapitallettersindicatesignificantdifferences(p<0.01)usingDuncan’smultiplerangetest.2.2.2RNA-seq質(zhì)量評估和轉(zhuǎn)錄組模式分析為了探索V.dahliae與棉花的相互作用機(jī)制，對不同抗感棉花根系分泌物培養(yǎng)的Vd991樣本進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序。如表2-2所示，去除低質(zhì)量的reads后，每個文庫獲得了13000000-22000000個cleanreads，累計(jì)長度為1.97-3.12Gb。每個文庫有11657068-19529825個cleanreads能夠唯一的定位到V.dahliae的參考基因組上。88.2%以上唯一定位的reads分布在外顯子上，0.2-0.3%分布在內(nèi)含子上，6.7%-11.6%分布在基因間的區(qū)域（表S1）。每個樣本的兩個生物學(xué)重復(fù)間FPKM分布的皮爾遜相關(guān)系數(shù)（R2）均在0.945-0.987之間（p<0.001），表明RNA-seq數(shù)據(jù)可靠，具有較好的重復(fù)性（附圖S1）。隨機(jī)選取8個基因（表2-2），利用qRT-PCR技術(shù)進(jìn)一步對RNA-seq結(jié)果的可靠性進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明這些基因在根

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]棉花大麗輪枝菌和向日葵大麗輪枝菌受兩種寄主誘導(dǎo)后的轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 范曉棟.石河子大學(xué) 2017
[2]大麗輪枝菌Fungaltrans轉(zhuǎn)錄因子VdFTF1調(diào)控致病性功能研究[D]. 張文琦.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[3]大麗輪枝菌致病相關(guān)基因VdNOP12及VdLHS1的功能分析[D]. 崔偉業(yè).中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[4]基于轉(zhuǎn)錄組測序篩選及克隆棉花抗黃萎病相關(guān)基因[D]. 邵冰欣.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[5]基于轉(zhuǎn)錄組和VIGS技術(shù)發(fā)掘棉花抗黃萎病相關(guān)基因[D]. 鄭永杰.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]不同品種煙草根系分泌物的組分分析與抗黑脛病的關(guān)系[D]. 邱文龍.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]大麗輪枝菌微菌核萌發(fā)的基因表達(dá)譜分析及相關(guān)基因功能驗(yàn)證[D]. 胡東芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[8]棉花黃萎菌致病力分化測定及其致萎毒素研究[D]. 王彥.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[9]綠色熒光蛋白標(biāo)記的大麗輪枝菌的獲得及其在棉花中侵染過程研究[D]. 趙鳳軒.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[10]棉花黃萎病菌致病力分化測定及其致萎毒素研究[D]. 張慧霞.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2008



本文編號：3219288