臭椿果實化學成分及其抗TMV活性
發(fā)布時間:2021-05-28 16:07
植物在進化過程中形成了很多抗病防御機制,其中一種是通過生成具有拮抗微生物活性的次生代謝物質來選擇性的抑制病原微生物。因此,可以直接從植物中分離出高效且對宿主毒性小的抗病毒成分用于防治素有“植物癌癥”之稱的植物病毒病。臭椿(Ailanthusaltissima(Mill.)Swingle)是苦木科(Simaroubaceae)臭椿屬(Ailanthus)中一種生長快速的藥用植物,其果實為翅果,具有通經、止痢、止血和抗菌等功效。前期研究結果表明臭椿果實提取物對煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)有很好的抑制作用,且尚未見對臭椿果實化學成分的抗病毒活性進行系統(tǒng)研究的報道。本文較為系統(tǒng)地對臭椿果實的化學成分及其抗TMV增殖活性進行研究,現(xiàn)將主要研究結果歸納如下。1)從臭椿果實甲醇提取物的氯仿萃取相提取物和正丁醇萃取相提取物中分離鑒定了 80個單體化合物,包括苦木素及其糖苷類化合物 21 個(1-21):chuglycoside A(1)、chuglycoside B(2)、chuglycoside C(3)、chuglycoside D(4)、chuglycosid...
【文章來源】:福建農林大學福建省
【文章頁數(shù)】:244 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-3臭椿果實正丁醇相提取物分離流程??Figure?2-3?Isolation?procedure?of??-BuOH?extract?of?Ailanthus?al?
正己烷相、氯仿相、正丁醇相和水相提取物配成終濃度為100?Mg/mL的供試溶液,??利用葉碟法結合間接ELISA法測定這些提取物對TMV在普通煙K326體內增殖??的抑制作用,結果如圖3-2所示。從圖中可以看出,在100?pg/mL濃度下,氯仿??相萃取物對TMV增殖有很強的抑制活性,抑制率達到93.4%;正丁醇相萃取物??也有較好的抑制活性,抑制率達到72.8%;這兩相萃取物的抑制活性均高于甲醇??提取物,抑制率為58.4%;水相萃取物的抑制活性較低,抑制率為31.0%;正己??烷相沒有表現(xiàn)出抑制活性。這些數(shù)據表明,臭椿果實甲醇提取物中有潛在的抗病??毒效果很好的活性成分,這些活性成分主要分布在氯仿萃取相和正丁醇萃取相提??取物中。??100.0?93?4??90.0?-??80.0?-?H?72.8??抑?7°.°?_?5”?■?_??!::?i?I?i??;;il?〇.〇?1?ll?—??甲醇提取物正己烷相?氯仿相?正丁醇相?水相??圖3-2不同提取物對TMV增殖的抑制活性??Figure?3-2?Inhibitory?activity?of?different?extracts?against?TMV?replication??3.3.2.2不同濃度下甲醇提取物對TMV增殖的抑制活性??將臭椿果實的甲醇提取物配成150、100、50、25和12.5?pg/mL這5個不同??濃度的供試溶液,利用葉碟法結合間接ELISA法測定這些濃度下的甲醇提取物??對TMV在普通煙K326體內增殖的抑制作用,結果如圖3-3所示。由圖3-3可??知
熒光形成熒光斑圈,植株中上部位的莖部和部分葉片上可觀察到清晰明顯的綠色??熒光斑點,表明GFP和TMV?CP已大量表達,TMV?CP能夠協(xié)助TMV擴散到??植株上方(圖4-2?control)。濃度為0.156?[xM的ailanthone處理組中,在接種葉??片的注射處周圍出現(xiàn)較多的綠色熒光,形成綠色熒光斑圈,且在植株上方的新生??葉片上出現(xiàn)很少量的綠色熒光小斑點,表明TMV己經擴散到植株上方,擴散程??度低于對照(圖4-2a)。濃度為0.313|iM的ailanthone處理組中,只在接種葉片??的注射處周圍出現(xiàn)少數(shù)幾個綠色熒光斑點,表明GFP的表達受到抑制,TMV增??殖量少(圖4-2b)。濃度為0.625卜iM的ailanthone處理組中
本文編號:3208345
【文章來源】:福建農林大學福建省
【文章頁數(shù)】:244 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
圖2-3臭椿果實正丁醇相提取物分離流程??Figure?2-3?Isolation?procedure?of??-BuOH?extract?of?Ailanthus?al?
正己烷相、氯仿相、正丁醇相和水相提取物配成終濃度為100?Mg/mL的供試溶液,??利用葉碟法結合間接ELISA法測定這些提取物對TMV在普通煙K326體內增殖??的抑制作用,結果如圖3-2所示。從圖中可以看出,在100?pg/mL濃度下,氯仿??相萃取物對TMV增殖有很強的抑制活性,抑制率達到93.4%;正丁醇相萃取物??也有較好的抑制活性,抑制率達到72.8%;這兩相萃取物的抑制活性均高于甲醇??提取物,抑制率為58.4%;水相萃取物的抑制活性較低,抑制率為31.0%;正己??烷相沒有表現(xiàn)出抑制活性。這些數(shù)據表明,臭椿果實甲醇提取物中有潛在的抗病??毒效果很好的活性成分,這些活性成分主要分布在氯仿萃取相和正丁醇萃取相提??取物中。??100.0?93?4??90.0?-??80.0?-?H?72.8??抑?7°.°?_?5”?■?_??!::?i?I?i??;;il?〇.〇?1?ll?—??甲醇提取物正己烷相?氯仿相?正丁醇相?水相??圖3-2不同提取物對TMV增殖的抑制活性??Figure?3-2?Inhibitory?activity?of?different?extracts?against?TMV?replication??3.3.2.2不同濃度下甲醇提取物對TMV增殖的抑制活性??將臭椿果實的甲醇提取物配成150、100、50、25和12.5?pg/mL這5個不同??濃度的供試溶液,利用葉碟法結合間接ELISA法測定這些濃度下的甲醇提取物??對TMV在普通煙K326體內增殖的抑制作用,結果如圖3-3所示。由圖3-3可??知
熒光形成熒光斑圈,植株中上部位的莖部和部分葉片上可觀察到清晰明顯的綠色??熒光斑點,表明GFP和TMV?CP已大量表達,TMV?CP能夠協(xié)助TMV擴散到??植株上方(圖4-2?control)。濃度為0.156?[xM的ailanthone處理組中,在接種葉??片的注射處周圍出現(xiàn)較多的綠色熒光,形成綠色熒光斑圈,且在植株上方的新生??葉片上出現(xiàn)很少量的綠色熒光小斑點,表明TMV己經擴散到植株上方,擴散程??度低于對照(圖4-2a)。濃度為0.313|iM的ailanthone處理組中,只在接種葉片??的注射處周圍出現(xiàn)少數(shù)幾個綠色熒光斑點,表明GFP的表達受到抑制,TMV增??殖量少(圖4-2b)。濃度為0.625卜iM的ailanthone處理組中
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