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表達(dá)新城疫病毒F蛋白傳染性喉氣管炎病毒的構(gòu)建及評價

發(fā)布時間:2021-04-11 19:41
  新城疫(Newcastle disease,ND)是禽類高度傳染性病毒性疾病,在全世界性范圍內(nèi)呈地方性流行。ND的病原體是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。NDV只有一個血清型,但具有眾多基因型。目前廣泛應(yīng)用的NDV La sota疫苗為基因II型,而我國目前主要流行強毒株為基因Ⅷ型NDV,F(xiàn)有疫苗雖然能夠?qū)颌蚇DV強毒株感染提供臨床保護,但不能有效的阻止其在雞體內(nèi)的復(fù)制和排毒,導(dǎo)致免疫雞群疫病的發(fā)生。因此,迫切需要研制針對基因Ⅷ型NDV強毒株的新型NDV疫苗。Fusion(F)蛋白是NDV的囊膜糖蛋白,也是NDV的主要保護性抗原,可插入病毒載體中作為活病毒載體疫苗進行應(yīng)用。傳染性喉氣管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)是雞的急性上呼吸道傳染病,病原是傳染性喉氣管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)。ILT的防制主要依靠嚴(yán)格的生物安全措施和疫苗免疫,商品化致弱活疫苗和表達(dá)ILTV抗原的病毒載體疫苗是目前控制ILT的主要疫苗,但存在毒力返強和保護效果不完全的缺... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:86 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

表達(dá)新城疫病毒F蛋白傳染性喉氣管炎病毒的構(gòu)建及評價


ILTV基因組示意圖,引自(Fuchsetal.,2007)

世界,情況,高致病力,活疫苗


圖 1.2 世界不同地區(qū) NDV 的暴發(fā)情況,引自(Ganar et al.,2014)Fig 1.2 The global scenario of NDV outbreaks in different parts of the world. This picture is cited from(Ganar et al.,2014).ND 是禽類高度傳染性病毒性疾病。據(jù)報道,ND 感染源來自多種具有不同易感性的鳥類。關(guān)于 ND 的暴發(fā)首次報道是在 1926 年的印尼(Kraneveld,1926),在次年英格蘭的新城再次出現(xiàn)(Doyle,1927),繼而連續(xù)在世界各地暴發(fā)。因為該病在印度的蘭尼克特暴發(fā)曾經(jīng)被稱為蘭尼克特病。隨著二十世紀(jì)初開始的大規(guī)模商業(yè)家禽養(yǎng)殖的蓬勃發(fā)展,ND 也開始聞名于世。ND 是一種在全世界性范圍內(nèi)呈地方性流行,在許多發(fā)展中國家流行(圖 1.2)(Ganar et al.,2014)。根據(jù)病原學(xué)的研究,ND 可分為三組:弱毒力(lentogenic)、中度毒力(mesogenic)和高致病力(velgenic)。高致病力的 ND 根據(jù)其對不同組織的嗜性可分為嗜神經(jīng)型和嗜內(nèi)臟性 ND(Alexander,2000)。當(dāng)某一地區(qū)發(fā)生了高致病力 ND 的流行,除了患病雞類 100%的死亡率,其它嚴(yán)格的防疫制度也會對當(dāng)?shù)仞B(yǎng)禽業(yè)造成巨大的沖擊。從而對該地區(qū)的貿(mào)易限制和禁運造成重大影響。ND 的病原體是新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)。通過免疫可以預(yù)防 ND 的暴發(fā),目前市場上存在多種商品化的活疫苗和滅活疫苗(Mebatsion et al.,2002)。新型熱穩(wěn)定性 NDV疫苗更易于保存和運輸。在 2013 年發(fā)布的美國國家紐卡斯?fàn)柤膊」芾碛媱澙锇?NDV 防疫方案。具體地:肉雞在 1 d 免疫活疫苗,然后在第 14 d 通過飲用水二次免疫。蛋雞首先接種活疫苗,然后通過肌內(nèi)或皮下途徑接種滅活疫苗。ND 診斷需要密切監(jiān)測體征和癥狀,以免誤診(Lamb and

雞胚,分離鑒定,樣品值


3) 每孔加入100 μL顯色液,室溫(22~27℃)孵育30min;每孔加入1405 nm下讀值。品的S/P值大于等于0.5,則樣品為陽性。P=(樣品值-陰性樣品值)/(陽性樣品值-陰性樣品值)CR 檢測排毒方法參考 2.1.10。 數(shù)據(jù)分析用 GraphPad Prism 5 software (GraphPad Software Inc.,La Jolla,CA,據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差,并用學(xué)生分布檢驗分析結(jié)果,如果 p 值<0果ILTV 分離結(jié)果12 年 3 月在黑龍江省 IBV 流行病學(xué)調(diào)查工作中采集的咽拭子樣品處理傳 3 代后,發(fā)現(xiàn)雞胚 CAM 明顯變厚,CAM 出現(xiàn)明顯痘斑(圖 2.1A),取雞胚 CAM,提取病毒基因組為模板,使用 ICP4 檢測引物,擴增產(chǎn)泳檢測,特異性條帶的大小為 446 bp 的(圖 2.1B)。AB


本文編號:3131846

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