新城疫（Newcastle disease,ND）是禽類高度傳染性病毒性疾病,在全世界性范圍內(nèi)呈地方性流行。ND的病原體是新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）。NDV只有一個血清型,但具有眾多基因型。目前廣泛應用的NDV La sota疫苗為基因II型,而我國目前主要流行強毒株為基因Ⅷ型NDV。現(xiàn)有疫苗雖然能夠?qū)颌蚇DV強毒株感染提供臨床保護,但不能有效的阻止其在雞體內(nèi)的復制和排毒,導致免疫雞群疫病的發(fā)生。因此,迫切需要研制針對基因Ⅷ型NDV強毒株的新型NDV疫苗。Fusion（F）蛋白是NDV的囊膜糖蛋白,也是NDV的主要保護性抗原,可插入病毒載體中作為活病毒載體疫苗進行應用。傳染性喉氣管炎（Infectious laryngotracheitis,ILT）是雞的急性上呼吸道傳染病,病原是傳染性喉氣管炎病毒（Infectious laryngotracheitis virus,ILTV）。ILT的防制主要依靠嚴格的生物安全措施和疫苗免疫,商品化致弱活疫苗和表達ILTV抗原的病毒載體疫苗是目前控制ILT的主要疫苗,但存在毒力返強和保護效果不完全的缺... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

ILTV基因組示意圖，引自（Fuchsetal.，2007）

圖 1.2 世界不同地區(qū) NDV 的暴發(fā)情況，引自（Ganar et al.，2014）Fig 1.2 The global scenario of NDV outbreaks in different parts of the world. This picture is cited from（Ganar et al.，2014）.ND 是禽類高度傳染性病毒性疾病。據(jù)報道，ND 感染源來自多種具有不同易感性的鳥類。關(guān)于 ND 的暴發(fā)首次報道是在 1926 年的印尼（Kraneveld，1926），在次年英格蘭的新城再次出現(xiàn)（Doyle，1927），繼而連續(xù)在世界各地暴發(fā)。因為該病在印度的蘭尼克特暴發(fā)曾經(jīng)被稱為蘭尼克特病。隨著二十世紀初開始的大規(guī)模商業(yè)家禽養(yǎng)殖的蓬勃發(fā)展，ND 也開始聞名于世。ND 是一種在全世界性范圍內(nèi)呈地方性流行，在許多發(fā)展中國家流行（圖 1.2）（Ganar et al.，2014）。根據(jù)病原學的研究，ND 可分為三組：弱毒力（lentogenic）、中度毒力（mesogenic）和高致病力（velgenic）。高致病力的 ND 根據(jù)其對不同組織的嗜性可分為嗜神經(jīng)型和嗜內(nèi)臟性 ND（Alexander，2000）。當某一地區(qū)發(fā)生了高致病力 ND 的流行，除了患病雞類 100%的死亡率，其它嚴格的防疫制度也會對當?shù)仞B(yǎng)禽業(yè)造成巨大的沖擊。從而對該地區(qū)的貿(mào)易限制和禁運造成重大影響。ND 的病原體是新城疫病毒（Newcastle Disease Virus，NDV）。通過免疫可以預防 ND 的暴發(fā)，目前市場上存在多種商品化的活疫苗和滅活疫苗（Mebatsion et al.，2002）。新型熱穩(wěn)定性 NDV疫苗更易于保存和運輸。在 2013 年發(fā)布的美國國家紐卡斯爾疾病管理計劃里包括了 NDV 防疫方案。具體地：肉雞在 1 d 免疫活疫苗，然后在第 14 d 通過飲用水二次免疫。蛋雞首先接種活疫苗，然后通過肌內(nèi)或皮下途徑接種滅活疫苗。ND 診斷需要密切監(jiān)測體征和癥狀，以免誤診（Lamb and

3） 每孔加入100 μL顯色液，室溫（22~27℃）孵育30min；每孔加入1405 nm下讀值。品的S/P值大于等于0.5，則樣品為陽性。P=（樣品值-陰性樣品值）/（陽性樣品值-陰性樣品值）CR 檢測排毒方法參考 2.1.10。 數(shù)據(jù)分析用 GraphPad Prism 5 software （GraphPad Software Inc.，La Jolla，CA，據(jù)表示為平均值±標準偏差，并用學生分布檢驗分析結(jié)果，如果 p 值<0果ILTV 分離結(jié)果12 年 3 月在黑龍江省 IBV 流行病學調(diào)查工作中采集的咽拭子樣品處理傳 3 代后，發(fā)現(xiàn)雞胚 CAM 明顯變厚，CAM 出現(xiàn)明顯痘斑（圖 2.1A），取雞胚 CAM，提取病毒基因組為模板，使用 ICP4 檢測引物，擴增產(chǎn)泳檢測，特異性條帶的大小為 446 bp 的（圖 2.1B）。AB


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