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番茄InDel分子標記的開發(fā)與果實心室數(shù)量主效QTL lcn2.2的精細定位

發(fā)布時間:2020-01-19 19:04
【摘要】:番茄(Solanum lycopersicum)果實重量和形狀是重要的商品品質(zhì)性狀,也是番茄育種的重要目標性狀。番茄果實重量和形狀都與果實心室數(shù)量有關(guān)。在馴化過程中,番茄果實心室數(shù)量發(fā)生了顯著的變化,因而成為番茄馴化綜合特征性狀(domestication syndrome traits)之一。因此,研究番茄果實心室數(shù)量形成的遺傳基礎(chǔ),將有助于闡明番茄馴化和果實發(fā)育的分子機制,同時為育種提供理論依據(jù),具有重要的科學意義和育種應(yīng)用價值。本研究以T909(多心室)分別與Heinz1706(少心室)和LA1589(少心室)雜交構(gòu)建的F2和BC1S1群體為研究對象,利用QTL-seq和傳統(tǒng)QTL定位技術(shù)定位番茄果實心室數(shù)量主效QTLs,并利用交換單株后代鑒定試驗對主效QTL lcn2.2(locule number 2.2)進行了精細定位。本研究還利用番茄參考基因組、醋栗番茄LA1589、番那利番茄LA0716以及多份番茄重測序的結(jié)果,開發(fā)出了一套InDel分子標記,并利用24份常用的番茄材料進行驗證。獲得的主要結(jié)果如下:1.開發(fā)了1651個InDel分子標記。通過比對番茄Heinz1706、LA1589、LA0716及其它已經(jīng)重測序番茄的基因組序列,找出InDel,利用軟件Primer3設(shè)計引物,以24份常用番茄材料的基因組DNA為模板進行PCR,然后進行3%瓊脂糖凝膠電泳檢測,共篩選出1651個InDel分子標記。這些InDel分子標記在1至12號染色體上的數(shù)量依次為:85、233、150、136、78、213、120、132、133、125、104和142個。這些標記中,在8個野生番茄材料中具有多態(tài)性的標記有1317個,占79.8%;在14個普通番茄材料中具有多態(tài)性的標記有912個,占55.2%;在野生番茄材料和普通番茄材料之間具有多態(tài)性的標記有1638個,占99.2%。與已報道的番茄InDel分子標記相比,該套InDel標記具有以下3個特點:經(jīng)過了24份常用的涵蓋10個種(species)的番茄材料驗證,可參考性比較大;使用方便,可用3%瓊脂糖凝膠電泳檢測;栽培番茄中多態(tài)性比較高。這些特點將有助于其應(yīng)用于番茄遺傳育種。2.在普通番茄材料T909中發(fā)現(xiàn)了一個果實心室數(shù)量主效QTL lcn2.2。從F2群體220株中,選取果實心室最多和最少的各20株,將其基因組DNA等量混合,組成兩個混池,與兩個親本分別進行重測序。利用QTL-seq分析,在2號染色體末端發(fā)現(xiàn)存在控制果實心室數(shù)量的主效QTL。利用2號染色體上的InDel分子標記對BC1S1群體402株進行基因型分析,結(jié)合傳統(tǒng)QTL定位分析,在2號染色體上發(fā)現(xiàn)了兩個控制果實心室數(shù)量的主效QTL:lc和lcn2.2。其中,lcn2.2位于2號染色體上58.7 52.9 Mb區(qū)域內(nèi),其遺傳貢獻率(R2值)為0.238。3.將lcn2.2精細定位到345 kb的區(qū)域,該區(qū)域編碼41個基因。利用從BC1和BC1S1群體中篩選到的交換位點在2號染色體上58.7 52.9 Mb區(qū)域內(nèi)的交換單株,進行后代鑒定,將lcn2.2精細定位到分子標記C02M51897和C02M52241之間約345 kb的區(qū)域內(nèi),物理位置為SL2.50ch02:51,897,315-52,241,826。根據(jù)番茄參考基因組基因注釋ITAG 2.40版本,該區(qū)域編碼41個基因。
【學位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S641.2
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本文編號:2571181

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