發(fā)布時間：2018-03-14 09:17

  本文選題：犬乳腺腫瘤　切入點：Wnt信號通路　出處：《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：乳腺腫瘤是母犬高發(fā)的腫瘤性疾病。研究表明,在人及動物乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展過程中,Wnt信號通路的激活影響癌細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。目前關(guān)于犬乳腺腫瘤Wnt信號通路的研究僅見β-連環(huán)蛋白、細(xì)胞周期素D1等少數(shù)幾個因子的報道。本研究對犬乳腺腫瘤中Wnt信號通路分子的表達(dá)情況進(jìn)行分析。本研究對106例犬乳腺腫瘤樣本進(jìn)行了組織病理學(xué)分類和分級評估,然后根據(jù)分類亞型和分級選取了35例乳腺腫瘤樣本,利用RT2 Profiler PCR Array技術(shù)對Wnt信號通路的30個相關(guān)因子進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄表達(dá)檢測。利用免疫組化染色檢測了106例樣本中p-連環(huán)蛋白和細(xì)胞周期素D1在乳腺腫瘤組織細(xì)胞中的亞細(xì)胞分布變化；利用免疫印跡法檢測了15例樣品中β-連環(huán)蛋白、LEF1、TCF7、Axin2和細(xì)胞周期素D1的蛋白表達(dá)水平。還針對31例樣本的p-連環(huán)蛋白第二外顯子是否突變進(jìn)行了測序分析。病理分類和分級評估顯示,106例乳腺腫瘤組織樣品包括36例良性腫瘤(分為4個亞型)和70例惡性腫瘤(分為10個亞型)。惡性腫瘤中1級32例,Ⅱ級27例,Ⅲ級7例,肉瘤4例。Wnt信號通路的配體及拮抗分子(WNT5A、WNT3、DKK1、SFRP1)、受體(FZD3、FZD5、FZD7)、p-連環(huán)蛋白、下游轉(zhuǎn)錄因子(LEF1、TCF7)和目的基因(MMP7、細(xì)胞周期素D1)在不同病理學(xué)分級的乳腺腫瘤組織中的表達(dá)都有不同程度的升高。與正常乳腺組織相比,DKK1、SFRP1、FZD3、β-連環(huán)蛋白、LEF1在高惡性腫瘤中的表達(dá),WNT3、WNT5A、FZD5在低惡性腫瘤中的表達(dá),以及LEF1、MMP7在良性腫瘤中的表達(dá)均顯著升高。WNT5A、DKK1、SFRP1、FZD3、β-連環(huán)蛋白、LEF1在癌和惡性肌上皮瘤(CMM)這一亞型中的表達(dá)顯著高于正常乳腺組織。DKK1、SFRP1在CMM中的表達(dá)與其他亞型乳腺腫瘤相比有顯著差異。所有乳腺腫瘤樣品中p-連環(huán)蛋白在細(xì)胞膜上的表達(dá)較正常乳腺組織顯并下降,而92.5%的樣本中β-連環(huán)蛋白在細(xì)胞漿內(nèi)積聚。細(xì)胞周期素D1在80%的乳腺腫瘤樣本中的表達(dá)高于正常乳腺組織;同時其在惡性腫瘤組織中的表達(dá)顯著高于良性腫瘤。免疫印跡檢測顯示,15例樣本中5例高惡性腫瘤中p-連環(huán)蛋白、LEF1、TCF7、Axin2、細(xì)胞周期素D1的表達(dá)均比止常乳腺組織中的表達(dá)增多。此外,31例樣本中僅有1例檢測到β-連環(huán)蛋白第3外顯子有點突變。上述研究表明,Wnt信號通路在犬乳腺腫瘤組織中呈現(xiàn)異�；罨�,從胞外配體信號、胞漿內(nèi)信號傳遞因子至細(xì)胞核內(nèi)靶基因的基因表達(dá)和蛋白表達(dá)方面均有表現(xiàn)。在mRNA表達(dá)水平異常的Wnt信號通路分子中,上調(diào)表達(dá)的DKK1分子有作為犬乳腺腫瘤分子診斷和靶向治療的生物標(biāo)記物的潛能。本研究也為犬乳腺腫瘤作為人乳腺癌研究模型提供了很好的數(shù)據(jù)支持。
[Abstract]:Breast cancer is a malignant disease of high incidence of female. The results show that the occurrence and development of breast cancer in human and animal, the activation of the Wnt signaling pathway affect cancer cell proliferation, invasion and metastasis. The canine breast tumor Wnt signal pathway of only beta catenin, cyclin D1 and a few factor reported. This study was performed to analyze the expression of Wnt signaling pathway in canine mammary tumor. In this study, the histopathological classification and grading of 106 cases of canine breast tumor samples, then according to the classification of subtypes and grading chose 35 cases of breast tumor samples, using RT2 Profiler PCR Array 30 the correlation factor of the Wnt signaling pathway of transcription expression. Immunohistochemical staining was used to detect 106 cases in the sample of p- catenin and cyclin D1 in breast cancer cells in Asia 鑳?yōu)鍒嗗竷鍙樺寲锛涘埄鐢ㄥ厤鐤嵃杩规硶妫�嫻嬩簡15渚嬫牱鍝佷腑尾-榪炵幆铔嬬櫧,LEF1,TCF7,Axin2鍜岀粏鑳?yōu)鍛ㄦ湡绱燚1鐨勮泲鐧借〃杈炬按騫，

本文編號：1610566