本文關(guān)鍵詞：PRV和PCV2混合感染仔豬致病特點及豬偽狂犬病防控技術(shù)研究　出處：《揚州大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：豬偽狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV)和豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)都能使豬發(fā)病和產(chǎn)生免疫抑制,二者混合感染引起發(fā)病豬病情加重及豬場重大經(jīng)濟(jì)損失,但二者混合感染導(dǎo)致機(jī)體損傷及致病的機(jī)理還不清楚。深入研究豬圓環(huán)病毒2型脅迫下豬偽狂犬病防控機(jī)制,能為種豬場豬偽狂犬病凈化提供理論支持。本試驗通過人工單獨和混合感染PRV和PCV2,通過分離病毒、熒光定量PCR以及血液生理生化指標(biāo)和血清感染抗體的測定,研究PRV和PCV2混合感染的致病機(jī)制；并對云南省72家規(guī)模豬場進(jìn)行了豬偽狂犬病凈化綜合防控技術(shù)的研究。1.PRV和PCV2混合感染仔豬的臨床病理學(xué)研究PRV和PCV2都是豬的重要傳染病。PRV可以引起豬的繁殖障礙及呼吸道疾病；PCV2引起豬的斷奶后多系統(tǒng)消耗綜合征、繁殖障礙、皮炎與腎病綜合征及呼吸道病綜合征等多種疾病。本實驗通過人工單獨感染PRV、單獨感染PCV2、混合感染PRV和PCV2,對感染仔豬后出現(xiàn)的臨床癥狀、病理變化進(jìn)行觀察。結(jié)果表明：混合感染PRV和PCV2的仔豬出現(xiàn)的病理癥狀比單獨感染病毒產(chǎn)生的癥狀嚴(yán)重。PRV單獨感染仔豬表現(xiàn)為特有的“發(fā)熱-神經(jīng)癥狀-奇癢-嘔吐(腹瀉)”癥狀；PCV2單獨感染仔豬表現(xiàn)為“發(fā)熱-呼吸困難-消瘦-貧血”等多系統(tǒng)功能衰竭綜合癥；而PRV和PCV2混合感染仔豬表現(xiàn)為“發(fā)熱-消瘦-神經(jīng)衰竭-嘔吐-死亡”等特征性臨床癥狀；單獨感染PRV或PCV2組的仔豬沒有出現(xiàn)死亡,而混合感染PRV和PCV2組的仔豬在感染后第14d全部死亡。顯微觀察可見,攻毒后第3d-35d,感染仔豬的心、肝、脾、肺、腎、淋巴結(jié)和小腦均出現(xiàn)明顯的顯微病理變化�；旌细腥咀胸i的組織病理變化要比單感染PRV或PCV2的病變嚴(yán)重,單感染PRV比單獨感染PCV2仔豬的顯微病理變化嚴(yán)重,對照組無病理變化。2.人工感染PRV和PCV2仔豬組織器官病毒載量消長規(guī)律研究通過實時熒光定量PCR方法,對單獨感染PRV或PCV2組,混合感染PRV和PCV2組,在攻毒后第3、7、14、21、35d,隨機(jī)取2頭仔豬宰殺,取心、肝、脾、肺、腎、腹股溝淋巴結(jié)、小腦7個組織器官；采集感染仔豬的血液、肛門拭子,鼻拭子進(jìn)行病毒載量測定,分析樣品中的帶毒情況及排毒變化規(guī)律。結(jié)果：7個組織器官混合感染組的組織病毒載量比單獨感染PRV組或PCV2組高,PRV的載量比PCV2高；病毒載量由高到低依次為肺臟、腹股溝淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、腎臟、小腦、心臟。其中混合感染組PRV病毒載量在第14d最高,單獨感染PRV組的病毒載量在第7天最高；單獨感染PCV2組的病毒載量在第14天最高；結(jié)合感染豬的病理變化分析表明,病毒載量越高仔豬表現(xiàn)臨床癥狀越明顯,組織器官損傷越嚴(yán)重。混合感染組的病毒載量最高,發(fā)病最嚴(yán)重并出現(xiàn)仔豬死亡,組織器官嚴(yán)重?fù)p傷。對感染組仔豬的血液、肛門拭子、鼻拭子中的載毒量測定發(fā)現(xiàn),混合感染組和PRV單獨感染組的載毒量在感染后第7d-14d處于較高水平；而PRV單獨感染組在感染中后期持續(xù)排毒；PCV2單獨感染組的血液中病毒載量最高、出現(xiàn)病毒的時間最早,但是感染后期排毒水平較低,可見PCV2感染是在感染早中期對外排毒嚴(yán)重,感染后期對外排毒減少。3.PRV和PCV2混合感染對仔豬免疫抑制影響的研究采集感染病毒仔豬血液,應(yīng)用ELISA方法檢測血清中IL-4、IL-6、IL-10和IFN-γ四種細(xì)胞因子、補體C3、C4、IgG的含量和紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性細(xì)胞及血小板的數(shù)量。結(jié)果：與單獨感染PRV或PCV2組比較,混合感染PRV和PCV2組的IL-4、IL-10和IFN-γ效價在感染后第3-14d呈上升趨勢,并都高于2個單獨感染組；IL-6在第0-3d快速下降,低于單獨感染PRV組；表明在感染早期混合感染組仔豬的體液和細(xì)胞免疫都參與了抗病毒的反應(yīng)。混合感染組的C3效價在第0-3d上升,第7,21d下降,并明顯低于2個單獨感染組； C4效價呈上升趨勢,但明顯低于2個單獨感染組的C4效價�；旌细腥窘M的免疫球蛋白IgG含量在0-14d均低于2個單獨感染組,說明混合感染組的仔豬在感染前期,其免疫系統(tǒng)就已受到抑制�；旌细腥窘M的紅細(xì)胞、血紅蛋白、中性粒細(xì)胞數(shù)量均高于單獨感染PCV2組和PRV組；感染仔豬的血清抗體檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),混合感染PRV和PCV2組中,抗PRV的抗體顯著低于單獨感染PRV組,抗PCV2抗體與單獨感染PCV2的抗PCV2抗體無差異性。以上結(jié)果表明,混合感染造成的免疫抑制比單獨感染組的嚴(yán)重。4.PRV和PCV2混合感染豬偽狂犬病防控技術(shù)研究及示范近年來云南省豬偽狂犬病居高不下,為優(yōu)化豬偽狂犬病的防控技術(shù),本試驗選擇規(guī)模適中的3個PRV、PCV2感染陽性的種豬場,設(shè)計了三種凈化方案,即A場：檢測凈化PRV、PCV2感染抗體陽性豬,免疫豬偽狂犬基因缺失疫苗；B場：檢測凈化豬偽狂犬感染抗體陽性豬,免疫PRV基因缺失疫苗；C場：檢測凈化PRV和PCV2感染抗體陽性豬,同時免疫PRV基因缺失和PCV2疫苗,并分析這三種防控方法的豬場凈化績效。結(jié)果表明,三種凈化方法均能控制豬場豬偽狂犬病,C場凈化2種病毒,同時接種2種疫苗情況下凈化效果最好。在此基礎(chǔ)上,研究制訂了豬偽狂犬病凈化技術(shù)規(guī)程,2012-2015年在云南省72家規(guī)模豬場和1個示范縣進(jìn)行示范,并用ELISA方法檢測感染抗體7516份和免疫抗體8696份。結(jié)果顯示：2012年、2013年、2014年、2015年豬偽狂犬病野毒感染率分別是24.42%、5.47%、2.78%、2.69%；其中種公豬感染率分別為18.25%、12.36%、8.33%、3.15%；種母豬的感染率分別為24.73%、4.80%、2.48%、2.65%；免疫抗體陽性率分別為69.03%、81.86%、85.99%、86.40%,有14戶野毒感染率0%。結(jié)果表明,經(jīng)過4年凈化,豬場豬偽狂犬病毒的野毒感染率呈逐年降低趨勢,免疫抗體陽性率逐年升高,說明豬偽狂犬病凈化技術(shù)規(guī)程在云南省大部分地區(qū)具有實用性和操作性,可以推廣應(yīng)用。
[Abstract]:PRV and PCV2 were infected with PRV and PCV2 . The results showed that PRV and PCV2 were infected with PRV and PCV2 . The results showed that the infection rates of PRV and PCV2 were 24.42 % , 5.47 % , 2.78 % and 2.69 % respectively . The positive rates of anti - rabies virus were 69.03 % , 80.86 % , 85.99 % and 86.40 % , respectively .

【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.28

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本文編號：1374655