本文關(guān)鍵詞：一種新昆蟲(chóng)病原真菌，Aspergillus oryzae XJ-1及其在蝗蟲(chóng)防治中的潛力

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【摘要】：飛蝗引起的蝗災(zāi)給世界的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,防治蝗災(zāi)使用的化學(xué)農(nóng)藥所造成的環(huán)境污染和農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留等不良后果激發(fā)人們尋找替代性措施,而生物防治蝗害是最為重要的替代措施之一。本研究從自新疆地區(qū)采集的一頭死亡蝗蟲(chóng)上分離到一個(gè)蝗蟲(chóng)新病原,通過(guò)對(duì)其致病性、分類(lèi)地位以及固體發(fā)酵工藝的初步研究,結(jié)果表明該病原在防治蝗蟲(chóng)方面具有一定的潛力。主要結(jié)果如下： Ⅰ.曲霉Aspergillus sp. XJ-1的致病性及其鑒定 經(jīng)初步鑒定,發(fā)現(xiàn)目標(biāo)真菌隸屬于曲霉屬,故將其命名為Aspergillus sp. XJ-1.由Aspergillus sp. XJ-1作用致死的東亞飛蝗,經(jīng)保濕培養(yǎng)2天后,體表長(zhǎng)出棕黃色菌物,將該菌物分離純培養(yǎng)再接種東亞飛蝗后,試蟲(chóng)又大量死亡,經(jīng)保濕培養(yǎng)的死亡試蟲(chóng)又長(zhǎng)出相似的棕黃色菌物,再次分離純培養(yǎng)得到的菌在宏觀和微觀形態(tài)學(xué)上與第一次分離純培養(yǎng)得到的非常一致,都是Aspergillus sp. XJ-1,由此可見(jiàn),Aspergillus sp. XJ-1對(duì)東亞飛蝗的致病性符合科赫氏法則。體內(nèi)菌絲檢測(cè)結(jié)果顯示,染病試蟲(chóng)組織中存在大量營(yíng)養(yǎng)菌絲。將Aspergillus sp. XJ-1的ITS序列克隆、測(cè)序,并在GenBank中比對(duì)發(fā)現(xiàn)其與米曲霉Aspergillus oryzae、黃曲霉Aspergillus flavus、Aspergillus parvisclerotigenus等曲霉屬黃綠組中部分菌株的ITS序列最接近,相似度高于90%。將Aspergillus sp. XJ-1與曲霉屬黃綠組菌株的ITS序列進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析表明,Aspergillus sp. XJ-1與米曲霉、黃曲霉及A. parvisclerotigenus在進(jìn)化樹(shù)的同一個(gè)分支中。結(jié)合形態(tài)學(xué)特征分析的結(jié)果表明,Aspergillus sp. XJ-1是一株米曲霉,命名為Aspergillus oryzae XJ-1。米曲霉常用于食品發(fā)酵,因此,從安全性角度初步推測(cè),A. oryzae XJ-1具有開(kāi)發(fā)成生防制劑的潛力。 Ⅱ. A. oryzae XJ-1的毒力測(cè)定及其毒素分析 用A. oryzae XJ-1對(duì)東亞飛蝗3齡蝗蝻進(jìn)行生物測(cè)定的結(jié)果表明,在接種第10,13和15天時(shí)的致死中濃度(LC50)分別為3.31×108,1.72×107和7.24×106個(gè)孢子/m1。用A. oryzae XJ-1的代謝產(chǎn)物分別經(jīng)口和注射接種東亞飛蝗的毒力測(cè)定結(jié)果顯示,代謝產(chǎn)物對(duì)試蟲(chóng)不具有毒性作用。采用酶聯(lián)免疫技術(shù)對(duì)A. oryzae XJ-1代謝產(chǎn)物中致癌物黃曲霉毒素B1的檢測(cè)結(jié)果表明,A.oryzae XJ-1不產(chǎn)生黃曲霉毒素B1。上述結(jié)果表明,感病東亞飛蝗的致死原因可能與入侵菌絲大量生長(zhǎng)引起寄主營(yíng)養(yǎng)匱乏有關(guān),而非代謝產(chǎn)物中的毒素所致,且從毒力及安全性角度考慮,A.oryzae XJ-1具有開(kāi)發(fā)成蝗蟲(chóng)生防制劑的潛力。 Ⅲ.A. oryzae XJ-1固體發(fā)酵技術(shù)的初步研究 A. oryzae XJ-1固體發(fā)酵條件的初步篩選結(jié)果顯示,適合A. oryzae XJ-1生長(zhǎng)的最佳溫度為35℃；光照與黑暗條件對(duì)A. oryzae XJ-1生長(zhǎng)的影響無(wú)顯著差異；培養(yǎng)基最佳含水量為60%；基礎(chǔ)固體發(fā)酵培養(yǎng)基配方中的葡糖糖、酵母膏及礦質(zhì)元素對(duì)產(chǎn)孢量無(wú)顯著影響；最佳的豆粕、淀粉比例為9%：5%；采用最佳配方發(fā)酵6天后產(chǎn)孢量達(dá)最大值,最大值為4.1×109個(gè)孢子/g干培養(yǎng)基。從產(chǎn)孢量的角度考慮,A. oryzae XJ-1具有開(kāi)發(fā)成生防制劑的潛力。
【關(guān)鍵詞】：米曲霉 新病原 鑒定 生物防治 固體發(fā)酵
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S476.12;S433.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 引言9-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-25
• 1.1 蝗蟲(chóng)的發(fā)生與防治現(xiàn)狀10-11
• 1.2 蝗蟲(chóng)病原微生物11-20
• 1.2.1 蝗蟲(chóng)痘病毒12-14
• 1.2.2 蝗蟲(chóng)微孢子蟲(chóng)(Nosema locustae)14-15
• 1.2.3 蝗噬蟲(chóng)霉(Entomophaga grylli)15-17
• 1.2.4 綠僵菌(Metarhizium)17-19
• 1.2.5 白僵菌(Beauveria)19-20
• 1.3 真菌鑒定技術(shù)概述20-22
• 1.3.1 DNA條形碼鑒定20-22
• 1.3.2 形態(tài)學(xué)鑒定22
• 1.4 規(guī)模化產(chǎn)孢工藝概述22-23
• 1.5 研究目的與意義23-24
• 1.6 技術(shù)路線24-25
• 第二章 曲霉Aspergillus sp.XJ-1的致病性及其鑒定25-38
• 摘要25-26
• 2.1 材料與方法26-29
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料26
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法26-29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-37
• 2.2.1 Aspergillus sp.XJ-1對(duì)東亞飛蝗的致病性29-31
• 2.2.2 分子生物學(xué)鑒定31-33
• 2.2.3 形態(tài)學(xué)鑒定33-37
• 2.3 分析與討論37-38
• 第三章 曲霉A.oryzae XJ-1的毒力測(cè)定及其毒素分析38-44
• 摘要38
• 3.1 材料與方法38-40
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料38-39
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法39-40
• 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-43
• 3.2.1 A.oryzae XJ-1對(duì)東亞飛蝗的毒力測(cè)定40-41
• 3.2.2 A.oryzae XJ-1代謝產(chǎn)物中的毒素分析41-43
• 3.3 分析與討論43-44
• 第四章 曲霉A.oryzae XJ-1的固體發(fā)酵技術(shù)初步研究44-50
• 摘要44
• 4.1 材料與方法44-46
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料44-45
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法45-46
• 4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-49
• 4.2.1 溫度與光照對(duì)A.oryzae XJ-1生長(zhǎng)的影響46-47
• 4.2.2 不同發(fā)酵條件對(duì)A.oryzae XJ-1產(chǎn)孢量的影響47-49
• 4.3 分析與討論49-50
• 第五章 結(jié)論與討論50-54
• 5.1 主要結(jié)論50
• 5.2 創(chuàng)新點(diǎn)50
• 5.3 討論50-54
• 參考文獻(xiàn)54-66
• 致謝66-67
• 作者簡(jiǎn)介67

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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6 王正軍,秦啟聯(lián),郝樹(shù)廣,陳永林,李鴻昌,李典謨;我國(guó)蝗蟲(chóng)暴發(fā)成災(zāi)的現(xiàn)狀及其持續(xù)控制對(duì)策[J];昆蟲(chóng)知識(shí);2002年03期

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9 陳永林;蝗蟲(chóng)再猖獗的控制與生態(tài)學(xué)治理[J];中國(guó)科學(xué)院院刊;2000年05期

10 張龍;嚴(yán)毓驊;;以生物防治為主的蝗災(zāi)可持續(xù)治理新對(duì)策及其配套技術(shù)體系[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

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本文編號(hào)：1132911