本文關(guān)鍵詞：藤三七葉提取物對(duì)高果糖誘發(fā)的小鼠胰島素抵抗的影響及機(jī)制探討

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【摘要】：目的:本研究旨在通過高果糖飼料誘發(fā)ICR小鼠胰島素抵抗,觀察藤三七葉類黃酮和皂甙提取物對(duì)小鼠胰島素抵抗的影響,并探討藤三七葉提取物的降糖機(jī)制。方法:72只雄性ICR小鼠購于大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,隨機(jī)分為6組,即對(duì)照組、模型組,低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組,低劑量皂甙組和高劑量皂甙組,每組12只。對(duì)照組小鼠食用正常飼料和飲用水;模型組小鼠食用60%果糖飼料和正常飲用水;低劑量類黃酮組小鼠食用60%果糖飼料和1%藤三七葉類黃酮提取物飲液;高劑量類黃酮組小鼠食用60%果糖飼料和2%藤三七葉類黃酮提取物飲液;低劑量皂甙組小鼠食用60%果糖飼料和1%藤三七葉皂甙提取物飲液;高劑量皂甙組小鼠食用60%果糖飼料和2%藤三七葉皂甙提取物飲液。在第19周時(shí)進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT),小鼠禁食12小時(shí)后,分別在0,30,60,和120min時(shí)間點(diǎn)尾部靜脈取血,測試血糖濃度。第20周,小鼠稱重后,經(jīng)眼部穿刺取血獲取血清,頸椎脫臼法處死后,解剖獲得肝組織并稱重。通過小鼠體重和肝臟重量,計(jì)算小鼠肝臟臟器系數(shù),評(píng)價(jià)小鼠肝臟的損傷狀況;應(yīng)用自動(dòng)生化分析儀檢測小鼠空腹血清中葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的濃度;采用Western Blot免疫印記技術(shù),檢測各組小鼠肝臟組織PPARγ蛋白的相對(duì)表達(dá)水平;采用實(shí)時(shí)熒光相對(duì)定量RT-PCR(q RT-PCR)技術(shù),檢測各組小鼠肝組織中PPARγ基因的相對(duì)表達(dá)水平;小鼠肝臟組織經(jīng)he染色后,在鏡下觀察各組小鼠肝臟的病理改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:小鼠肝臟臟器系數(shù)結(jié)果顯示,模型組與對(duì)照組比較,小鼠肝臟發(fā)生了明顯的損傷,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組和模型組比較,小鼠肝臟臟器系數(shù)均無顯著性差異(p0.05);高劑量皂甙組與模型組比較,小鼠肝臟損傷得到明顯改善,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型組與對(duì)照組比較,小鼠糖耐量明顯發(fā)生異常,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較,小鼠糖耐量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較,明顯改善小鼠糖耐量異常,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。模型組與對(duì)照組比較,小鼠空腹血清中葡萄糖、胰島素、甘油三酯、總膽固醇、和低密度脂蛋白膽固醇的濃度明顯升高,高密度脂蛋白膽固醇濃度下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較,差異具有顯著性差異(p0.05),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。qrt-pcr檢測結(jié)果顯示,模型組與對(duì)照組比較,小鼠肝臟組織pparγmrna表達(dá)顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較,pparγmrna的表達(dá)顯著增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。westernblot檢測結(jié)果顯示,模型組與對(duì)照組比較,小鼠肝臟組織pparγ蛋白表達(dá)顯著降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較,小鼠pparγ蛋白的表達(dá)顯著增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。he染色后,鏡下觀察,對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞狀態(tài)良好,肝組織結(jié)構(gòu)清晰可見,未見明顯病理改變。模型組、低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組明顯出現(xiàn)肝細(xì)胞脂肪變性、炎癥浸潤和形成纖維結(jié)締組織等;低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較,病理狀況得到明顯改善。結(jié)論:藤三七葉皂甙提取物可以促進(jìn)小鼠體內(nèi)pparγ的表達(dá),改善機(jī)體糖脂代謝,有效抑制胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展,并且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：藤三七葉提取物 胰島素抵抗 PPARγ
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R285.5
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 前言14-15
• 材料與方法15-24
• 1.試劑15-16
• 2.儀器16-17
• 3.藤三七葉提取物飲液的配制17
• 4.動(dòng)物處理17
• 5.口服葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）17-18
• 6.血液和組織樣本的采集18
• 7.藤三七對(duì)肝臟臟器系數(shù)的影響18
• 8.生物化學(xué)指標(biāo)檢測18-23
• 8.1.小鼠空腹血清生化指標(biāo)檢測18
• 8.2 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）18-19
• 8.3 實(shí)時(shí)熒光相對(duì)定量RT-PCR19-21
• 8.4 蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot）21-23
• 9.組織學(xué)檢查23-24
• 10.統(tǒng)計(jì)分析24
• 結(jié)果24-31
• 1.小鼠一般狀況24
• 2.藤三七葉提取物對(duì)小鼠肝臟臟器系數(shù)的影響24-25
• 3.藤三七葉提取物對(duì)小鼠糖耐量的影響25
• 4.藤三七葉提取物對(duì)小鼠空腹血清葡萄糖（Glucose）的影響25-26
• 5.藤三七葉提取物對(duì)小鼠空腹血清胰島素的影響26-27
• 6.藤三七葉提取物對(duì)小鼠血脂的影響27-28
• 7.藤三七葉提取物對(duì)小鼠肝臟PPARγ基因表達(dá)的影響28-29
• 8.藤三七葉提取物對(duì)小鼠肝臟PPARγ蛋白表達(dá)的影響29-30
• 9.藤三七葉提取物對(duì)小鼠肝臟病理學(xué)改變的影響30-31
• 討論31-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48-49

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