本文關(guān)鍵詞：枇杷葉多酚提取、純化及其抗氧化、抑菌活性研究

  更多相關(guān)文章： 枇杷葉 多酚 純化 HPLC 抗氧化 抑菌

【摘要】：本實驗以枇杷葉為材料,采用溶劑提取法提取枇杷葉多酚類物質(zhì),并對其提取工藝進行優(yōu)化提高枇杷葉多酚的提取率,然后對提取多酚類物質(zhì)利用大孔樹脂進行純化,利用高效液相色譜法初步鑒定枇杷葉多酚類物質(zhì)的組成,最后采用多種方法研究枇杷葉多酚的抗氧化活性和抑菌活性。研究結(jié)論：(1)利用響應(yīng)面分析法,優(yōu)化枇杷葉多酚提取工藝,結(jié)果表明料液比、提取溫度和提取時間是影響枇杷葉多酚提取率的最主要因素,乙醇濃度影響最小,枇杷葉多酚最優(yōu)提取工藝為料液比1：21,乙醇濃度48.5%,溫度60℃,時間2.6 h,得到枇杷葉多酚實際提取率值為3.40%。(2)通過比較六種大孔樹脂的吸附與解吸能力,選擇D101大孔樹脂來純化枇杷葉多酚,通過靜態(tài)和動態(tài)吸附實驗,得到D101樹脂純化枇杷葉多酚的方案：多酚濃度為2.0 mg/mL的溶液進行上樣,流速控制在2.0 mL/min:解吸劑選用60%的乙醇溶液,洗脫流速為1.0 mL/min,洗脫液體積為250 mL；最終收集合并100～200 mL之間的洗脫液,經(jīng)過濃縮冷凍干燥得到枇杷葉多酚純樣粉末。該工藝經(jīng)過驗證,枇杷葉多酚的含量從13.23%上升到68.48%。(3)利用高效液相色譜分析法初步研究枇杷葉多酚的組成,研究發(fā)現(xiàn)枇杷葉多酚粗樣和枇杷葉多酚純樣都含有五種相同的成分,分別是沒食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素。通過定量分析結(jié)果為枇杷葉多酚粗樣中沒食子酸、香草酸、丁香酸、阿魏酸、槲皮素物種單體的含量分別為：1.057 mg/g、1.197 mg/g、1.439 mg/g、2.234 mg/g、1.068 mg/g;枇杷葉多酚純樣中五種單體的含量分別為：12.731 mg/g、8.433 mg/g、 8.651 mg/g、9.477 mg/g、18.554 mg/g。(4)采用體外抗氧化實驗,研究枇杷葉多酚粗樣、純樣的抗氧化能力,并且以常用抗氧化劑抗壞血酸和應(yīng)用最廣泛的多酚類物質(zhì)茶多酚作為對照。本研究的數(shù)據(jù)顯示枇杷葉多酚顯示出較好的清除DPPH、ABTS+、羥自由基、亞硝基的作用,并且還原能力顯著,可以作為潛在的天然抗氧化劑的來源。(5)濾紙片法測定抑菌效果表明,純化后枇杷葉多酚對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌兩種細菌的抗菌效果最顯著,并且隨著多酚濃度的升高,抑制作用增加。枇杷葉多酚對枯草芽孢桿菌和銅綠假單孢桿菌的抑制效果較差,升高到一定濃度,其對枯草芽孢桿菌的抑菌效果趨于穩(wěn)定,濃度較小時,對銅綠假單孢桿菌沒有抑菌效果。通過肉湯微量稀釋法測定最低抑菌濃度和最低殺菌濃度的實驗結(jié)果表明枇杷葉多酚對大腸桿菌的MIC和MBC都為2.5 mg/mL、金黃色葡萄球菌的MIC為2.5 mg/mL,MBC為5.0 mg/mL、枯草芽孢桿菌MIC和MBC為5 mg/mL、對銅綠假單胞桿菌最差,其MBC達到40 mg/mL,MIC為20 mg/mL。
【關(guān)鍵詞】：枇杷葉 多酚 純化 HPLC 抗氧化 抑菌
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R284;R285
【目錄】：

• 摘要9-10
• ABSTRACT10-12
• 第一章 文獻綜述12-24
• 1.1 植物多酚12-13
• 1.2 植物多酚的應(yīng)用13-16
• 1.2.1 植物多酚抗氧化作用的應(yīng)用13-14
• 1.2.2 植物多酚抑菌消炎和抗病毒功能的應(yīng)用14-15
• 1.2.3 植物多酚螯合作用的應(yīng)用15
• 1.2.4 其他性質(zhì)的應(yīng)用15-16
• 1.3 展望16
• 1.4 枇杷16-18
• 1.4.1 枇杷的分布17
• 1.4.1.1 世界枇杷的分布17
• 1.4.1.2 中國枇杷的分布17
• 1.4.2 枇杷加工產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀17-18
• 1.5 枇杷葉18-22
• 1.5.1 枇杷葉的化學(xué)成分18-21
• 1.5.1.1 多酚類18
• 1.5.1.2 三萜酸類18-19
• 1.5.1.3 倍半萜類19-20
• 1.5.1.4 有機酸類20-21
• 1.5.1.5 揮發(fā)油21
• 1.5.1.6 糖苷類化合物21
• 1.5.2 枇杷葉的藥理作用21-22
• 1.5.2.1 消炎鎮(zhèn)咳作用21
• 1.5.2.2 降血糖作用21
• 1.5.2.3 抗口腔腫瘤細胞活性作用21-22
• 1.5.2.4 抑菌、抗病毒作用22
• 1.5.3.5 其他作用22
• 1.6 研究的目的、意義和內(nèi)容22-24
• 1.6.1 本研究的目的、意義22
• 1.6.2 研究內(nèi)容22-24
• 1.6.2.1 枇杷葉多酚的提取工藝優(yōu)化22-23
• 1.6.2.2 枇杷葉多酚的分離純化23
• 1.6.2.3 枇杷葉多酚的HPLC分析23
• 1.6.2.4 枇杷葉多酚的抗氧化活性研究23
• 1.6.2.5 枇杷葉多酚的抑菌活性研究23-24
• 第二章 響應(yīng)面法優(yōu)化枇杷葉多酚提取工藝24-32
• 2.1. 材料和方法24-25
• 2.1.1 原料與試劑24
• 2.1.2 儀器與設(shè)備24-25
• 2.2 試驗方法25-26
• 2.2.1 標(biāo)準曲線的繪制25
• 2.2.2 枇杷葉多酚的提取及含量測定25
• 2.2.3 單因素及其響應(yīng)面優(yōu)化試驗設(shè)計25-26
• 2.2.4 統(tǒng)計分析26
• 2.3 結(jié)果與分析26-31
• 2.3.1 單因素對枇杷葉多酚影響26-27
• 2.3.2 枇杷葉多酚的響應(yīng)面分析27-30
• 2.3.3 枇杷葉多酚提取最優(yōu)工藝及其驗證30-31
• 2.4 小結(jié)與討論31-32
• 第三章 大孔吸附樹脂純化枇杷葉多酚32-41
• 3.1 材料與儀器32-33
• 3.1.1 原料與試劑32-33
• 3.1.2 儀器與設(shè)備33
• 3.2 試驗方法33-35
• 3.2.1 枇杷葉多酚粗提液的制備33
• 3.2.2 大孔樹脂的預(yù)處理33-34
• 3.2.3 大孔樹脂對枇杷葉多酚吸附率與解吸率的測定34
• 3.2.4 靜態(tài)吸附動力學(xué)的特性曲線的測定34
• 3.2.5 最佳上樣濃度的測定34
• 3.2.6 最佳洗脫液濃度的測定34
• 3.2.7 大孔樹脂濕法裝柱方法34-35
• 3.2.8 動態(tài)吸附與洗脫實驗35
• 3.2.9 純化樣品的制備35
• 3.3 結(jié)果與分析35-39
• 3.3.1 大孔樹脂的選擇35-36
• 3.3.2 D101靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線36
• 3.3.3 枇杷葉多酚溶液濃度對D101吸附的影響36-37
• 3.3.4 洗脫液濃度的影響37-38
• 3.3.5 D101型大孔樹脂動態(tài)吸附曲線38
• 3.3.6 D101型大孔樹脂動態(tài)洗脫曲線38-39
• 3.3.7 D101樹脂對枇杷葉多酚的純化結(jié)果39
• 3.4 小結(jié)與討論39-41
• 第四章 枇杷葉多酚的HPLC分析41-47
• 4.1 材料與儀器41-42
• 4.1.1 材料與試劑41
• 4.1.2 儀器與設(shè)備41-42
• 4.2 試驗方法42-43
• 4.2.1 色譜條件42
• 4.2.2 洗脫方法42
• 4.2.3 標(biāo)準曲線的制作42-43
• 4.2.4 樣品的制備43
• 4.2.5 枇杷葉多酚樣品的測定43
• 4.3 結(jié)果與分析43-45
• 4.3.1 定性分析43-44
• 4.3.2 定量分析44-45
• 4.4 小結(jié)與討論45-47
• 第五章 枇杷葉多酚的抗氧化活性研究47-55
• 5.1 材料與儀器47-48
• 5.1.1 材料與試劑47-48
• 5.1.2 儀器與設(shè)備48
• 5.2 試驗方法48-50
• 5.2.1 清除DPPH自由基能力的測定48
• 5.2.2 清除ABTS~+自由基能力的測定48-49
• 5.2.3 還原力的測定49
• 5.2.4 清除羥基自由基能力的測定49
• 5.2.5 清除超氧自由基能力的測定49
• 5.2.6 清除亞硝酸基能力的測定49-50
• 5.3 結(jié)果與分析50-53
• 5.3.1 枇杷葉多酚清除DPPH自由基能力50
• 5.3.2 ABTS~+自由基的清除能力50-51
• 5.3.3 枇杷葉多酚的總還原力51
• 5.3.4 清除羥自由基能力51-52
• 5.3.5 清除超氧自由基能力52
• 5.3.6 清除亞硝基的能力52-53
• 5.3.7 IC_(50)值法判斷樣品的抗氧化活性53
• 5.4 小結(jié)與討論53-55
• 第六章 枇杷葉多酚的抑菌活性研究55-62
• 6.1 材料與儀器55-56
• 6.1.1 材料與試劑55-56
• 6.1.2 儀器與設(shè)備56
• 6.2 試驗方法56-58
• 6.2.1 LB培養(yǎng)基的配置56
• 6.2.2 不同濃度枇杷葉多酚樣品的制備56
• 6.2.3 菌種的活化56-57
• 6.2.4 菌種的保種57
• 6.2.5 菌種的計數(shù)57
• 6.2.6 菌懸液的制備57
• 6.2.7 濾紙片發(fā)測定枇杷葉多酚抑菌活性57
• 6.2.8 枇杷葉多酚最低抑菌濃度(MIC)與最低殺菌濃度(MBC)的測定57-58
• 6.2.9 數(shù)據(jù)分析方法58
• 6.3 結(jié)果與分析58-60
• 6.3.1 菌種計數(shù)結(jié)果58
• 6.3.2 濾紙片法的測定結(jié)果58-60
• 6.3.3 最低抑菌濃度與最低殺菌濃度的測定結(jié)果60
• 6.4 小結(jié)與討論60-62
• 第七章 研究總結(jié)與展望62-64
• 7.1 論文的結(jié)論62-63
• 7.2 論文存在的不足63
• 7.3 展望63-64
• 參考文獻64-69
• 致謝69

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳玉誼,朱炳麟,林玉霖;福建枇杷葉初探[J];海峽藥學(xué);2003年03期

2 王明艷;許瑞波;賀俊霞;;超聲波技術(shù)用于枇杷葉多糖的提取研究[J];中藥材;2006年11期

3 范玉堂;炮制枇杷葉的體會[J];中藥通報;1985年02期

4 周風(fēng)技;枇杷葉的去茸毛新法[J];時珍國藥研究;1995年01期

5 爾安;功效不凡的枇杷葉[J];藥膳食療;2004年09期

6 賴國新;枇杷葉的研究進展[J];信陽農(nóng)業(yè)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;2005年03期

7 鄒盛勤;陳武;;枇杷葉及其藥渣中醇提成分含量的比較[J];中國藥房;2005年24期

8 沙娜;梁敬鈺;;枇杷葉研究進展[J];海峽藥學(xué);2006年01期

9 林玉霖;林文津;林力強;;枇杷葉的研究現(xiàn)狀與開發(fā)前景[J];中藥材;2006年10期

10 李開泉;;枇杷葉齊墩果酸的超聲波輔助提取效果研究[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 陳劍;李維林;;中藥枇杷葉的研究進展[A];藥用植物研究與中藥現(xiàn)代化——第四屆全國藥用植物學(xué)與植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2004年

2 呂寒;李維林;于盱;陳劍;張涵慶;;枇杷葉黃酮類化合物的提取分離與藥理活性研究[A];第八屆全國藥用植物及植物藥學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

3 孟令軍;李超生;孟慶繁;劉艷;王晶;滕利榮;;高效液相色譜法測定枇杷葉藥材中綠原酸的含量[A];吉林省第六屆生命科學(xué)大型學(xué)術(shù)報告會論文集[C];2008年

4 原遠;宋剛;林順權(quán);;枇杷葉熊果酸和齊墩果酸誘導(dǎo)人肺癌細胞凋亡的研究[A];第六屆全國枇杷學(xué)術(shù)研討會論文（摘要）集[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;枇杷葉[N];中國中醫(yī)藥報;2013年

2 �？�;枇杷葉藥用小方[N];民族醫(yī)藥報;2005年

3 唐海濤;枇杷葉的新用途[N];上海中醫(yī)藥報;2002年

4 錢問津;枇杷葉妙用七則[N];上海中醫(yī)藥報;2008年

5 董麗;枇杷葉治病新用[N];民族醫(yī)藥報;2006年

6 程偉枝;枇杷葉升清降濁可通便[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

7 木易 編譯;枇杷葉不獨普通藥用 遇癌照殺[N];大眾科技報;2002年

8 倪文;枇杷葉 化痰止咳有效 緩解疼痛有功[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2001年

9 江西省中醫(yī)院 副主任醫(yī)師 何興偉;枇杷葉藥茶[N];家庭醫(yī)生報;2003年

10 湖北宜昌 胡獻國;化痰止咳枇杷葉[N];上海中醫(yī)藥報;2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王建超;枇杷葉多酚提取、純化及其抗氧化、抑菌活性研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

2 韓秀奇;枇杷葉質(zhì)量評價的研究[D];廣東藥學(xué)院;2011年

3 楊慶新;枇杷葉中科羅索酸的資源化學(xué)調(diào)查及提取分離技術(shù)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

4 郭娜;福建地產(chǎn)枇杷葉的化學(xué)品質(zhì)評價[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2014年

5 郭宇;枇杷葉化學(xué)對照品的研究[D];延邊大學(xué);2007年

6 洪雷;枇杷葉多糖分離純化及生物活性研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2008年

7 陳歡;枇杷葉化學(xué)成分及抗癌活性的研究[D];北京化工大學(xué);2012年

8 陸林博;枇杷葉的化學(xué)成分研究[D];南京師范大學(xué);2006年

9 李婷;枇杷葉的ISSR遺傳差異分析及化學(xué)成分含量相關(guān)性研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2011年

10 張園秀;中藥枇杷葉DNA甲基化及其與化學(xué)成分相關(guān)性研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2014年

，

本文編號：676453