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茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲中β淀粉樣蛋白毒性研究

發(fā)布時間:2017-06-29 01:03

  本文關(guān)鍵詞:茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲中β淀粉樣蛋白毒性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:阿爾茨海默病是一種常見中老年神經(jīng)退行性疾病。淀粉樣蛋白病變對大腦產(chǎn)生毒性是AD發(fā)生的主要病因。本文通過研究茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲癱瘓行為及線蟲體內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)情況,探討茶黃素提取物抗β淀粉樣蛋白毒性作用機制。線蟲行為學(xué)癱瘓實驗表明,茶黃素提取物能有效抑制AD轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲CL2006(Aβ3-42)與GMC101(Aβ1-42)癱瘓。CL2006中,與對照組相比,10mg/L、 100mg/L、200mg/L與500mg/L茶黃素提取物處理組第8天未癱瘓率分別提高了14.33%、21.05%、8.19%與1,2.83%,各濃度茶黃素提取物抑制CL2006(Aβ3-42)癱瘓作用明顯。茶黃素提取物預(yù)處理組GMC101中,與對照組相比,10mg/L、100mg/L、 200mg/L與500mg/L茶黃素提取物處理組未癱瘓率分別提高了4.92%、8.36%、9.67%與11.97%,各濃度茶黃素提取物對GMC101(Aβ142)癱瘓抑制效果均極顯著(p0.01)。茶黃素提取物處理后立即升溫組GMC101中,茶黃素提取物處理組與對照組相比無顯著差異。通過測量線蟲體長,與對照組相比,各濃度茶黃素提取物處理過的CL2006與GMC101體長均無顯著性差異。茶黃素提取物對線蟲生長發(fā)育無不良影響。RT-PCR檢測線蟲體內(nèi)Aβ human、hsp-16.1、hsp-16.2、aip-1與amy-1基因表達(dá)情況,可知茶黃素提取物顯著降低CL2006與GMC101線蟲體內(nèi)Aβ human表達(dá)情況。此外,茶黃素提取物上調(diào)CL2006(Aβ3-42)線蟲體內(nèi)熱休克蛋白HSP-16.1與HSP-16.2的表達(dá)水平(P0.01)。與此相反,茶黃素提取物處理組GMC101(Aβ1-42)體內(nèi)HSP-16.2水平無變化,HSP-16.1的表達(dá)水平下調(diào)(P0.05)。經(jīng)茶黃素提取物處理過的GMC101中aip-1表達(dá)水平相比對照組顯著降低(P0.01),而CL2006經(jīng)茶黃素提取物處理后aip-1表達(dá)水平卻顯著較高(P0.01)。茶黃素提取物處理后,amy-1在GMC101中表達(dá)下調(diào),效果極顯著(P0.01),CL2006中的表達(dá)下調(diào),效果顯著(P0.05)。通過檢測綠色熒光蛋白進(jìn)一步研究茶黃素提取物抵抗Ap毒性機制,結(jié)果發(fā)現(xiàn),茶黃素提取物可以顯著提高CL2166(Pgst-4::GFP)線蟲體內(nèi)gst-4表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】:茶黃素提取物 阿爾茨海默病 β-淀粉樣蛋白 秀麗隱桿線蟲
【學(xué)位授予單位】:湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-11
  • 第一章 緒論11-26
  • 1.1 紅茶主要化學(xué)成分11-12
  • 1.1.1 紅茶主要功效成分11
  • 1.1.2 茶主要營養(yǎng)成分11-12
  • 1.2 茶功效研究進(jìn)展12-15
  • 1.2.1 抗氧化作用12
  • 1.2.2 抗腫瘤和預(yù)防癌癥作用12-13
  • 1.2.3 預(yù)防心血管疾病13
  • 1.2.4 預(yù)防慢性炎癥13-14
  • 1.2.5 預(yù)防肥胖及代謝綜合癥14
  • 1.2.6 預(yù)防神經(jīng)退行性疾病14-15
  • 1.3 阿爾茨海默病研究進(jìn)展15-19
  • 1.3.1 淀粉樣蛋白假說15-16
  • 1.3.2 Tau假說16
  • 1.3.3 神經(jīng)遞質(zhì)假說16
  • 1.3.4 膽堿能假說16-17
  • 1.3.5 神經(jīng)血管學(xué)說17
  • 1.3.6 炎癥假說17
  • 1.3.7 自由基與氧化應(yīng)激假說17-18
  • 1.3.8 金屬離子假說18
  • 1.3.9 胰島素假說18-19
  • 1.3.10 小結(jié)19
  • 1.4 紅茶及其功效成分作用于阿爾茨海默病機制的研究進(jìn)展19-21
  • 1.4.1 抑制毒性β淀粉樣蛋白的形成19-20
  • 1.4.2 抑制Aβ的聚集20
  • 1.4.3 抵抗Aβ42聚集引起的脂質(zhì)膜不穩(wěn)定20
  • 1.4.4 減弱Aβ纖維誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性20
  • 1.4.5 抵抗Aβ誘導(dǎo)的活性氧自由基損傷20-21
  • 1.4.6 流行病學(xué)研究21
  • 1.5 秀麗隱桿線蟲研究現(xiàn)狀21-24
  • 1.5.1 秀麗隱桿線蟲21
  • 1.5.2 秀麗隱桿線蟲模式生物作為研究對象的優(yōu)勢21-22
  • 1.5.3 秀麗隱桿線蟲應(yīng)用于AD研究進(jìn)展22-24
  • 1.6 研究目的與意義24-26
  • 第二章 茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗線蟲癱瘓作用研究26-38
  • 2.1 材料、試劑與儀器26-27
  • 2.1.1 線蟲品系26
  • 2.1.2 主要材料及樣品制備26
  • 2.1.3 主要藥品和試劑26-27
  • 2.1.4 主要實驗儀器27
  • 2.2 實驗方法27-31
  • 2.2.1 主要工作液配制27-28
  • 2.2.2 E.coli OP50的培養(yǎng)28-29
  • 2.2.3 秀麗隱桿線蟲的培養(yǎng)29
  • 2.2.4 線蟲癱瘓實驗方法29-30
  • 2.2.5 AD轉(zhuǎn)基因秀麗線蟲體長測量方法30
  • 2.2.6 數(shù)據(jù)處理30-31
  • 2.3 結(jié)果與分析31-36
  • 2.3.1 茶黃素提取物延緩秀麗線蟲CL2006(Aβ3-42)品系癱瘓31-32
  • 2.3.2 茶黃素提取物延緩秀麗線蟲GMC101(Aβ1-42)品系癱瘓32-34
  • 2.3.3 茶黃素提取物對AD轉(zhuǎn)基因秀麗線蟲體長影響34-36
  • 2.4 討論36-37
  • 2.5 小結(jié)37-38
  • 第三章 茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗線蟲癱瘓機理研究38-51
  • 3.1 材料、試劑與儀器38-39
  • 3.1.1 線蟲品系38
  • 3.1.2 主要實驗材料及樣品制備38
  • 3.1.3 主要藥品和試劑38-39
  • 3.1.4 主要實驗儀器39
  • 3.2 實驗方法39-43
  • 3.2.1 主要工作液配制39
  • 3.2.2 轉(zhuǎn)基因線蟲綠色熒光蛋白可視化研究方法39-40
  • 3.2.3 AD轉(zhuǎn)基因線蟲體內(nèi)相關(guān)基因表達(dá)分析方法40-43
  • 3.2.4 數(shù)據(jù)處理43
  • 3.3 結(jié)果與分析43-48
  • 3.3.1 茶黃素提取物對AD轉(zhuǎn)基因線蟲體內(nèi)相關(guān)基因mRNA水平表達(dá)的影響43-47
  • 3.3.2 轉(zhuǎn)基因線蟲品系綠色熒光蛋白熒光定量及可視化研究47-48
  • 3.4 討論48-50
  • 3.5 小結(jié)50-51
  • 第四章 全文總結(jié)51-52
  • 4.1 主要研究結(jié)果51
  • 4.2 創(chuàng)新點與展望51-52
  • 參考文獻(xiàn)52-65
  • 致謝65-66
  • 作者簡歷66

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  本文關(guān)鍵詞:茶黃素提取物延緩AD轉(zhuǎn)基因秀麗隱桿線蟲中β淀粉樣蛋白毒性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:495927

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