目的:1.分別構建含有小鼠生精細胞特異啟動子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達載體,驗證并篩選有效特異啟動子。2.構建小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag,并且從體內(nèi)、外驗證其表達特異性。方法:1.篩選小鼠生精細胞特異啟動子通過同源重組的方法分別構建含有小鼠生精細胞特異啟動子Dazl、Stra8、Hspa2、Pgk2和Prm1的AAV特異表達載體,分別轉(zhuǎn)染生精細胞GC1細胞,通過比較5種載體在GC1細胞中的表達情況篩選有效的小鼠生精細胞特異啟動子。2.構建小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag通過同源重組的方法將小鼠生精細胞特異啟動子Dazl片段與酶切后去除CMV啟動子的腺相關病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag連接,并通過雙酶切和基因測序驗證小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag的構建。3.小鼠生精細胞特異表達載體AAV-Dazl-RFP-Flag體外驗證將腺相關病毒載體AAV-CMV-RFP-Flag及小鼠生精細胞特異表達載體AAV-DazlRFP-Flag分別轉(zhuǎn)染GC1細胞和293T...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3AAV-Hspa2-RFP的結構及測序結果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結構及測序結果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結構及測序結果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖4AAV-pgk2-RFP的結構及測序結果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結構及測序結果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結構及測序結果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖1AAV-Dazl-RFP的結構及測序結果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結構及測序結果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結構及測序結果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

圖2AAV-Stra8-RFP的結構及測序結果

山西醫(yī)科大學碩士學位論文12圖3AAV-Hspa2-RFP的結構及測序結果Fig3structureofAAV-Hspa2-RFPandsequenceresult圖1AAV-Dazl-RFP的結構及測序結果Fig1structureofAAV-Dazl-RFPandsequen....

本文編號：4032428