天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

體外模擬氣道杯狀細胞內(nèi)大分子擁擠環(huán)境對不同糖基化MUC5AC折疊和聚集的影響

發(fā)布時間:2025-01-20 17:44
  目的:研究大分子擁擠環(huán)境對不同糖基化程度的黏蛋白(MUC5AC)在復(fù)性過程中折疊和聚集的差異效應(yīng)。方法:首先將含有目的基因片段的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進HEK293細胞誘導(dǎo)MUC5AC的表達,并用鎳離子親和層析柱純化目的蛋白。用肽N-糖苷酶F(PNGase F)處理純化的MUC5AC進行酶切去糖基化,聚丙烯酰胺凝膠檢測去糖基化結(jié)果。利用蛋白擁擠試劑牛血清白蛋白(BSA)以及多糖擁擠劑聚乙二醇2000(PEG2000)、聚蔗糖70(Ficoll70)和葡聚糖70(Dextran70)在體外模擬生物體內(nèi)的大分子擁擠環(huán)境,設(shè)置擁擠試劑質(zhì)量濃度梯度為50g/L、100 g/L和200 g/L,用不含擁擠試劑的緩沖液作為對照組。將鹽酸胍(GdnHCl)誘導(dǎo)變性的去糖基化蛋白(d-MUC5AC)及未去糖基化的天然蛋白(n-MUC5AC)分別加入到上述四種大分子擁擠試劑和對照組緩沖液中復(fù)性,25℃條件下用紫外分光光度計連續(xù)監(jiān)測復(fù)性過程中各組蛋白在488nm處吸光度的變化。復(fù)性終產(chǎn)物離心后測定上清液中可溶性蛋白質(zhì)濃度,分析不同復(fù)性體系中蛋白質(zhì)的復(fù)性產(chǎn)率結(jié)果:兩種蛋白在質(zhì)量濃度較高(ρ=200 g/L)的擁擠條件下...

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1重組MUC5AC在HEK293中的表達純化

圖1重組MUC5AC在HEK293中的表達純化

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。3結(jié)果3.1重組MUC5AC在HEK293細胞中的表達純化質(zhì)粒轉(zhuǎn)染72h后,收集轉(zhuǎn)染的細胞,提取細胞總蛋白,然后用Ni-NTA親和層析柱進行純化,流出液經(jīng)SDS-PAGE電泳及考馬斯亮藍染色鑒定蛋白純化結(jié)果。S....


圖2染色分析MUC5AC去糖基化結(jié)果

圖2染色分析MUC5AC去糖基化結(jié)果

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19由40kDa下移至17kDa左右。PAS染色結(jié)果顯示,僅n-MUC5AC在40kDa處顯色,PNGaseF處理后的蛋白未見顯色,說明在HEK293細胞中表達的n-MUC5AC進行了N-糖基化修飾,而經(jīng)PNGaseF糖苷酶消化后糖基基團已基本被去處....


圖3不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對n-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影響

圖3不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對n-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文20子擁擠試劑的質(zhì)量濃度ρ選在50或100g/L時兩種蛋白質(zhì)均能很好的復(fù)性,由于生物體內(nèi)的大分子濃度高達80~400g/L[13-15],因此后續(xù)實驗選用ρ=100g/L作為最適質(zhì)量濃度。圖3不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對n-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影....


圖4.不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對d-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影響

圖4.不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對d-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文20子擁擠試劑的質(zhì)量濃度ρ選在50或100g/L時兩種蛋白質(zhì)均能很好的復(fù)性,由于生物體內(nèi)的大分子濃度高達80~400g/L[13-15],因此后續(xù)實驗選用ρ=100g/L作為最適質(zhì)量濃度。圖3不同質(zhì)量濃度的大分子擁擠試劑對n-MUC5AC復(fù)性產(chǎn)率的影....



本文編號:4029458

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/shoufeilunwen/mpalunwen/4029458.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶f75c3***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
国产精品尹人香蕉综合网| 国产人妻精品区一区二区三区 | 亚洲欧洲精品一区二区三区| 不卡一区二区高清视频| 成人三级视频在线观看不卡| 一区二区福利在线视频| 大香蕉久草网一区二区三区| 亚洲最新av在线观看| 91超频在线视频中文字幕| 亚洲一区二区三区熟女少妇| 亚洲精品国产第一区二区多人| 国产一区二区三区口爆在线| 中文字幕在线五月婷婷| 日本欧美视频在线观看免费| 日韩成人免费性生活视频| 日韩在线精品视频观看| 综合久综合久综合久久| 日本深夜福利在线播放| 大香蕉伊人一区二区三区| 成人国产一区二区三区精品麻豆| 欧美一区二区三区喷汁尤物 | 国产亚洲欧美日韩国亚语| 国产精品美女午夜视频| 东京热男人的天堂社区| 黄片免费在线观看日韩| 国产高清精品福利私拍| 91麻豆精品欧美一区| 欧美性欧美一区二区三区| 精品一区二区三区中文字幕| 国产精欧美一区二区三区久久| 国产av乱了乱了一区二区三区| 97人摸人人澡人人人超碰| 五月婷婷六月丁香亚洲| 伊人久久青草地综合婷婷| 精品国产91亚洲一区二区三区 | 高跟丝袜av在线一区二区三区| 国产黑人一区二区三区| 国产不卡免费高清视频| 午夜国产精品福利在线观看| 五月天婷亚洲天婷综合网| 91在线爽的少妇嗷嗷叫|