目的:在全球范圍內(nèi),肝癌是癌癥相關(guān)死亡的第四大常見原因,發(fā)病率排名第六。因此,肝癌治療仍然是我們面臨的嚴(yán)峻考驗(yàn)。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞及其M2型極化能夠促進(jìn)腫瘤增殖,侵襲和轉(zhuǎn)移。Nogo-B蛋白在大多數(shù)組織中表達(dá)并參與巨噬細(xì)胞極化。本研究旨在探討Nogo-B在腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞M2極化中的作用及其潛在機(jī)制,為肝癌的治療提供潛在靶點(diǎn)。方法:運(yùn)用組織免疫熒光染色和q-PCR檢測67例臨床肝癌標(biāo)本癌和癌旁巨噬細(xì)胞中Nogo-B的表達(dá)水平。隨訪Nogo-B表達(dá)水平與患者無腫瘤生存率間的關(guān)系。應(yīng)用單因素和多因素回歸分析評估Nogo-B表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系。Western blot,q-PCR,流式細(xì)胞術(shù)用于檢測巨噬細(xì)胞中Nogo-B和極化標(biāo)志物(TNF-α,IL-1β,iNOS,IL-10,MR,Arg-1,CD163,)的表達(dá)水平。隨后運(yùn)用慢病毒敲低巨噬細(xì)胞中Nogo-B的表達(dá),WB檢測對照組和敲低組巨噬細(xì)胞極化標(biāo)志物的表達(dá)。將對照組和敲低組巨噬細(xì)胞與小鼠肝癌細(xì)胞共培養(yǎng),CCK-8和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測肝癌細(xì)胞的增殖情況,Transwell實(shí)驗(yàn)用于檢測肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲。流式細(xì)胞術(shù)和WB用于檢測肝癌細(xì)...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.HCC患者TAMs中Nogo-B表達(dá)上調(diào)且與其預(yù)后不良顯著相關(guān)A.肝癌患者腫瘤和鄰近非腫瘤組織樣本中Nogo-B（綠色）和F4/80（紅色，巨噬細(xì)胞標(biāo)志物）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文14圖1.HCC患者TAMs中Nogo-B表達(dá)上調(diào)且與其預(yù)后不良顯著相關(guān)A.肝癌患者腫瘤和鄰近非腫瘤組織樣本中Nogo-B（綠色）和F4/80（紅色，巨噬細(xì)胞標(biāo)志物）的免疫熒光圖像。標(biāo)尺，50μm。B.通過q-PCR檢測HCC組織和鄰近非腫瘤組織浸潤....

圖2.腫瘤微環(huán)境上調(diào)巨噬細(xì)胞Nogo-B表達(dá)并誘導(dǎo)TAMsM2極化

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文17圖2.腫瘤微環(huán)境上調(diào)巨噬細(xì)胞Nogo-B表達(dá)并誘導(dǎo)TAMsM2極化（A）在有或沒有不同劑量HCM的情況下對PMs進(jìn)行處理（左）。蛋白質(zhì)印跡分析以顯示HCM對巨噬細(xì)胞極化和Nogo-B在PMs中表達(dá)的作用。Westernblot的統(tǒng)計(jì)分析（右）。（....

圖3.Nogo-B的干預(yù)明顯弱化TAMs的M2型極化

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文19圖3.Nogo-B的干預(yù)明顯弱化TAMs的M2型極化（A-C）蛋白質(zhì)印跡分析顯示PMs，BMDMs和RAW264.7細(xì)胞中M1或M2極化狀態(tài)下

圖4.干預(yù)Nogo-B抑制腫瘤增殖，遷移和侵襲并誘導(dǎo)HCC細(xì)胞凋亡（A和B）M2樣巨噬細(xì)胞中的Nogo-B的干預(yù)抑制Hepa1-6細(xì)胞的生長（A）和集落形成（B）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文21圖4.干預(yù)Nogo-B抑制腫瘤增殖，遷移和侵襲并誘導(dǎo)HCC細(xì)胞凋亡（A和B）M2樣巨噬細(xì)胞中的Nogo-B的干預(yù)抑制Hepa1-6細(xì)胞的生長（A）和集落形成（B）。

本文編號：4019928