目的:極光激酶A(AURKA)是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族的一員,已被證實(shí)是多種腫瘤發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)基因。本研究的目的是探究AURKA在兒童肝母細(xì)胞瘤(HB)的表達(dá)及其與臨床特征的相關(guān)性,以及AURKA抑制劑alisertib(ALS)對(duì)人肝母細(xì)胞瘤HuH-6細(xì)胞增殖、凋亡和自噬的作用及其機(jī)制。方法:1.收集重慶醫(yī)科大學(xué)兒童醫(yī)院2015-2018年33例未經(jīng)化療的人肝母細(xì)胞瘤組織切片,其中14例切片有瘤旁正常肝組織,并收集所有病例的臨床資料。采用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)肝母細(xì)胞瘤組織及瘤旁正常肝組織中AURKA的表達(dá)。然后,統(tǒng)計(jì)分析AURKA表達(dá)與HB的臨床病理特征之間的關(guān)系。2.HuH-6細(xì)胞轉(zhuǎn)染NC-siRNA或AURKA-siRNA后,使用Western blot檢查敲減效率,CCK-8檢測(cè)敲減AURKA對(duì)HuH-6細(xì)胞活力的影響。3.使用CCK-8,EdU,流式細(xì)胞術(shù),Western blot檢測(cè)ALS對(duì)HuH-6細(xì)胞周期、增殖及周期相關(guān)蛋白Cyclin-D1表達(dá)的影響。4.采用流式細(xì)胞術(shù)、TEM、Western blot檢測(cè)ALS對(duì)HuH-6細(xì)胞凋亡、自噬及凋亡自噬相關(guān)...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1AURKA在HB組織和瘤旁正常肝組織中的表達(dá)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文16圖1.1AURKA在HB組織和瘤旁正常肝組織中的表達(dá)。（A）AURKA在HB組織（**）和瘤旁肝組織（*）中的表達(dá)水平（放大倍數(shù)X100）。（B）AURKA在瘤旁肝組織中的表達(dá)水平（放大倍數(shù)X200）。（C）AURKA在HB組織中的表達(dá)水平（放大....

圖2.1敲減AURKA對(duì)HuH-6細(xì)胞AURKA蛋白表達(dá)的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文31HuH-6細(xì)胞分別轉(zhuǎn)入NC-siRNA和AURKA-siRNA48h，隨后使用Westernblot檢測(cè)敲減效率。實(shí)驗(yàn)分組為Control組、NC-siRNA組和AURKA-siRNA組。結(jié)果表明，與NC-siRNA組相比，AURKA-siRNA....

圖2.2敲減AURKA對(duì)HuH-6細(xì)胞活力的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文32圖2.2敲減AURKA對(duì)HuH-6細(xì)胞活力的影響。HuH-6細(xì)胞轉(zhuǎn)染NC-siRNA或AURKA-siRNA24h、48h或72h。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力。**p＜0.05，***p＜0.001,與NC-siRNA組對(duì)比。Figure2.2The....

圖2.3ALS對(duì)HuH-6細(xì)胞活力的影響

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文33圖2.3ALS對(duì)HuH-6細(xì)胞活力的影響。使用1、5、12.5、25、50、75、100、150或200μM濃度的ALS處理HuH-6細(xì)胞48h。CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力。***p＜0.001。Figure2.3EffectofALSoncellv....

本文編號(hào)：4012432