目的:本實驗用大鼠原代心肌細(xì)胞建立心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)損傷模型,探討大株紅景天注射液對線粒體功能及線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,明確其抗心肌細(xì)胞H/R損傷的作用及其可能的機(jī)制。方法:分離并培養(yǎng)新生SD大鼠原代心肌細(xì)胞,選取生長狀態(tài)良好的心肌細(xì)胞,隨機(jī)分為五組:①空白對照組;②缺氧/復(fù)氧組(H/R組);③后干預(yù)組(H/R組+大株紅景天注射液);④前干預(yù)組(大株紅景天注射液+H/R組);⑤前后干預(yù)組(大株紅景天注射液+H/R組+大株紅景天注射液)。采用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)測定大株紅景天注射液對心肌細(xì)胞活力的影響,確定最佳給藥濃度;用多功能酶標(biāo)儀測定反映線粒體功能的指標(biāo)變化,包括細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)含量、三磷酸腺苷(ATP)水平、線粒體膜電位(MMP);免疫印跡法(Westernblotting)測定線粒體動力學(xué)相關(guān)蛋白OPA1、Drp1以及p-Drp1的表達(dá)水平。結(jié)果:1.大株紅景天對H/R損傷的原代心肌細(xì)胞ATP、ROS含量的影響與空白對照組相比,H/R組心肌細(xì)胞內(nèi)ATP含量明顯降低、ROS含量明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義...

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１線粒體動力學(xué)及線粒體自瞻個片來源于［４０］）??２．３．２線粒體分裂的調(diào)節(jié)??在哺季Ｌ類動物細(xì)胞內(nèi)，調(diào)控線粒體分裂的蛋白主要有動力相關(guān)蛋白ｌ（ｄｙｎａｍｉｎ－ｒｅｌａｔｅｄ??

由相同的兩種Ｍｆｎ蛋白（Ｍｆｎｌ和Ｍｆｎ２）形成異二聚體，依賴Ｈ憐酸鳥昔酶（ｇｕａｎｏｓｉｎｅ??ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，?ＧＴＰａｓｅ）介導(dǎo)融合線粒體外膜；第；步，由線粒體內(nèi)膜融合蛋白一視神經(jīng)萎??縮蛋白ｌ（ｏｐｔｉｃａｔｒｏｐｈｙｌ，?０ＰＡ１）介導(dǎo)的依賴ＧＴＰａｓｅ的....

圖２－２大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代也肌細(xì)胞肉ＡＴＰ含量的比較??（注：與空白對照紀(jì)比較，＊Ｐ＜〇．胎；與缺氧／復(fù)氧組比乾排＜〇．〇５！與前后干預(yù)組比較，ＡＰ＾ＯＳ）??

預(yù)組及前后干預(yù)組，細(xì)胞肉ＤＣＦ英光強(qiáng)度減弱，即ＲＯＳ生成減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義??（Ｐ＜０．０５）；前后干預(yù)組較單一前干預(yù)組、后干預(yù)組ＲＯＳ生成減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意文??（戶＜０．０５）；前干預(yù)組與后干預(yù)組ＲＯＳ含量無明顯差異。（表２－３，圖２－３）??表２－３大株紀(jì)景天對Ｈ／Ｒ....

圖２－４大株紅景天對Ｈ／Ｒ的原代也肌細(xì)胞ＭＭＰ的影響??（注：與空白對照組比，叩＜０．０５；與缺氧／復(fù)氧組比乾紐＜０．胎；與前后干預(yù)組比較，▲Ｐ＾ＯＳ）??

差異有統(tǒng)計學(xué)意文（ＰＯ．０５）；前后干預(yù)組較單一前干預(yù)組、后干預(yù)組，紅綠焚光比值明??顯升高，說明ＭＭＰ升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（ｆ＜０．０５）；前干預(yù)組與后干預(yù)組比較ＭＭＰ??無明顯變化。（表２－４，圖２－４）??表２－４大株紅景天注射液對Ｈ／Ｒ損傷的原代也膽細(xì)胞ＭＭＰ的影響（支....

圖２－６大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代也肌細(xì)胞中０巧１、ｐ－Ｄｈ）１蛋白表達(dá)的影響??（注：與空白對照組比，＊Ｐ＜〇．胎；與缺氧／復(fù)氧組比較，排＜０．胎；與前后干預(yù)組比較，▲？＜〇．胎）??４．討論??

Ｈ?Ｍｉｌ??空白對暖沮巧氧／！氧祖后干柿組?前干巧坦前后干巧組??圖２－４大株紅景天對Ｈ／Ｒ的原代也肌細(xì)胞ＭＭＰ的影響??（注：與空白對照組比，叩＜０．０５；與缺氧／復(fù)氧組比乾紐＜０．胎；與前后干預(yù)組比較，▲Ｐ＾ＯＳ）??３．?４大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代心肌細(xì)胞中０ＰＡ１蛋....

本文編號：4001946